2017. március 8., 12:29 Szakértői cikkek: Nova Vladislavovna Izvchikova 0 10.547
A C-hepatitisz polimeráz láncreakciójának minőségi vizsgálata meghatározza a HCV jelenlétét vagy hiányát a szervezetben. Laboratóriumi körülmények között az RNS szerkezetét vizsgáljuk, amely magában foglalja a vírust. A C vírus kimutatása esetén szükséges a kezelés folyamata, mivel a máj elhanyagolt állapota súlyos következményekkel jár. Kiváló minőségű PCR-t hajtunk végre a visszanyerés után, hogy megerősítsük az antitestek hiányát. Kijelölt és rutinszerű ellenőrzés. A kórokozó alacsony koncentrációjában a vérben a PCR (kvalitatív) nem érzékel semmit, mert a diagnosztikai rendszer saját érzékenységi küszöbértékekkel rendelkezik. A betegség kezdeti stádiumában vagy enyhe formában a PCR-t ultradiagnosztika végzi ultraérzékeny berendezéseken.
Mi az RNS vírus?
A hepatitis C vírus (vagy a hepatitis C vírus RNS) RNS jelentése maga a májbetegség. A C vírus a test egészséges sejtjéhez kötődik belsejében. Idővel az egész testben elterjedt, csak a vérbe kell jutni. Ennek eredményeként a kórokozó behatol a májba, megolvad a sejtjeivel és keményen működik. A májsejtek (hepatociták) befolyása alatt vannak, változásokon mennek keresztül, és ebből meghalnak. Minél hosszabb a C vírus a májban, annál nagyobb a sejtek száma. Idővel veszélyes betegségek alakulnak ki, ami rosszindulatú degenerációhoz és halálhoz vezet.
A máj vírusfertőzése nem nyilvánulhat meg kívülről. A fertőzött személy sok éven át vagy évtizeden át teljesen egészségesnek érzi magát, és csak véletlenszerű vizsgálata leggyakrabban patológiát tár fel. A hepatitisz vére adásakor az RNS (ribonukleinsav) lánc egy részét, amely a humán gén (DNS) része, vizsgáljuk. A laboratóriumi vizsgálatok eredményeit nem szabad önkezelésre használni, mert ez csak egy mutató. A pontos képet és a további diagnózist az orvos határozza meg.
Amikor elkészült: a kutatásra vonatkozó jelzések
A HCV megerősítésekor PCR-analízist végzünk (polimeráz-láncreakció). A PCR-vizsgálatok segítenek megtalálni az RNS-struktúrában a kórokozót, és hatékony terápiát írnak elő. A következő esetekben kinevezték:
- a máj gyulladásának jeleinek kimutatása;
- szűrővizsgálatok megelőzésre;
- a kapcsolattartók vizsgálata;
- vegyes eredetű hepatitis diagnózisa (a fő kórokozó meghatározása);
- a vírus reprodukciós aktivitásának szintjének meghatározása krónikus formában;
- a máj cirrhosisa;
- meghatározza az előírt kezelés hatékonyságát.
A PCR kvalitatív és kvantitatív elemzése van. A mennyiségi PCR mutatja a vírus hordozóval rendelkező RNS százalékos arányát a vérben, és a kvalitatív a vírus jelenlétét vagy hiányát jelzi. A minőségi mutatónak (a C-hepatitis RNS jelenléte) szintén kvantitatív kutatásra van szükség. A hepatitis C okozta ágens magas koncentrációjának szintje a transzmisszió kockázata, vagyis mások fertőzése. Az alacsony számok jobban kezelhetők. A vérben lévő RNS-vírusok mennyisége nem kapcsolódik a betegség intenzitásához. Az interferon-terápia esetében a PCR-analízist is elvégezzük a kezelési ciklus időtartamának és összetettségének meghatározására.
A hepatitis C magas minőségű PCR-elemzésének jellemzői
Minőségi analízist kapunk egy olyan polimeráz láncreakció indikátorral, amely a vérben hepatitis C-vel szembeni antitestekkel rendelkezik. Javasolt a hepatitisz B tesztje, majd pozitív következtetés esetén és a hepatitis D esetében. A kvalitatívan elemzett reakciót más vérvizsgálatokkal együtt kell elvégezni. Az elemzések teljes képet fognak mutatni a vírus terjedéséről.
A vizsgálati eredményekből csak a hepatitis C pozitív vizsgálata lesz látható vagy negatív, azaz vírus jelenléte vagy hiánya. Ha a kimenet "észlelhető", akkor a vírus aktív és továbbra is aktív. A "nem észlelt" megjelölés a vírus hiányát vagy annak kis mennyiségét jelzi. Ezzel a mutatóval szem előtt kell tartani, hogy a diagnosztikai rendszerek analitikai érzékenysége eltérő, és hogy az RNS hepatitis C továbbra is a vérben lehet, de az elemzésben nem jelenik meg.
Egy különösen érzékeny PCR módszer kimutatja az ultra hepatitis C-t még gyenge mennyiségben is. Fluoreszcencia hibridizációs vizsgálatot alkalmaztunk, amely többszöröse a standard PCR rendszereknél. A módszert több esetben használják:
- a hepatitis C gyanús rejtett formái;
- A PCR-diagnosztika nem erősítette meg a kórokozót, de vannak antitestek;
- hasznosítás esetén;
- a korai fertőzés kimutatására.
Dekódolási elemzés
A HCV PCR dekódolása befolyásolja a végső döntést, különösen diagnosztizáláskor, különösen az ultrametod módszerrel. A vizsgálat fő hátránya, hogy a minta és az anyagok szigorú betartása a steril körülmények között történik. A kis eltérések néha pontatlan analitikus következtetéseket mutatnak, bonyolítják a diagnózist és az azt követő kezelést. A hepatitis RNS meghatározására vonatkozó PCR elemzése nem mindig biztosan mutatja a betegség képét, néha pontatlanságok megengedettek, és mindkét irányban.
A hepatitis vírus diagnosztizálása ajánlott átfogó vizsgálatot végezni.
A mutatók normája
A polimeráz láncreakció analízisében a vizsgálat eredményei között a JgM antitestek vírusos hepatitisz C elleni hiánya tekinthető. Ugyanakkor a szerológiai analízis eredményei azt mutatják, hogy a C vírus elleni antitestek jelen vannak, és ez szintén a normál tartományon belül van. A kvalitatív meghatározás nem mutatja a betegség intenzitását, csak a C-hepatitisz okozta RNS-ben társul. Ezt az elemzést a kezelés után megismételjük, hogy megerősítsük a tényleges helyreállítást.
eltérések
Ha a HCV RNS elleni JgM antitestek jelen vannak, ez jelzi a fejlődő fertőzést. A betegség ugyanakkor akutan vagy krónikusan folytatódik, különböző szakaszokban nyilvánul meg. Ha az antitestek számának csökkenését rögzítik, az elemzés azt jelzi, hogy a kezelés eredményeit a gyógyulás során sikerült elérni. Rendkívül ritkán fordulnak elő hamis pozitív eredmények a diagnosztikában. Ezek a terhesség alatt és más fertőző betegségekben szenvedő nőknél fordulnak elő.
A hepatitis C PCR diagnosztikája
A hepatitis C a májsejtek gyulladása, amely a HCV-vírussal (hepatitis C) való fertőzés következtében fertőzött személy vérével érintkezik. A HCV flavivírus genetikai kódját egy RNS (ribonuclenic acid) molekula hordozza a vírus szerkezetében. Ezt az életveszélyes jelenséget a titoktartás jellemzi a patológia kezdeti szakaszában. A fertőzés és a tünetek megjelenése közötti időintervallum (az immunrendszer válasza) egy hónaptól hat hónapig terjedhet. Általában a betegség krónikus formát ölel, és nehéz gyógyítani.
A modern orvostudomány lehetővé teszi, hogy kórosan diagnosztizálja a károsodást. A leggyakoribb és leghatékonyabb diagnosztikai módszerek közé tartozik a PCR-elemzés. Ebben a cikkben fontolja meg, hogy mi az és milyen fajta létezik.
Mi a tanulmány
A hepatitis C PCR-analízise laboratóriumi vizsgálat, amely kimutatja a ribonukleleninsav (RNS) genetikai anyagát. Meghatározza a vérben lévő RNS-molekulák számát, a biológiai anyag minőségét, a HCV-vírus genetikai típusát.
A C-hepatitis PCR-módszere lehetővé teszi a flavírus minimális mennyiségének kimutatását az antitestek kialakulása előtt, általában a fertőzés után.
A vizsgálatot gyakran RNS-elemzésnek nevezik, mivel a flavavírusban lévő 30-60 nm méretű ribonukleinsav-részecskéket észleli.
A vizsgálatot az alábbiak szerint végezzük: üres gyomorban a páciens vénából vért ad, amelyet ezután különböző módszerekkel tesztelnek:
- A valós idejű PCR-t zárt, automatizált módon hajtjuk végre, és az RNS-vírus kimutatásának határértéke 15 IU / ml;
- COBAS AMPLICOR 50-100 NE / ml érzékenységgel.
Minél magasabb a diagnosztikai technika érzékenységének küszöbértéke, annál nagyobb a valószínűsége annak, hogy a vizsgált biológiai anyagban megtalálják a legalacsonyabb vírustartalmat.
Milyen típusú elemzés használható
A több évtizede sikeresen használt elemzést PCR hepatitisnek nevezik, és könnyen és gyorsan kimutatható. Az orvostudományban a reakció két módja létezik, amelyek alapvetően különböznek egymástól:
- a kvalitatív módszer feltárja egy adott vírus genetikai forrásának jelenlétét a biológiai anyagban;
- a kvantitatív elemzés a genetikai anyag számát méri, amely lehetővé teszi a patológia stádiumának meghatározását vagy a terápiás kurzus hatékonyságának értékelését;
- A genotípus meghatározza a szervezetben jelenlévő vírus típusát.
Általában a vérvizsgálat segít azonosítani a virémia természetét és a kórokozó genetikai típusát. A kutatást általában a diagnosztikai rendszer érzékenységének mértékétől függően 1 alkalommal végezzük. Szükség esetén ismételt vizsgálatot végzünk ultrahangos reagenssel.
Kiváló minőségű PCR
Mi a magas minőségű PCR RNS hepatitis C-re? A reakció lényege a hepatitis RNS-szekvencia jelenléte, és a reakció csak hasonló etimológiájú virális fehérjék jelenlétében lehetséges az ELISA-ban. Az összehasonlítás során a terhelés és a májterület esetleges károsodása észlelhető.
E módszer megkülönböztető jellemzője, hogy képes egy különálló gén jelenlétét kimutatni.
Meg kell jegyezni, hogy a PCR és az ELISA vizsgálatok eredményeinek kézhezvétele után a beteg megfelelő kezelést igényel, függetlenül attól, hogy mi a végső immunvizsgálati eredmény. A pozitív fertőzés jelzi, és a PCR negatív a vírusrészecskék számának csökkenését jelzi az érzékenység szintjéhez képest.
A negatív PCR és az ELISA előállítására számos feltétel áll fenn:
- a megfelelő anyaggyűjtési feltételek hiánya;
- a kapott elemzés szennyeződést tartalmaz;
- heparin korai injekciója esetén.
A páciensnek nem kell bizonyos szabályokat követnie a vérmintavételhez a PCR elemzéshez, ebben az esetben az elemzés minősége attól függ, hogy az orvosi szakember végez-e. A betegség jelenlétének megállapítása (különösen az akut formában) a fertőzés utáni néhány héten belül jelentkezik.
Kvantitatív elemzés
A további terápia kialakulása és a test reakciója előtt a vírusterhelés kimutatására kvantitatív vizsgálatot ajánlunk. A vérmintavétel folyamatát hasonló módon végzik, mint a kiváló minőségű PCR-rel és az ELISA-val, az egyetlen feltétel az, hogy nincs lehetőség arra, hogy a beteg a dohányzás előtt eljárjon.
Az adatok tanulmányozásából nyert jellemzők tekintetében a megnövekedett terhelést 800000 IU / ml, alacsony - 400000 NE / ml mutatók jellemzik. A vírus jelenlétét a páciens testében a hepatitis PCR jelzi, nem negatív minőségi vizsgálat.
Ez a fajta kutatás lehetővé teszi annak meghatározását, hogy mennyire veszélyes a beteg az őt körülvevő emberek számára. Például a magas szint azonosítása a beteg fokozott fertőzőképességét jelzi. Ezen túlmenően az elemzés eredményei segítenek a leghatékonyabb kezelés megfogalmazásában, és meghatározzák, hogy a meglévő terápia mennyire hatékony.
A tesztek gyors negatív reakciója a kiválasztott technika sikerét jelzi, a lassú pedig a módosítások szükségességét és a sokoldalú kezelés használatát jelzi.
Az elemzési eljárás lefolytatásának folyamata a betegség lefolyásának konkrét napjától függ. Az első meghatározást a beteg kórházi felvételét követő első napon végezzük el, majd az eljárást a gyógyszerek bevétele után 4, 12 és 24 héttel megismétlik.
Így a kvantitatív elemzés azt mutatja, hogy melyik kezelés a leghatékonyabb, a rendelkezésre álló terápia időtartama és a beteg veszélye más emberekhez viszonyítva.
genotipizáláshoz
Az anyagelemzés tanulmányozása során fontos meghatározni a vírus genotípus pontosságát. Jelenleg a hepatitis C vírus 11 fajtája létezik, amelyek viszont bizonyos alfajokat tartalmaznak.
Mindezek a fajok különböző módon reagálnak a különböző kezelésekre, az egyes fajták ellenállóak számos gyógyszerrel.
A genotípus lehetővé teszi a máj állapotának meghatározását és bemutatását. Nem ritka, hogy az eredményeket „nem írják be” az eredményekbe, ami azt jelenti, hogy a beteg vérében a vírust nem érzékeli ez a vizsgálati rendszer. Ez akkor észlelhető, ha egy adott genotípus nem felel meg ennek a zónának. Ilyen helyzetben az elemzés többször megtörténik, és egy érzékenyebb rendszert használnak az anyag tanulmányozására.
Ultra érzékeny módszer
Az ultrahangos módszer bizonyos esetekben szükséges, amikor a hepatitis diagnózisát más módszerekkel nem lehet elvégezni, ugyanakkor, amikor az elemzést a kezelőorvos határozza meg:
- ha gyanúja van a hepatitis C vírus jelenlétének a betegség rejtett változatosságával rendelkező betegekben;
- a hepatitis C vírus elleni antitestek jelenléte, amelyeket nem igazolt PCR diagnosztika;
- annak érdekében, hogy meghatározzuk a kiválasztott kezelési módszer hatékonyságának minőségét, és megerősítsük a betegség megszüntetését
Ennek a módszernek az érzékenysége jóval magasabb, mint az általánosan használt, azonban ez a módszer nem zárja ki a pozitív és negatív eredményeket. Ilyen esetben fontos az eljárás minőségének és magának az anyagnak a szennyeződésének lehetősége.
A PCR-elemzés magyarázata
Az elemzés dekódolása a bemutatott anyagok alapján történik, míg a laboratóriumi kutatási eredmények bizonyos, fentebb leírt adatokat tartalmaznak.
A transzkriptum tartalmazhat egy pozitív PCR-polimeráz-láncreakciót és egy negatív ELISA-t a vizsgálatban, ami azt jelenti, hogy a betegnek nincs hepatitisz C-jele a vérben, de a múltban a betegség akut formáját átadta. A diagnosztizáláskor a szakemberek általában PCR-teszt indikátorokat használnak.
Összefoglalva a fentieket, arra a következtetésre juthatunk, hogy az elemzés során fontos betartani az összes szabályt és ajánlást, hogy a kapott eredmények a lehető legpontosabbak legyenek, és a kapott adatok alapján meg lehessen határozni az alkalmazott terápia hatékonyságát és a teljes visszanyerés további esélyét.
A hepatitis C-hez PCR-elemzés és az eredmények dekódolása
A hepatitis C PCR-elemzés olyan tanulmány, amelynek fő célja a kórokozó genetikai anyagának azonosítása. Az elemzés feltárja a betegség okozóját a polimeráz láncreakció alkalmazásával. Ez a diagnózis nagy pontosságú, specifikus a vírusfertőzés hiányának vagy jelenlétének kimutatására.
A diagnózis lényege
A hepatitis C vírusnak a páciensből történő meghatározásához szükséges PCR-analízis elvégzéséhez vénás vért veszünk, amely potenciálisan tartalmazza a kívánt vírus RNS (ribonukleinsav) HCV-jét.
A C-hepatitis PCR-vizsgálata egy eljárást jelent a beteg vérrészecskéihez való hozzáadásához:
- primerek (a szükséges gén rövid mesterségesen szintetizált régiói);
- speciális enzim (RNS-polimeráz).
A mintavétel után a biológiai anyagot a laboratóriumba küldik. A közvetlen PCR-analízishez egy adag vér szükséges, a második vizsgálatot ELISA-val küldjük. Az enzim rövid idő alatt képes növelni a kórokozó vírusának genetikai anyagának számát. Egy speciális berendezésben több hő- és hűtési folyamatot hajtanak végre. A végső szakaszban a kapott anyagot összehasonlítjuk a vírus génjeivel, és következtetést vonunk le a patológia jelenlétéről vagy hiányáról a beteg testében.
A PCR-analízis lényege és elvégzése a laboratóriumban. A szibériai filmet forgatta.
A kutatás típusai
Háromféle diagnosztika létezik, amelyek lehetővé teszik a hepatitis C vírus jelenlétének meghatározását az emberi szervezetben:
- genotipizáláshoz;
- minősége;
- kvantitatív.
Minőségi módszer
A hepatitis C diagnosztikája kvalitatív módszerrel alkalmazható olyan betegek esetében, akiknél a vérvizsgálat során a vírus elleni antitesteket észlelik. A HCV RNS akut fázisának jelenléte esetén az ilyen diagnosztikai intézkedések a fertőzés után 1-2 héten belül meghatározhatják a betegség jelenlétét. Ebben az időszakban a C-hepatitis elleni antitestek még nem alakulhatnak ki.
Kvantitatív módszer
Kvantitatív diagnosztikai módszert alkalmaznak a vírus koncentrációjának meghatározására a vérmintákban. A virémia (koncentráció fok) ilyen vizsgálata lehetővé teszi a vírusos RNS egységek számának pontos meghatározását. A végeredmény a megfelelő térfogatban van kifejezve. Ha kvantitatív elemzésről beszélünk, akkor a mutatókat 1 ml-ben mérjük (1 köbméter).
A vírusterhelési paraméter a betegség fertőzőképességének szintjét jelenti, azaz a beteg fertőzőképességének mértékét tükrözi. A gyakorlatban ez azt jelenti, hogy minél nagyobb a vírus koncentrációja a vérben, annál nagyobb a valószínűsége annak, hogy a páciens hepatitis C-vel megfertőzze másokat. A kvantitatív kutatási módszer lehetővé teszi a kezelés minőségének és hatékonyságának megállapítását is.
genotipizáláshoz
A genotipizálás feltárja a betegség okozójának mutációit. A kezelési terv megadása előtt meg kell határozni a vírus genotípust: a kezelés minősége és időtartama függ attól. Például az I-típusú betegség kezelésében a hatékonyság 60%, a II, III típusú - körülbelül 80%.
A hepatitis PCR elemzés előnyei
Az eljárás fő előnyei a következők:
- A korai diagnózis lehetősége. A PCR-analízis képes kimutatni a vírus jelenlétét a fertőzés korai szakaszában.
- Alacsony hiba eredménye. A vizsgált biológiai erőforrás lehetővé teszi, hogy diagnosztizálja a genetikai anyag egy szakaszát, amely csak egy típusú vírusfertőzésre jellemző. Ez a körülmény lehetővé teszi a hamis diagnosztikai eredmények megelőzését.
- Nagyfokú érzékenység. A PCR-analízis képes kimutatni a vírus RNS-ét kis mennyiségben, ami lehetővé teszi a látens fertőzések időben történő nyomon követését.
Jelzések
Szükség van a C-hepatitisz PCR vizsgálatára, ha rendelkezésre áll:
- a betegekkel való érintkezés, amely fertőzéshez vezethet;
- a májcirrózis tünetei (a lép kiterjedése, a máj méretének nem jellemző változása, a vénás vénás plexus kimutatása a bőr alatt);
- az ELISA pozitív eredményei;
- az AST és ALT fokozott aktivitása (a vér biokémiai elemzésében nyilvánul meg);
- a vírusellenes kezelés irányításának szükségessége;
- a vírusterhelés kialakításának szükségességének kezdeti szakaszában;
- a terápia utolsó szakaszának végrehajtása a lehetséges ismétlődések kizárására;
- a betegnek hepatitis B-je van, hogy kizárja a vegyes májkárosodás kialakulását.
Hogyan lehet felkészülni a véradásra a PCR-kutatáshoz
A PCR-elemzés előkészítése a következő ajánlásokat tartalmazza:
- vér veszik reggel;
- az elemzést üres gyomorban végzik, ezért célszerű szünetet tartani az utolsó 8-10 órás táplálékfelvétel között;
- néhány nappal a diagnózis előtt ki kell zárni a zsíros, fűszeres és sült ételeket, az alkoholtartalmú italokat és a dohányzást;
- egy nappal az elemzés előtt tartózkodni kell a nehéz fizikai terheléstől, kizárni az osztályokat az edzőteremben vagy a medencében.
Elemzési eredmények: normák és eltérések
Az elemzés önmagában nem hosszú távú, és a magasan képzett speciális hepatológus vagy fertőző betegség szakértő dekódolja a hepatitis C PCR eredményeit. Az elemzés eredményei alapján a beteg diagnosztizálódik.
A felmérés eredményeinek helyes megfejtése érdekében a következő mutatókat veszik figyelembe:
- a vér biokémiai elemzése;
- ultrahang adatok;
- biopsziás eredmények.
A mennyiségi elemzés értelmezése
A PCR mennyiségi elemzés eredményeinek megszerzése során a következő mutatókat veszik figyelembe:
Diagnózis a hepatitis C PCR-sel
Nem mindenki tudja, miért használják a hepatitis C PCR diagnosztikai módszerét. A betegségek egyik leggyakoribb csoportja a gyomor-bélrendszer fertőző betegségei. A gyomor (fekélyek), a belek (colitis, enteritis) és a máj (hepatitis) leggyakrabban érintettek.
A fent felsorolt szervek közül a legnagyobb terheket a májra terhelik. A szervezetben a máj szerepe rendkívül fontos:
- Szinte minden anyagcsere-reakció a májban történik (ez az, ahol mindenfajta létfontosságú összetevőt képeznek, amelyek lehetővé teszik a szervezet teljes működését).
- A máj a fő méregtelenítő szerv. Segítségével (különösen az epe révén) sok szubsztrátumot távolítanak el, amelyek mérgezést okozhatnak, és súlyos következményekkel járhatnak.
Sajnos sokan nem figyelik az egészségüket, ezért a máj kezd szenvedni. A különböző etiológiák (vírusos, toxikus) hepatitise általában kialakul.
A hepatitis meghatározása
A vírusos hepatitis fontos helyet foglal el a májbetegségek között. A betegség lefolyásának súlyossága, a kezelés bonyolultsága elsődleges helyet foglal el a szerv másik természetének patológiája között.
Minden hepatitis akut és krónikus. Az A és B hepatitist akutnak nevezzük, a krónikus C-hepatitisz közül az első.
Ezt a betegséget a hepatitis C vírus okozza, melynek jellemzője, hogy a betegség sokáig tarthat klinikai megnyilvánulások nélkül.
Ez főleg a véren kerül átadásra. A vér áramlásával a vírus belép a májba, ahol a sejtekben szaporodik. A virion felhalmozódása következtében a fertőzött hepatocita megsemmisül. Erre válaszul antitestek kezdődnek, amelyek a hepatociták maradványait támadják meg. Emiatt idővel kialakul a májsejtek elleni medence, ami súlyosbítja a betegség lefolyását.
Mivel a betegség enyhe tünetmentes vagy tünetmentes, és a klinikai tünetek csak akkor jelennek meg, ha a sejtek jelentősen érintettek, ez a betegség diagnosztikai módszerek létrehozását teszi szükségessé annak jelenlétének kimutatására és megfelelő intézkedések megtételére.
A hepatitis C diagnózisa: kvalitatív és mennyiségi elemzések
Jelenleg a hepatitis C diagnosztizálásához olyan módszereket alkalmazunk, mint a májbiopszia és az immunogram.
Ezek lehetővé teszik, hogy közvetlenül meghatározzuk a fertőzött hepatociták (májbiopsziás minták) vagy az érintett sejtek elleni specifikus antitestek (immunogram) jelenlétét. Van azonban olyan módszer, amely lehetővé teszi a vírus jelenlétének megbízható meghatározását. Ez PCR - polimeráz láncreakció.
Ennek a módszernek a lényege abban rejlik, hogy bizonyos körülmények között előfordul az RNS-láncok termelése. Ez annak a ténynek köszönhető, hogy a szóban forgó vérben vagy biopsziában van egy vírusrészecske fragmense. A tápközeg egyes molekuláival való összekapcsolásakor a vírus RNS-re komplementer láncok szintézise történik. A hepatitis C vírus ismert nukleotidszekvenciájával végzett későbbi elemzésükben és összehasonlításukban megállapítható, hogy a vírus jelen van-e a szervezetben, és hogy a májkárosodás van-e.
A PCR-t a hepatitis vírus elleni specifikus ellenanyagok kimutatása után végezzük. A teszt elvégzése után az eredmény - az RNS „kimutatható” vagy „nem észlelhető”. Alkalmanként „nem elegendő anyagot” mondhat - ebben az esetben a hepatitis C ismételt vizsgálata szükséges.
Ha a vírusrészecskék száma kisebb, mint a szükséges minimális mennyiség, akkor azt mondhatjuk, hogy nincs hepatitis, és a genetikai anyag minimális mennyisége „összetéveszthető” a genetikai anyag, vagy néhány, a vírussal egybeeső nukleotidszekvencia után.
- A PCR esetén negatív eredmény figyelhető meg, ha a vérben valóban vírusrészecskék vannak, de olyan kicsi (a közelmúltban bekövetkezett fertőzés vagy az elemzés előzte meg a hosszú távú és intenzív vírusellenes terápiát), hogy a tesztrendszer egyszerűen nem tudta normálisan meghatározni koncentrációjukat. RNS - "nem észlelhető".
- Ha a PCR pozitív eredményt mutat, akkor annyi vírusrészecskék vannak a vérben, hogy azok száma meghaladja a vizsgálati rendszer alacsonyabb érzékenységi küszöbét. Ebben az esetben magas a fertőző folyamat kialakulásának kockázata (vagy már meglehetősen előrehaladott állapotban van). Általában a nagy mennyiségű vírus már a kezelés és az azt követő májtranszplantáció jelzése.
Néha egy teszt hamis pozitív vagy hamis negatív lehet.
A hepatitis hamis negatív PCR-eredményét figyelték meg abban az esetben, ha bizonyos komponensek jelen vannak a reakcióközegben, amely gátolja a vírusrészecskék képződését. Emiatt nem lehet valós képet kapni a vér állapotáról, amely hozzájárul a vírus áthaladásához és a betegség előrehaladásához. A heparin jelenléte a vérben szintén befolyásolhatja a reakciót (a vér relatív viszkozitásának csökkentésével). Az elemzés helytelen értelmezése akkor is lehetséges, ha a vizsgált anyag szállításának és tárolásának feltételei nem teljesültek.
Hamis pozitív eredmények, amikor a C-hepatitisz diagnosztizálódik, a PCR leggyakrabban akkor következik be, amikor a cső vagy a munkakörnyezet szennyezett. Ezenkívül pozitív eredményeket lehet megfigyelni más csoportok hepatitis vírusainak jelenlétével (keresztreakció miatt).
A hepatitis C kimutatására szolgáló PCR kvalitatív elemzése
A nagyszámú krioglobulin jelenléte a vérben szintén közvetlenül befolyásolja a PCR lefolyását. Emiatt elengedhetetlen, hogy a hepatitis C vizsgálata előtt meg lehessen határozni a vérben lévő koncentrációjukat annak érdekében, hogy előzetesen kimutassák az eredményt és megakadályozzák azt.
E vizsgálatok után világossá válik, hogy vannak-e vírusos részecskék a vérben. Ezek meghatározásakor ajánlatos az antivirális terápia azonnal megkezdeni, hogy lassítsák a folyamat progresszióját. A hepatitis B-szel ellentétben nincs teljes gyógyulás a C-hepatitisben; a betegség csak a látens stádiumba megy, és lassabban indul el. A májkárosodás elkerülhetetlen. A folyamat utolsó szakaszában, amikor a máj már nem képes megbirkózni a funkciójával, megkövetelheti a transzplantációt.
A kezelést főleg két gyógyszerrel - interferonnal és ribavirinnel - végzik.
A hepatociták legyőzésének folyamatának lassításában bizonyították hatékonyságukat. Az út mentén az infúziós terápia feltétlenül szükséges a máj munkájának megkönnyítésére.
Minden olyan beteg, aki a vírusrészecskék számának növekedését látta a vérben, szükségszerűen egy hepatológusnál regisztrálható. Évente többször ajánlatos megelőző vizsgálatot végezni, hogy meghatározzák a folyamat előrehaladását és a transzplantációra vonatkozó jelzések időben történő felismerését. Emellett hepatoprotektorok is használhatók, bár az orvosok véleménye kissé eltér. Egyesek úgy vélik, hogy ezek a gyógyszerek lehetővé teszik, hogy felfüggessze a folyamatot, és megvédje a még érintetlen hepatocitákat; mások meg vannak győződve arról, hogy nincs értelme őket venni, és intenzív vírusellenes terápiát kell végezni.
Így a C-hepatitis a betegségek kategóriájába tartozik, amelynek azonosítása bizonyos nehézségekkel jár. A diagnosztikai módszerek javítása, valamint az időben történő megelőző vizsgálatok csökkentik a betegség előfordulását. Fontos a betegség megelőzése is. Gondosan el kell kerülni a vérrel való érintkezést, el kell utasítania a kábítószer-fogyasztást, csak ezután megszűnik ez a betegség. A megelőzés és a kezelés fő célja a beteg tudatos hozzáállása az egészségükre.
C-hepatitis PCR vizsgálata: típusok, indikációk, transzkriptum
A vírusos hepatitis C egy súlyos betegség, amely májkárosodásban szenved. A betegek nyolcvan százaléka krónikus. A vírus a májsejtekben - hepatocitákban - szaporodik és halálát okozza. A halott szövetet a kötőszövet fókuszai váltják fel, a fibrosis kialakul.
Mivel a fibrosis kialakul, a máj nem tudja teljesíteni a funkcióit, a máj cirrhózisa kezdődik, ami komplikációi miatt veszélyes: a portál vénás rendszerben fellépő nyomás, a gastrointestinalis vérzés, a véralvadás károsodása, az agyi magok károsodása által okozott mentális változások.
A betegség oka a vírus által okozott fertőzés a Flaviviridae családból, amely az RNS vírusok típusához tartozik. Ez azt jelenti, hogy a genetikai anyag, amellyel a patogén fehérjéi szintetizálódnak, a ribonukleinsavmolekulában van kódolva. A fertőzés véren, szexuálisan és egy terhes nőtől a magzatig terjed. Sajnos a fertőzés és az ellenanyag-termelés kezdete között elegendő idő állhat be - két hét és hat hónap között. Ez nem teszi lehetővé a fertőzés ELISA-val történő meghatározását és a kezelés kezdetét.
Mi a PCR-elemzés?
A PCR a molekuláris elemzés módszere, amely lehetővé teszi a patogén genetikai anyagának kimutatását a fertőzés utáni első héten a polimeráz láncreakció segítségével. A vizsgálat nagy specifitással, pontossággal rendelkezik, és nem csak a vírus jelenlétének vagy hiányának meghatározását teszi lehetővé, hanem annak koncentrációját és genotípusát is.
A vizsgálathoz a beteg vérét veszik fel, amelyben a vírus RNS potenciálisan megtalálható. A primereket hozzáadjuk a kis hosszúságú gén mesterségesen szintetizált szintjéhez, és az RNS polimeráz egy speciális enzim, amely többször megnöveli a kórokozó genetikai anyagának mennyiségét. Speciális berendezéssel több fűtési és hűtési ciklust hajtanak végre. Ezután az anyagot elemzik és összehasonlítják a vírus ismert génjeivel, amelyek alapján a fertőzés jelenlétéről vagy hiányáról következtetést levonnak.
A hepatitis C PCR-analízisének típusai
A PCR-elemzés három típusa létezik:
- A PCR kvalitatív elemzése. A tanulmány első szakasza. Ez lehetővé teszi a vírus genetikai anyagának azonosítását a vérben.
A PCR kvantitatív elemzése. Lehetővé teszi a vírus terhelésének meghatározását - a kórokozó genetikai anyagának egy milliliterben való koncentrációját. Ezt a vizsgálatot a kezelés megkezdése előtt végezzük, majd az első, negyedik, tizenkettedik és (ha a kurzus hosszú) huszonnegyedik hetes kezelését annak hatékonyságának értékelésére.
A hepatitis C PCR analízisére vonatkozó indikációk
A PCR-vizsgálatot az alábbi esetekben írják elő:
- érintkezés egy betegrel, amelynél fertőzés fordulhat elő;
- pozitív enzim immunoassay;
- a máj cirrhosisának jelei: a máj méretének megváltozása, a megnagyobbodott lép, a bőr alatti vénás plexus megjelenése a hason;
- a májkárosodás tüneteinek megjelenése: a jobb hasi fájdalom, a bőr sárgulása;
- az ALT és az AST fokozott aktivitása a vér biokémiai analízisében;
- a kezelés megkezdése előtt a vírusterhelés meghatározására;
- az antivirális terápia hatékonyságának ellenőrzése;
- a kezelés után a visszaesés szabályozása;
- diagnosztizált hepatitis B jelenlétében, hogy kizárja a vegyes májkárosodást.
A hepatitis C-vel kapcsolatos PCR-vizsgálatok magyarázata
A hepatitis C-re vonatkozó PCR-analízis és enzim-immunoassay dekódolását hepatológus vagy fertőző betegség szakértőjének kell elvégeznie. A PCR eredményeinek elemzése szükséges a vér, a biopszia és az ultrahang biokémiai analízisével. Csak egy képzett orvos képes elemezni a kutatás eredményeit, és ezek alapján előírja a helyes kezelést.
A kvalitatív elemzés dekódolása.
Az elemzett biológiai anyagban megtalálható a kórokozó genetikai anyaga. A fertőzés megerősítette.
A fertőzés hiányzik, vagy a patogén RNS mennyisége az érzékenységi határ alatt van.
Kvantitatív elemzés dekódolása.
Normál arány az egészséges emberek számára. Ez azt jelenti, hogy a vizsgálati anyag nem tartalmaz C-hepatitis RNS-t, vagy annak koncentrációja a vizsgálat érzékenységi küszöbértéke alatt van.
Az RNS-koncentráció a mennyiségi tartomány alatt van. Ezeket az eredményeket nagyon óvatosan értelmezik, korrelálják az egyéb tanulmányok adataival, gyakran újra tanulmányozzák.
A vírusterhelés szintjét egy adott koncentrációnál alacsonynak tekintjük. Általában a vírus mennyiségének csökkenése azt jelenti, hogy a terápia sikeres.
Több mint 8 * 10 ^ 5 NE / ml
A vírusterhelés szintje egy adott koncentrációnál magasnak tekinthető.
Több mint 2,4 * 10 ^ 7 NE / ml
Az RNS mennyisége meghaladja a mennyiségi tartomány felső határát. Ebből az eredményből nem lehet következtetéseket levonni a vírusterhelés mértékéről. Általában ilyen esetekben a vizsgálatot egy vérminta hígításával megismételjük.
A genotípus dekódolása.
Egy adott genotípus RNS-je
A biológiai anyagban egy bizonyos genotípusú és altípusú hepatitis C vírust észleltek. Az eredmény római számokkal és latin betűkkel van kódolva, például - 1a, 2b. Összesen hét genotípus és hatvanhét altípus van, de Oroszországban csak három első típus létezik.
A Hepatitis C vírus RNS kimutatható
Az RNS-t egy ritka genotípus vérében találták meg Oroszország számára, amely nem tulajdonítható az első, második vagy harmadik típusnak. Több kutatásra van szükség.
Ez az eredmény azt jelzi, hogy a beteg egészséges, vagy hogy a kórokozó RNS mennyisége túl kicsi.
Lehetséges, hogy a C-hepatitis PCR-analízise negatív, és az enzimhez kötött immunoszorbens vizsgálat felismeri a vírus elleni antitesteket. Ez azt jelenti, hogy a betegnek akut hepatitisz C-je volt, és önmagában gyógyult. Körülbelül húsz fertőzéses eset spontán helyreállítást eredményez, ha a beteg teste megfelelő ellenállással rendelkezik a fertőzéssel szemben.
Bár a PCR nagyon pontos, eredményei torzulhatnak az alábbi helyzetekben:
- a vért nem megfelelő körülmények között szállították a laboratóriumba, a hőmérsékletet megsértették;
- a biológiai anyagminta szennyezett;
- a vérben heparin és más antikoaguláns maradványai voltak;
- A kutatók gátlók voltak - olyan anyagok, amelyek lassítják vagy megállítják a polimeráz láncreakciót.
A PCR előnyei más módszerekkel szemben
- Diagnózis a korai szakaszban. A PCR kimutatja a kórokozó genetikai anyagát. Immunfluoreszcens analízis alkalmazásával csak immunoglobulinokat lehet azonosítani - olyan anyagokat, amelyeket a szervezet a fertőzésre adott válaszként termel. A hepatitis C fertőzés esetében a fertőzés és az immunválasz kezdete között eltelt különbség több hét és hónap lehet, ebben az időben az ELISA hatástalan lesz. A PCR választ ad a fertőzés utáni első héten.
Alacsony hiba valószínűsége. A vizsgált anyagban meghatározzuk a genetikai anyag területét, amely csak egy típusú kórokozókra jellemző. Ez kiküszöböli a hamis eredményeket. Amikor ELISA-hibák jelentkeznek, mivel az azonos típusú antitestek különböző vírusokkal szabadulhatnak fel - az ilyen antitesteket kereszt-antitesteknek nevezik.
Hogyan lehet felkészülni a véradásra a PCR-kutatáshoz
A hepatitis C PCR-analíziséhez vénás vért gyűjtünk. Általában a vérből két adagot veszünk a beteg vénájából: az első PCR-re és a második ELISA-val történik. Ez azért történik, hogy pontosabban értékeljük, hogy a beteg mennyire fertőzött egy vírussal, és hogyan küzd az immunitás.
Általában a betegnek az alábbi szabályokat kell követnie:
- vérvizsgálatot végeznek reggel;
- Az utolsó étkezés és a véradás közötti időszaknak nyolc-tíz órának kell lennie;
- két vagy három nappal az elemzés előtt el kell hagyni a sült és zsíros ételeket és az alkoholt;
- 24 órával az elemzés előtt a betegnek kerülnie kell a fizikai terhelést: ne hordjon súlyokat, ne menjen az edzőterembe vagy a medencébe.
PCR kvantitatív a hepatitis C esetében
A hepatitis C vírus képes a vérsejtekben szaporodni és lymphoproliferatív betegségeket okozni. A többszörös mutációk miatt a szervezet immunrendszere gyengül, a vírus genotípusai és altípusai megjelennek. Egy adott típus helyes és időben történő meghatározásával az antivirális terápia hatékonysága függ. A fertőzés veszélye, hogy a betegség tünetmentes. A 100-ból csak 15 százaléka hányingert és hányást, fogyást és lázat tapasztalhat.
A hepatitis C vírus kimutatása
A hepatitis C standard sebessége 40 és 60 nm közötti, a legtöbb lipid, a máj akut vagy a krónikus betegségből eredő károsodása. A hepatitis C, nevezetesen a Togaviridae család RNS-vírusa, rendkívül ellenálló, vérátömlesztéssel vagy nem steril termékek használatával, nem megfelelő higiéniai ellátással stb. Kerül átadásra. A mennyiségi elemzés lehetővé teszi a vér vizsgálatát és a fertőzött vírus genetikai szerkezetének azonosítását.
A hepatitis C-hez és genotípusaihoz kvantitatív elemzést végeztünk. Az elemzőtől függően meghatározható az RNS-vírus három előfordulási szintje.
Az altípusok különböző módosításokat hozhatnak létre, így az analizátor sajátosságának és érzékenységének száz százalékosnak kell lennie. A betegség betegségben történő kimutatása mellett meg kell határozni annak súlyosságát. Egyes laboratóriumok nem rendelkeznek az RNS vírus dekódolásával kapcsolatos összes adattal, hamis pozitív válasz lehetősége áll fenn.
A hepatitis C-vel kapcsolatos kutatások pontosabbak lesznek ezeknél a mutatóknál:
AlAT, AsAT; Alkáli pajzs; LDH.
Figyelembe véve e mutatók eredményeit és a test általános állapotát, megjelenik a fertőzés mértéke, az alakja és a hepatitis C sejtek száma a vérben. Ez hozzájárul a gyógyulási folyamathoz és a vírusellenes kezelés hatékonyságához.
A hepatitis C elemzésének típusai
A többdimenziós láncreakció (PCR) megmagyarázza a DNS-részecskék számát a betegek elemzésében, ugyanakkor helyesen azonosítja a fertőző ágenst.
Előfordulhatnak fertőző betegségek okozati okai. A máj fertőzése, mint például a hepatitis C, akkor kezelhető, amikor időben észlelik. Ha egy vírus gyanúja áll fenn, PCR-analízist végzünk.
Tekintettel arra, hogy hosszú ideig a vírus tünetei elfedhetők, a személy nem érzi a betegség kezdetét. Az esetek 60-70% -ában végzett alapos vizsgálattal azonban hepatitis C-t észlelünk, az első elemzést, amelyben az ELISA, majd a PCR-diagnózis következik. Az elemzést bizonyos időszakokban végzik el a betegség stádiumának meghatározására és a megfelelő kezelés megírására. Anélkül, hogy ezt elvégeznénk, az összes ilyen eljárás alkalmazása nélkül lehetséges, hogy hepatitis ellen vakcinálják.
Az elemzés, beleértve a PCR-diagnosztikát is, képet ad a betegségről, milyen aktív a vírus a különböző fejlődési időszakokban.
Először is van egy kvalitatív elemzés, amely csak megerősíti a fertőzésre vonatkozó hipotézist, majd kvantitatív, meghatározza a máj terhelését. Az ideális megoldás a C-hepatitis negatív eredménye a beteg genetikai anyagában.
Minőségi és mennyiségi elemzés
Minőségi és mennyiségi elemzés van. Az első lényege, hogy meghatározza a fertőzés jelenlétét a vérben. Ez azt jelenti, hogy a vírus megfertőzi az egészséges májsejteket. Ha a C-hepatitisz elleni antitestek egy betegben találhatók, azonnal elvégezzük a minőségi vizsgálatot. Az az arány, amit az eredménynek meg kell adnia, nem „kimutatható a vérben”. A vírus koncentrációjának meghatározásakor szükség van a diagnosztikai rendszer érzékenységének ismeretére, mivel az antivirális terápiában részesülő emberek elvégezhetik az elemzést. Az analizátor érzékenysége nem lehet kevesebb 50 IU / ml-nél.
Ha vírust észlelünk, kvantitatív elemzést végzünk, azaz a vírusterhelést, amely meghatározza a vírus koncentrációját a vérben és a betegség súlyosságát.
A vírusos RNS, amely egy bizonyos mennyiségű vérben van, 1 ml / 1 centiméterre vonatkoztatva. A vírusterhelés számszerűsítése után meg lehet határozni a még fertőzött környezet fertőzésének mértékét. Amint a C-hepatitis koncentrációja emelkedik a vérben, szükséges a környezetből izolálni.
A korai stádiumban fontos a hepatitis koncentrációjának meghatározása a rehabilitáció ütemének meghatározása érdekében. Ha a hepatitisz C aránya meghaladja a 800 ezer NE / ml-t, akkor ez túl magasnak tekinthető, akár egy millió - növekedés is kritikus. Ha a kvantitatív tartomány kisebb, mint 400 ezer NE / ml, úgy véljük, hogy a körülöttük lévő fertőzés kevésbé valószínű. Ez az ábra világossá teszi, hogy a hepatitis C nagyon kis adagokban van jelen a szervezetben. Az elemzés nem tudta meghatározni a vírus RNS-részecskéinek mennyiségi értékét, így többször is kijelölték a diagnózis pontossága érdekében.
Kvantitatív elemzés eredményei
A vírusterhelés mennyiségének meghatározása a beteg vérében a fertőzés mértékének meghatározása mások számára.
Hepatitis C teszt
lehetővé teszi az antivirális terápia hatékonyságának, a fertőzőképesség mértékének és a fertőzött szövetek számának értékelését.
Fontos a betegség előrehaladásának megelőzése, a megelőző intézkedések időben történő meghozatala, a PCR diagnosztikán alapuló helyes kezelés előírása. Ha az eredmények szerint a vírusterhelés szintje kisebb, mint 400 ezer NE / ml, akkor a koncentráció minimális lehet, ami a lehetséges teljes visszanyerést jelzi. A pozitív eredmény normája a fertőzés hiánya.
A PCR-elemzés eredményei:
A pozitív válasz a biológiai anyag fertőzését jelenti. Az elemzés lehetővé teszi a fertőzött sejtek pontos számának meghatározását. A negatív válasz azt jelzi, hogy a fertőzés hiányzik, amit a szervezetben alaposan megvizsgálnak.
A C-hepatitis mennyiségi meghatározásának módszere pontos és informatív, nagy érzékenységű berendezéseken. Az elemzés eredményeinek megfejtése lehetővé teszi, hogy megtudja, hogy a fertőzés és annak specifitása a legkevésbé fertőzött sejteket látja-e az érzékeny analizátorokon.
Az elemzés során ritkán adnak meg hamis pozitív vagy ellentétes eredményeket, gyakrabban ez az immunvizsgálati vizsgálatokban történik.
A hepatitis C egyike a legveszélyesebb és legnehezebb vírusbetegségek diagnosztizálásának. A betegség meghatározásához a C-hepatitis PCR-módszerét alkalmazzuk, amely egy új, high-tech technika, amely lehetővé teszi a genetikai anyagok vizsgálatát a legkisebb részecskékben (molekulák) és a legkisebb mennyiségekben az élet létezéséhez. A hepatitis vírus nagyon perzisztens, hosszú ideig élhet a környezetben, és az emberi testben jól megalapozott.
Mi az a PCR?
Ma sokféle betegség van. És nem kisebb számú módszer a meghatározásukhoz. Mivel a fertőzési szerek megtanulták gyökereződni a környezetben, és könnyen fejlődnek, a legújabb technológiákat használják fel diagnosztizálásukra. A polimeráz láncreakció (PCR) egy gyorsabb és pontosabb módszer, melynek célja a betegség okozójának megtalálása a hepatitis vírus DNS-ben a mintában lévő részének jelentős növelésével. Róluk gyakran írnak: tűt keresnek a szénakazalban, majd a tűket rakja.
A PCR módszer típusai
A kvalitatív tesztelés segít meghatározni a hepatitis C vírus jelenlétét a szervezetben.
A hepatitis kvalitatív és kvantitatív elemzése. Annak megállapításához, hogy a vírus a szervezetben van-e, és azok, akik a C-hepatitisz elleni antitesteket találták, jó minőségű vizsgálatot kell végezniük. A dekódolási elemzés eredménye: "pozitív"; „Negatív”. A negatív jelentés azt jelenti, hogy egy személy egészséges, vagy nincs elég anyag a vérben, és nem találhatók meg. Ezért érdemes egy idő után újra megvizsgálni.
A pozitív eredmény a fertőzés fennállását jelzi. Ez szinte mindig a pontos érték. A téves eredmények általában az emberi tényezőtől függnek (nem megfelelő tárolás vagy az eljárás szabályainak be nem tartása). Ha az arány, az eredmény negatív. A vizsgálat előtt nincsenek külön szabályok, csak vért veszünk a vénából.
Ha megállapítást nyer, végezzen mennyiségi elemzést (vírusterhelés) - számszerű értékeket ad: mennyi a hepatitis vírus RNS-je a vizsgált anyag előírt térfogatában. A fertőzés aktív kialakulásával a fertőzött személy 1-2 héten keresztül észlelhető. A vért is általában vizsgálják, mert az ágensek szabadon keringenek benne.
A kvantitatív PCR-elemzés jellemzői
A mennyiségi PCR segít a hepatitis C leghatékonyabb kezelésének kiválasztásában.
A kvantitatív elemzés különbsége az, hogy nem mindegyik áthalad. Minőségi - meghatározza a jelenlétet és a kvantitatív - segít a "hepatitis vírus" következtetésének megerősítésében, a betegség lefolyásának előrejelzésében, és meghatározza a kezelés lefolyását. Mennyire hatékony a terápia az RNS-ek száma a kezelés előtt és alatt. Segítségével meghatározza a gyógyszerek adagjának kinevezését is.
Általában a kezelés megkezdése előtt keletkezik. A főbb jelzések lehetnek:
a vírusterhelés meghatározása és a vírusellenes terápia ellenőrzése, a magas minőségű PCR a hepatitis C antitesteket talált, akut és krónikus C-hepatitist, a vegyes hepatitisz létezését, a kezelés tervezésekor, ha a kvalitatív vizsgálat a betegség tizenkettedik hetét követően még mindig megtalálta a betegség jelenlétét.
Nézze meg, mi a vírusterhelés a hepatitisben: az alacsony terápiát sikeresen végzik; megnövekedett - a kezelés nem hatékony és módosítani kell.
Mi történik a betegség különböző szakaszaiban?
Az elemzés segít a terápia eredményeinek nyomon követésében a kezelés minden szakaszában.
A betegség különböző fázisaiban vizsgálatot végeznek a kezelés előnyeiről és időtartamának tervezéséről. A terápiára adott jó válaszokkal rövidebb. Ellenkező esetben a vírus lassú visszavonásával a kezelés meghosszabbodik. A hepatitis PCR-je 1.4, 12, 24 hetes kezelés. Ha a mutatók 12 hét után nem esnek le, arra a következtetésre jutottak, hogy a terápia nem alkalmas erre a szervezetre. Ezt az elemzést arra használjuk, hogy meghatározzuk, milyen aktív a fertőzés, és mennyire valószínű, hogy a fertőzést továbbítja. Például a terhesség alatt fennáll a veszélye annak, hogy megfertőzi a babát. A kezelés után azonosítsa a betegség megismétlődésének kockázatát.
másolat
A vizsgálat után az elemzés nem számokban, hanem szavakkal: „a mérési tartomány alatt” és „nem észlelhető”. A mennyiségi PCR minél kvalitatívabb. A "nem észlelt" következtetés szerint a fertőzés nem található. "A mérési tartomány alatt" - a teszt nem találta meg a vírust, de kis értékű. Ebben a helyzetben végezzen egy második tanulmányt.
A vírusterhelés a fertőző RNS számának meghatározása az előírt mennyiségű vérben (1 ml = 1 köbméter). Nemzetközi mérésekben IU / ml. Külön laboratóriumok jelzik a másolatokat / ml. A különböző vizsgálati rendszerek saját módon képesek megfejteni a komponensek nemzetközi értékekre történő fordítását. 1. táblázat: A vírus RNS kvantitatív elemzése
A hepatitis diagnózisa számos tesztet tartalmaz a vírus jelenlétének meghatározására a vérben. A betegség kimutatásának egyik módja olyan kutatási módszer, mint a C-hepatitisz PCR. Mi az, miért olyan fontos a hepatitis PCR-elemzése, mint az elvégzése és dekódolása?
Mi az
A polimeráz láncreakciót vagy a PCR-t használják gyomorfekélyek, colitis, enteritis diagnosztizálására. Fő előnye azonban, hogy segít a szervezetben mind a hepatitis C vírus, mind annak ellenanyagainak kimutatásában, amelyek képesek az immunrendszer reakcióit nem mutálódni képesek.
A tanulmány és annak lényege abban rejlik, hogy bizonyos körülmények között létrejön a Hepatitis RNS láncreakciója. Ha a hepatitis C vírus nukleotidszekvenciájával összehasonlítva egybeesések találhatók, ez azt jelzi, hogy a vérben vírusrészecskék vannak, és a májban szétesési folyamatok lépnek fel. Ha a vírus mennyisége egy bizonyos szint alatt van, akkor negatív diagnózis készül, és ha nagyobb, akkor pozitív.
A hepatitis PCR módszerével kétféle vérvizsgálat létezik: kvantitatív elemzés és kvalitatív elemzés.
A fentiekben említett mennyiségi PCR meghatározza a hepatitis vírus RNS koncentrációját. Emellett képes tájékoztatást adni a patológia kialakulásának intenzitásáról és az előírt kezelés hatékonyságáról. A hepatitisz C kvantitatív elemzése rendkívül fontos, mivel az antivirális gyógyszerekkel szembeni rezisztenciát rögzíti, és lehetővé teszi a terápia beállítását.
Miután a páciens kezelésen ment keresztül, a PCR segít meghatározni a találkozók további sorrendjét. Néhány esetben további felmérésekre van szükség. Például, ha az ALP szintje emelkedik (de nem több, mint 2 alkalommal hat hónapon belül), és az analízis átírása azt mutatja, hogy a vírusterhelés 105 IU / ml felett van, a páciens biopsziát ír elő. Ha a PCR kvantitatív elemzése súlyos gyulladást és fibrózist tár fel, a betegnek vírusellenes gyógyszerekkel történő kezelést kell előírnia.
Olyan helyzetekben, ahol nagyszámú vírusrész van kombinálva magas ALT-vel, a beteget azonnal fel kell kezelni további diagnosztikai intézkedések nélkül.
Vegyük ezt a tesztet, és derítsd ki, ha májelégtelenséged van.
Csak a szakképzett és tapasztalt szakemberek képesek a hepatitisre vonatkozó vér kvantitatív elemzésében kvalitatívan megfejteni, és a modern technológiák segítik ezt a vírus alacsony koncentrációjában a vérben.
A PCR kvalitatív elemzése a vírus tényleges jelenlétének meghatározására és megerősítésére irányul. Ezt akkor végezzük, ha a hepatitis elleni antitesteket a vérben észlelik. A hepatitis kvalitatív elemzése, amely garantálja az eredmény pontosságát 100% -kal, és lehetővé teszi, hogy a betegség korai szakaszában diagnosztizáljon, ami lehetővé teszi a hepatitis elleni küzdelem megkezdését a fertőzés utáni első hetekben, és növeli a teljes gyógyulás esélyét (a B típusú betegség esetében).
A PCR előnyei
A PCR-ben végzett és a hepatitis vérvizsgálatát megfejtő vizsgálatban meghatározhatjuk a kórokozó genotípusát is. Összesen 6 vírus genotípust és nagyszámú altípust, de régiónkban 1, 2 és 3 genotípus váltak gyakorinak.
Az ilyen típusú diagnózis további előnyei:
- a kapott mutatók nagy pontossága és alacsony hiba valószínűsége;
- a vérben a vírusrészecskék iránti magas érzékenység;
- több kórokozó egyidejű azonosításának lehetősége;
- nagy antigén variabilitással rendelkező intracelluláris patogén mikroorganizmusok diagnosztizálása;
- A hepatitis dekódolási elemzésével végzett munka lehetővé teszi a rejtett jelenlegi fertőzések észlelését.
Ki nevezi ki
A hepatitis PCR-elemzését az alábbi kategóriákba kell sorolni:
- terhes nők;
- egészségügyi személyzet;
- potenciális vér- és szervadományozók;
- azoknak, akiknek a betegség jellegzetes jelei vannak;
- HIV-fertőzött személyek;
- függők;
- a szexuális dolgozók.
Hogyan történik az elemzés, és szükség van rá felkészülni
A vérmintavétel PCR-re vénából történik. Általános szabály, hogy ez reggel, mielőtt az ember eszik, előfordul, mert étkezés után legalább 8 órának kell eltelnie. Szélsőséges esetekben a vért a nap folyamán vagy este lehet vizsgálni, de az analízis és az étkezés közötti időintervallumnak legalább 5 órának kell lennie.
Az emberi tényező mennyiségi hatással lehet az eredményekre: pontosságuk bizonyos esetekben 100% -ról 95% -ra csökken, ezért elő kell készíteni a véradást. Az elemzéshez szükséges bioanyag minősége akkor megfelelő, ha a beteg az alábbi szabályokat követi:
- véradás előtt csak tiszta vizet inni;
- a vizsgálat előtt két nappal meg kell szüntetni a sült és zsíros ételek, valamint az alkoholtartalmú italok bevitelét;
- egy nappal a látogatás előtt a laboratóriumnak abba kell hagynia a gyógyszerek szedését. Ha ez nem lehetséges, elengedhetetlen a laboratóriumi technikus és a kezelőorvos értesítése;
- a stresszhelyzetek és a fizikai terhelés elkerülése előtti napon;
- az ultrahang, a röntgen és a műszeres vizsgálatok nem végezhetők röviddel a véradás előtt;
- egy órával az elemzés előtt meg kell tartózkodnia a dohányzásról;
- 20 perccel a véradás előtt meg kell zavarni, nyugodni és lélegezni.
Ha egy 5 évesnél fiatalabb gyermek elhalad a tanulmányon, a szülőknek biztosítaniuk kell, hogy félévenként 10 percenként főzzük a vizet, mielőtt a biológiai anyagot bevennék.
A kapott adatok dekódolása
Az elemzés dekódolása szavakkal (minőségi vizsgálat esetén), például „nem észlelhető” vagy „a változások tartománya alatt” ábrázolható. Az első esetben ez azt jelzi, hogy a fertőzést nem észlelték. A második - hogy a vírus jelen van, de kis mennyiségben. Ez a helyzet újra kutatást igényel.
A vírusterhelést a fertőző RNS mennyisége határozza meg, és IU / ml vagy másolatok / ml-nek nevezzük.
A hepatitis C kvantitatív analízisének normál indikátora (norma) az 1,8x102 és 2,4x107 NE / ml közötti tartomány.
A vírus koncentrációja a vérben lehet:
- alacsony: 600 NE / ml és 3x104 / ml között;
- táptalaj: 3x104 NE / ml-től 8x105 NE / ml-ig;
- magas: több mint 8x10 5 NE / ml.
A hepatitis PCR kvantitatív és kvalitatív elemzése lehetővé teszi a vírus jelenlétének meghatározását a szervezetben és koncentrációjának szintjét. A többdimenziós láncreakció képes a betegség korai stádiumában történő diagnosztizálására, de ehhez szükséges, hogy a betegek a lehető leghamarabb forduljanak orvoshoz, és szigorúan kövessék a kezelőorvos ajánlásait.
A hepatitis C vírus képes a vérsejtekben szaporodni és lymphoproliferatív betegségeket okozni. A többszörös mutációk miatt a szervezet immunrendszere gyengül, a vírus genotípusai és altípusai megjelennek. Egy adott típus helyes és időben történő meghatározásával az antivirális terápia hatékonysága függ. A fertőzés veszélye, hogy a betegség tünetmentes. A 100-ból csak 15 százaléka hányingert és hányást, fogyást és lázat tapasztalhat.
A hepatitis C vírus kimutatása
A hepatitis C standard sebessége 40 és 60 nm közötti, a legtöbb lipid, a máj akut vagy a krónikus betegségből eredő károsodása. A hepatitis C, nevezetesen a Togaviridae család RNS-vírusa, rendkívül ellenálló, vérátömlesztéssel vagy nem steril termékek használatával, nem megfelelő higiéniai ellátással stb. Kerül átadásra. A mennyiségi elemzés lehetővé teszi a vér vizsgálatát és a fertőzött vírus genetikai szerkezetének azonosítását.
A hepatitis C-hez és genotípusaihoz kvantitatív elemzést végeztünk. Az elemzőtől függően meghatározható az RNS-vírus három előfordulási szintje.
Az altípusok különböző módosításokat hozhatnak létre, így az analizátor sajátosságának és érzékenységének száz százalékosnak kell lennie. A betegség betegségben történő kimutatása mellett meg kell határozni annak súlyosságát. Egyes laboratóriumok nem rendelkeznek az RNS vírus dekódolásával kapcsolatos összes adattal, hamis pozitív válasz lehetősége áll fenn.
A hepatitis C-vel kapcsolatos kutatások pontosabbak lesznek ezeknél a mutatóknál:
Figyelembe véve e mutatók eredményeit és a test általános állapotát, megjelenik a fertőzés mértéke, az alakja és a hepatitis C sejtek száma a vérben. Ez hozzájárul a gyógyulási folyamathoz és a vírusellenes kezelés hatékonyságához.
A hepatitis C elemzésének típusai
A többdimenziós láncreakció (PCR) megmagyarázza a DNS-részecskék számát a betegek elemzésében, ugyanakkor helyesen azonosítja a fertőző ágenst.
Előfordulhatnak fertőző betegségek okozati okai. A máj fertőzése, mint például a hepatitis C, akkor kezelhető, amikor időben észlelik. Ha egy vírus gyanúja áll fenn, PCR-analízist végzünk.
Tekintettel arra, hogy hosszú ideig a vírus tünetei elfedhetők, a személy nem érzi a betegség kezdetét. Az esetek 60-70% -ában végzett alapos vizsgálattal azonban hepatitis C-t észlelünk, az első elemzést, amelyben az ELISA, majd a PCR-diagnózis következik. Az elemzést bizonyos időszakokban végzik el a betegség stádiumának meghatározására és a megfelelő kezelés megírására. Anélkül, hogy ezt elvégeznénk, az összes ilyen eljárás alkalmazása nélkül lehetséges, hogy hepatitis ellen vakcinálják.
Minőségi és mennyiségi elemzés
Minőségi és mennyiségi elemzés van. Az első lényege, hogy meghatározza a fertőzés jelenlétét a vérben. Ez azt jelenti, hogy a vírus megfertőzi az egészséges májsejteket. Ha a C-hepatitisz elleni antitestek egy betegben találhatók, azonnal elvégezzük a minőségi vizsgálatot. Az az arány, amit az eredménynek meg kell adnia, nem „kimutatható a vérben”. A vírus koncentrációjának meghatározásakor szükség van a diagnosztikai rendszer érzékenységének ismeretére, mivel az antivirális terápiában részesülő emberek elvégezhetik az elemzést. Az analizátor érzékenysége nem lehet kevesebb 50 IU / ml-nél.
Ha vírust észlelünk, kvantitatív elemzést végzünk, azaz a vírusterhelést, amely meghatározza a vírus koncentrációját a vérben és a betegség súlyosságát.
A vírusos RNS, amely egy bizonyos mennyiségű vérben van, 1 ml / 1 centiméterre vonatkoztatva. A vírusterhelés számszerűsítése után meg lehet határozni a még fertőzött környezet fertőzésének mértékét. Amint a C-hepatitis koncentrációja emelkedik a vérben, szükséges a környezetből izolálni.
A korai stádiumban fontos a hepatitis koncentrációjának meghatározása a rehabilitáció ütemének meghatározása érdekében. Ha a hepatitisz C aránya meghaladja a 800 ezer NE / ml-t, akkor ez túl magasnak tekinthető, akár egy millió - növekedés is kritikus. Ha a kvantitatív tartomány kisebb, mint 400 ezer NE / ml, úgy véljük, hogy a körülöttük lévő fertőzés kevésbé valószínű. Ez az ábra világossá teszi, hogy a hepatitis C nagyon kis adagokban van jelen a szervezetben. Az elemzés nem tudta meghatározni a vírus RNS-részecskéinek mennyiségi értékét, így többször is kijelölték a diagnózis pontossága érdekében.
Kvantitatív elemzés eredményei
A vírusterhelés mennyiségének meghatározása a beteg vérében a fertőzés mértékének meghatározása mások számára.
A PCR-elemzés eredményei:
- A pozitív válasz a biológiai anyag fertőzését jelenti. Az elemzés lehetővé teszi a fertőzött sejtek pontos számának meghatározását.
- A negatív válasz azt jelzi, hogy a fertőzés hiányzik, amit a szervezetben alaposan megvizsgálnak.
A C-hepatitis mennyiségi meghatározásának módszere pontos és informatív, nagy érzékenységű berendezéseken. Az elemzés eredményeinek megfejtése lehetővé teszi, hogy megtudja, hogy a fertőzés és annak specifitása a legkevésbé fertőzött sejteket látja-e az érzékeny analizátorokon.
Az elemzés során ritkán adnak meg hamis pozitív vagy ellentétes eredményeket, gyakrabban ez az immunvizsgálati vizsgálatokban történik.
A hepatitis C vírus egy RNS molekulát tartalmazó vírus. Képes megakadályozni a szervezet immunválaszát, mert nagy a mutációs képessége. A vírus hat fő genotípusa és sok altípusa létezik. Régiónkban 1, 2 és 3 genotípust főként elosztunk.
75–80% -ban a betegség krónikussá válik, ami májfibrózist okoz, amely állapotban a májszövetet kötőszövet helyettesíti. A fibrózis viszont rákhoz vagy cirrhosishoz vezet. A betegség átvitelének fő módja a vér. Ha egy személynek van indikációja a hepatitis C vizsgálatára, két alapvető tesztet kap. Meghatározták a vírussal szembeni antitesteket, és azok hiányában úgy vélik, hogy nem rendelkezik hepatitissel. Ha a hepatitis vírussal szembeni antitestek jelenlétét észlelik a vérben, PCR analízist végzünk.
Ezzel a módszerrel az RNS a fertőzés után 10–12 napon belül meghatározható a vérben, és azt jelzi, hogy a vírus aktívan replikálódik a szervezetben. Ebben az időszakban egyszerűen nem lehet más módon kimutatni a vírust, mivel még mindig nem termel specifikus antitesteket, és a biokémiai vizsgálatok és biopsziák nem mutatnak károsodást.
A PCR-vizsgálatok fajtái
A polimeráz láncreakció analízisnek bizonyos előnyei vannak:
- Ebben a vizsgálatban a vírust maga határozza meg, és nem az anyagcsere termékeit. Ebben az esetben lehetséges a kórokozó típusának meghatározása.
- A technikának nagy a sajátossága, mivel csak egy bizonyos DNS-szakaszt vizsgálnak, a hibás eredmények megszerzésének valószínűsége csökken.
- Nagyon magas érzékenységű, még a minimális mennyiségű vírust is meghatározzuk a vérben.
A hepatitisz C vérvizsgálatának két fő módszere van a PCR segítségével: a PCR kvalitatív és kvantitatív elemzése. A kvalitatív módszert arra használjuk, hogy meghatározzuk, hogy van-e vírus. Bárki, akinek a hepatitisz elleni antitestjeit kimutatták a vérben, ilyen elemzést végeznek. Az eredmény csak két típus lehet: "észlelt" és "nem észlelt", az utóbbi érték normának tekinthető.
A pozitív teszt eredménye azt jelenti, hogy a vírus RNS fragmenseit találtuk a mintában, ami viszont azt jelzi, hogy a személy hepatitiszben fertőzött. Negatív eredmény esetén két lehetőség közül választhat: nem volt fertőzés, vagy annak koncentrációja olyan alacsony, hogy ezt a technikát nem érzékeli.
A kvantitatív módszer a kutatás tartalmában, feladataiban és a jelzésekben különbözik. Nem minden hepatitisben szenvedő betegnél ilyen analízis folyik. Mint minden más, bizonyos céljai vannak. Vírus RNS-re vonatkozó PCR vírusterhelésének vagy mennyiségi analízisének meghatározása:
- a vírus RNS meghatározására a vérben és a "vírus hepatitis" diagnózisában;
- megjósolni a hepatitis és a betegség lefolyásának krónikusságát;
- a vírusellenes kezelés figyelemmel kísérése és a kezelés taktikájának kiterjesztése, csökkentése vagy megváltoztatása.
A vizsgálatot ilyen jelzések jelenlétében végzik:
- A hepatitisz C egy kvalitatív vizsgálatban kimutatható, és a vérben antitesteket detektáltak;
- vegyes hepatitis;
- ha vírusellenes terápiát terveznek;
- a hepatitis C kezelés alatt és után;
- krónikus és akut hepatitis C jelenlétében.
A vizsgálatot úgy végezzük, hogy megbecsüljük a vírusegységek számát 1 cm3 vagy 1 ml vérmintában. Az eredményeket számokban adjuk meg. Az alkalmazott indikátorok: IU / ml, ami milliliterenként nemzetközi egységet jelent, és az RNS másolatainak száma 1 ml-ben. Minél magasabb az elemzés mennyiségi mutatója, annál nagyobb a valószínűsége annak, hogy a vírus átadja egy másik személynek.
Az R-DNS elágazó DNS-módszer. Egyszerűbb és olcsóbb módszer. Több minta esetében alacsony érzékenységű, 500 IU / ml. Ilyen érzékenység esetén lehetőség van arra, hogy ne azonosítsuk a vírust, még akkor sem, ha a vérben van jelen.
A TMA egy transzkripciós amplifikációs módszer. Ez a technika a nukleinsavakat a vérben érzékeli. Alacsony költségű és nagy érzékenységű, 5-10 IU / ml. Egy viszonylag új technika, amely lehetővé teszi, hogy felgyorsítsa és csökkentse a tesztelési költségeket.
A laboratórium által bemutatott RNS-vírus meghatározásának mennyiségi elemzésének eredményeit a következőképpen kell értelmezni: