A modern technológiák bevezetésével az orvostudományban növekszik az immunokémiai diagnosztikai módszerek lehetőségei, amelyek képesek gyorsan és pontosan felismerni a betegséget, amikor más módszerek is erőtlenek. Az a megértés, hogy a hepatitis B vírus nagyon alacsony koncentrációban képes a szervezetben lenni, amelyen még a PCR-rel ilyen megbízható módszerrel sem lehet kimutatni, szükségessé teszi a betegség diagnosztizálásának problémájának újbóli megvizsgálását és az immunvizsgálati lehetőségek megértését.
Ebben az anyagban részletesen elemezzük, hogy mi kapcsolódik az ilyen típusú laboratóriumi kutatásokhoz. Meg fogod tanulni, hogy mi az enzim immunoassay és hogyan történik, milyen az ausztrál antigén és hogyan határozzák meg, milyen érthetetlen rövidítések Hbs ag, Hbcor, átlagban és szerepük az elemzés megfejtésében, valamint hasznosabb és érdekesebb információ megszerzése.
A cikk tartalma:
Általános információk az ELISA-ról
Az ELISA (rövidített ELISA) egy olyan laboratóriumi diagnosztikai módszer, amely képes kimutatni az antigéneket és az antitesteket számos fertőzésből, beleértve a B hepatitist is. A vírus tulajdonságainak ismerete és a szervezet immunválaszának jellemzői lehetővé teszik, hogy ne csak a fertőzést kimutassák, hanem azonosítsák azt is a vakcinázás hatékonysága és a kezelés hatékonyságának értékelése.
Az enzim immunoassay lényege
Az ELISA alapja az „antigén-antitest” reakció, vagy inkább a tulajdonságai.
Egy idegen anyag (antigén), amely különösen a vírus fehérje, inváziója miatt a szervezet védőfehérjéket - antitesteket termel. Az antitestek komplex reakcióba lépnek az antigénnel, blokkolva annak aktivitását.
Az antigénekről és antitestekről az alábbiakban többet fogunk beszélni, de most megjegyezzük, hogy minden antigén esetében szigorúan egyéni, vagy orvosok szerint homológ antitestek. Tehát, ha egy specifikus antigént szeretnénk kimutatni a vérben, diagnosztikai tablettát fogunk használni ellenanyagokkal. Ha antigén van a vérben, akkor az antitestekkel reagál, amely különböző módon kimutatható. És fordítva. Ha bármilyen ellenanyagot akarunk találni, akkor egy megfelelő antigénnel rendelkező tablettára van szükségünk.
Leggyakrabban a medve diagnosztikai értéke csak az antitestek, amellyel szinte bármilyen fertőzést diagnosztizálhat. A hepatitis B vírus sajátossága azonban az, hogy a diagnózis fő szerepét az egyik antigén - az ausztrál antigén - játszik.
Hogyan működik az IFA
Figyeljen egy tipikus ELISA-eljárást egy konkrét példa esetében, ha a kórokozó elleni antitesteket kívánja azonosítani.
Diagnosztikához 96 lyukú tablettát alkalmazunk, amely a megfelelő antigénnel telített. Továbbá az eljárás a következő:
szérumot alkalmazunk minden sejtre;
a homológ antitestek reagálnak az antigénnel és kapcsolódnak a lemezhez;
a mosott tabletták eltávolítása, a nem szedett antitestek eltávolítása;
majd egy enzimatikus címkét vezetünk be a sejtekbe - olyan anyagot, amely az antitestekkel reagál és a sejt tartalmának festését okozza.
Ez a szokásos ELISA eljárás festéssel, amelyet például immunokromatográfiás tesztcsíkokban használnak.
Az ELISA nem korlátozódik a patogén antitestek vagy antigének kvalitatív meghatározására. Minél több antitest található a tabletta sejtjeiben, annál intenzívebb a festett oldat. Összehasonlítva az optikai sűrűségét a vezérléssel, a modern berendezések elég pontosan kiszámíthatják az antitest koncentrációját térfogategységenként. Így kvantitatív ELISA-t végzünk, amelynek mértéke a leggyakrabban az optikai sűrűség egysége (EOP).
Immunemolekulumineszcens analízis
Napjainkban több tucat típusú ELISA létezik, amelyek mindegyike előnyös hatókörrel rendelkezik. A hepatitis B diagnózisában a legnépszerűbb az immunokemilumineszcens analízis.
Ennek az elemzésnek az enzimatikus jelölése nem kromatin, mint a standard ELISA-ban, hanem speciális anyagok - foszforok, amelyek a komplexet ultraibolya fényben ragyogják.
Egy speciális eszköz - luminométer segítségével - pontosan meghatározhatja a kibocsátási szintet és ennek következtében a kívánt anyag koncentrációját.
Az ELISA módszerekkel szinte minden hepatitis B vírus antigénjét és az ellenanyagokat meghatározzuk.
Hepatitis B vírus antigének: Hbs, Hbe és Hbc
Az antigén (antigén) kifejezés két angol szóból származik: antitest - antitest és generátor - gyártó. Tehát az antigén alatt meg kell érteni minden olyan anyagot, amely az antitestek képződését okozza a szervezetben. A leggyakoribb antigének a fehérjék.
Ma a hepatitis B vírus három antigénje ismert: hbsag, hbc és hbe.
Ausztrál antigén
A patogén hepatitis B külső burkolatának részét képező fehérjét régóta a vírus felfedezése előtt detektáltuk. Ez az antigén nevét kapta, mert először Ausztrália őslakosaiból azonosították. Először azonban a fehérjét nem antigénnek tekintették, hanem a bennszülöttek között a vér általánosan elterjedt elemét, és a májbetegségekkel való kapcsolatának tudatossága egy kicsit később következett be.
A vérben lévő antigén hosszú távú megőrzése és az antitestek hiánya a HBeAg-pozitív krónikus hepatitis B kialakulásának lehetőségét jelzi.
Ma a szakirodalomban az „ausztrál antigén” nevet gyakorlatilag nem találták meg, és a nemzetközi rövidítés - a HbsAg (hepatitis b felületi antigén - hepatitis B felületi antigén) - helyettesítette. Ezenkívül megtalálható a hbs antigén rövidítése vagy csak a hbs. Ezen rövidítések bármelyike elfogadható, és kiegészíthető HBV vagy HBV - hepatitis B vírus (hepatitis b vírus) felvételével.
A hepatitis B vírus felszíni antigénje egy figyelemre méltó tulajdonsággal rendelkezik, amely elengedhetetlen diagnosztikai markerként szolgál - a vérben lévő koncentrációja elérheti a nagyon magas szintet, akár fél milligramm / ml vér. Ez azért van, mert az új HBsAg csak egy kis része, amely a hepatitis B vírus szaporodása során keletkezik, az új vírusrészecskék membránjainak építéséhez, a többi pedig szabadon kering a vérben. Ennek eredményeként a vérben lévő hbs részecskék száma meghaladhatja a több százezer alkalommal a virionok számát.
Ez a tulajdonság teszi az ausztrál antigént a hepatitis B szkrínelési diagnózisának fő markerévé, amely a fertőzés után 4-6 héttel a vérben található. Antitestek formájában a felületi antigént fokozatosan helyettesítik. Ha 6 hónap elteltével a HBsAg továbbra is fennáll, akkor ez jelzi a fertőzés átmenetét a krónikus formára.
A közelmúltban, amikor a hbv hbs koncentrációját meg lehetett határozni, a diagnózisban betöltött szerepe még tovább nőtt, mivel az antigén szintjére támaszkodva megkülönböztethető a krónikus hepatitis B (HBV) az egészséges hordozóállapottól, valamint figyelemmel kíséri a kezelés hatékonyságát.
Core antigének
A vírus magjában - a nukleokapszid - olyan fehérjék, amelyek szabályozzák a HBcoreAg és a HBeAg vírus szaporodását.
A HBcoreAg, amely szintén HBCore-antigénnek, hbc-nek vagy magantigéneknek nevezhető, csak a máj szövetében található, közvetlenül a hepatociták magjában. Ezt az antigént nem észlelik a vérben, és nincs diagnosztikai értéke.
A hepatitis vírus szerkezete
HBeAg (HBe, HBprecoreAg) - éppen ellenkezőleg, fontos szerepet játszik a diagnózisban. A HBeAg és a HBcoreAg közeli hozzátartozók. Ezek nagyban hasonlítanak a szerkezethez, és elsősorban a molekulák térbeli helyzetében különböznek. A HBcore-tól eltérően a HBe nem része a nukleokapszid falnak, és szabadon kering a vérben.
A HBE szerepe a fertőző folyamatban nem eléggé világos, azonban a viselkedésének sajátosságai és a fertőző folyamat lefolyásával való kapcsolatuk már eléggé tanulmányozott. A HBeAg a vírus aktív szaporodását jelzi, és lehetővé teszi a krónikus CHB-HBeAg-pozitív vagy HBeAg-negatív fázis megbízható meghatározását.
A HBE kimutatható a vérben már az akut hepatitis B vírus (HBV) inkubációs periódusában, míg a HBeAg magas koncentrációja 3 hétig valószínűleg krónikus folyamat veszélyét jelzi. A HBe koncentrációja közvetlenül kapcsolódik a Dane részecskék (úgynevezett hepatitis B vírus részecskék) tartalmához - minél nagyobb a HBe mennyisége, annál nagyobb a HBV DNS koncentrációja a vérben.
A HBeAg a betegség fertőzőképességének fő markere. A HBeAg-pozitív betegek vérsejtje sokkal fertőzőbb, mint a HBeAg-negatív. Például a HBe-hez és a Hbs-hez pozitív terhes nők esetében a fertőzés gyermekre történő átvitelének valószínűsége eléri az 50% -ot, míg az ilyen esemény valószínűsége HBe-negatív, de a pozitív anyák HBS-je 10-30%.
A Hbe meghatározza a krónikus hepatitis lefolyását. A HBeAg-pozitív krónikus hepatitis B-nek sokkal kedvezőtlenebb prognózisa van a cirrhosis kialakulásának szempontjából.
Valószínűleg mindent tudnod kell a HBV antigénekről, és továbbmegyünk a hepatitis B markerek második csoportjába - antitestek.
A hepatitis B esszenciája és diagnózisa
Amint a színpad sárgaságsá válik, az egész és sárga nyálkahártya elkezd sárga színűvé válni, az egészségi állapot jelentősen romlik. Fontos hangsúlyozni, hogy a máj mérete növekszik és a parti ív alól kiemelkedik. A bőr sárga színben történő festése fokozatosan történik. A máj enzimek mennyisége nő a vérben, és a timol minta nem változik.
A betegség diagnosztizálása: alapvető módszerek és fogalmak
A hepatitis B diagnózisát többféle módon végzik:
1. Először is, az orvosnak anamnézist kell vennie és alapos felmérést kell végeznie a személyről. A felmérés során nagy hangsúlyt fektetnek azokra a pillanatokra, mint:
- a drogok vagy más intravénás eszközök bevezetése;
- hogy van-e vérátömlesztés;
- a sebészeti beavatkozások elvégzése;
- a bőr integritásának károsodása volt-e jelen;
- mik a szexuális kapcsolatok;
- hogy a beteg érintkezett-e a hepatitis B-vel vagy annak hordozójával.
Ha ezek közül bármelyik bekövetkezett, akkor azt meg kell adni, hogy mennyi ideig. A fertőzés jellemzően 6 héttől hat hónappal a hepatitis első tüneteinek előfordulása előtt lép fel.
2. A hepatitis B laboratóriumi diagnózisa, az antigének és a hepatitis B elleni antitestek ELISA-elemzése. Ez a vizsgálat célja három antigén azonosítása:
- HBsAg (felületi felületű antigén),
- HBcAg (belül található)
- HBeAg (az előző antigénnel összekapcsolva). A betegséget az antigének korai felismerése jellemzi a vérben.
A hepatitis B-ben szenvedő és ezekben az antigénekben a vérben szenvedők nagyon fertőzőek. Képesek megfertőzni más embereket. Ha a HBsAg hiányzik egy személy vérében, ez azt jelzi, hogy egészséges. Ha valaki beteg, akkor a test elkezdi antitestek kiválasztását a meglévő antigének ellen.
3. A hepatitis B diagnosztizálása a keringési rendszerben a HBV DNS kimutatására tervezett PCR-módszer alkalmazásával. Ha az eredmény pozitív, akkor a személynek hepatitisz van. A HBV DNS analízisét kvalitatívnak nevezzük. Kvantitatív PCR is van. A mennyiségi PCR lehetőséget nyújt a terhelés azonosítására a hepatitis vírus jelenlétével. Mi a vírusterhelés? Ez a HBV DNS másolatai száma 1 ml vérben. A hepatitis kvantitatív elemzése mutatja a vírus aktivitását.
4. A biokémiai vérvizsgálat. Ez az elemzés magában foglalja a máj által termelt enzimek számának meghatározását. Az ilyen enzimek közé tartozik az ALT, az AST. A májsejtek - hepatociták - belsejében helyezkednek el. Ha a májsejtek megsérülnek, az enzimek felszabadulnak és belépnek a vérbe. Pozitív elemzés csak akkor tekinthető meg, ha a máj enzimek száma meghaladja a normát. A felmérés azt jelzi, hogy van-e gyulladásos folyamat a májban és azok aktivitásában.
5. Ultrahangvizsgálat, elasztometria stb. A hepatitis diagnózisa elvégezhető és nem laboratóriumi módszerek. Az ultrahang vizsgálja a hasi szerveket. Az ultrahang egyértelmű képet ad a máj és az edényei gyulladásos folyamatáról. A máj elasztometriájának hatékony vezetése. Az elasztometriás módszer a májszövet fibrózisának mértékét mutatja.
6. A legfontosabb elemzés a hepatitis B antigének jelenléte a vörösvérsejtekben, ha léteznek, ez azt jelzi, hogy az emberi szervezetben a fertőzés jelen van.
7. A hepatitis laboratóriumi diagnosztikája magában foglalja az antigének és antitestek meghatározását az eritrocita tömegben. A leggyakoribb HBsAg a keringési rendszerben a hepatitis inkubációs periódusában is jelentkezik. Egy személy nem tudja a betegség kialakulásáról, és a vérváltozás már folyamatban van. Ha a hepatitis akut, a HBsAg eltűnik a vérből. Általában a HBsAg nincs jelen a jeges időszak első hónapjában, és az antigén elleni antitestek a keringési rendszerben a fertőzés után 90 nappal kezdődnek.
A pozitív antitestvizsgálat nem jelenti azt, hogy egy személynek hepatitisz van. Lehetséges, hogy korábban hepatitist szenvedett D-szer nélkül. Ha a kezelés után a beteg vérében nincs HBsAg, de vannak antitestek, ez jó prognózist jelez, ami azt jelzi, hogy a beteg visszatér. Ha a betegnek krónikus vagy súlyos hepatitise van, akkor az antitestek már a jeges időszak első napjaiból is megjelennek.
A megbízható ekvivalens a vérben lévő anti-HBc IgM. Ezeket az elődöntő időszak végén mutatják be. Jelen vannak a nyilvánvaló megnyilvánulások teljes időszakában. Ha az elemzés anti-HBc IgM-et tartalmaz, azt jelenti, hogy a vírus továbbra is szaporodik. A visszanyerés kezdetén az anti-HBc IgM eltűnik. A betegség akut fázisa anti-HBc IgG vizsgálatot eredményezhet. Ezeket egy személy életében érzékelik.
Amikor a hepatitis (különösen az autoimmun) inkubálásának időtartama befejeződött, a HBeAg elkezd megjelenni a vérben. Tájékoztatják a fertőző részecskék aktív felosztását és növekedését. Amint elkezdődik a jeges időszak, az NVAAg eltűnik. Az anti-HBe helyettesíti. Az anti-HBe azt jelzi, hogy csökken a fertőzés aktivitása és hamarosan helyreáll. De a vírus szaporodása nem áll meg!
Az akut hepatitis krónikus lehet. Erről fog beszélni azonosított a vérben HВеАg. Ha jelen van, ez azt jelenti, hogy a folyamat krónikus formává való átalakításának valószínűsége magas. A HeVag jelenléte nagyon fertőző betegre utal.
Emlékeztetni kell arra, hogy a hepatitis B laboratóriumi diagnózisa, amely negatív eredményt ad a HBsAg esetében, nem zárja ki magát a diagnózist. Fontos döntő elem az anti-HBc IgM jelenléte a vérben. Ezek az ellenanyagok pontosan megerősítik a betegséget. Ha a vérvizsgálat nem tartalmaz anti-HBc IgM-et, akkor ez jelezheti a HBV jelenlétét, és ezeknek az antitesteknek a jelenléte a fertőzés fokozódását jelzi.
Hepatitis B DNS kimutatása
A vírus DNS jelenlétének meghatározására a legfontosabb vizsgálat a PCR. Az elemzés a fertőző folyamat aktivitását jelzi. Ezzel a módszerrel megismerheti a betegség prognózisát.
Ha a hepatitis kedvezőbb, akkor a HBV DNS eltűnik a vérből a fertőzés kezdeti időszakában. A PCR formájában végzett laboratóriumi diagnózis adatokat szolgáltat a kezelés minőségéről (nem egy adott gyógyszer hatása).
Ahhoz, hogy megértsük, milyen taktikát kell alkalmazni a terápiás intézkedések kijelöléséhez, a PCR mennyiségi módszerét kell elvégezni. A kvantitatív PCR bizonyítja a terápia pozitív reakcióját.
A diagnózis alapja
A megfelelő diagnózis elvégzéséhez a következő vizsgálatok szükségesek:
- Napi ellenőrzés, tapintás.
- A máj ultrahanga.
- A vér biokémiai elemzése (ismételten).
- HBsAg, HBeAg, anti-HBe, anti-HBc IgM, anti-HBc teljes, HBV DNS vizsgálata.
- A HBV és a HCV markerei (a vírus hepatitis kizárt).
- Májszúrás.
- Májbiopszia. Egy speciális tű segítségével a hasfal megtört, és egy kis darab a májból eltávolítható a szövettani vizsgálathoz (a darab mérete legfeljebb egy fél gramm). A biopszia a hepatitis legújabb vizsgálati módszere. Hála neki, legpontosabban beszélhetünk a fertőző folyamat, a májfibrózis mértékéről. A biopszia sebészeti eljárás. Komplikációkhoz vezethet, ezért gyakran nem használják fel a diagnózist.
- Fibroelastografiya. Használható a májszövet sűrűségének becslésére. A technika hasonló az ultrahanghoz. A tanulmány egy speciális szenzort használ, amely a bőrön a máj vetülete helyén van beépítve.
- FibroTest. Ez bizonyos vérszámlálás számításán alapul.
Krónikus hepatitis B
Krónikus hepatitisz B előrehaladás fázis:
1. fázis - A vírus replikációja. A vírus megnövekedett aktivitással szaporodik.
2. fázis - integráció. A vírus leállítja a szaporodást. A vírusgenom a normális májsejtek, a hepatociták DNS-jébe integrálódik.
A vírus előrehaladásának sebességének meghatározásához fontos megérteni a folyamat súlyosságát, a kimenetelét, a májsejtek megszakításának mértékét. A krónikus hepatitis laboratóriumi diagnózisa a következők kimutatásán alapul:
Ha a hepatitis HBeAg-pozitív (pozitív analízis), akkor az eritrocita tömeg:
- a tenyésztési szakaszban - HBsAg, HBeAg, anti-HBc IgM, anti-HBc (teljes), HBV DNS;
- a hepatociták behelyezésének szakaszában DNS-be - HBsAg, anti-HBe, anti-HBc (teljes), HBV DNS.
Ha hepatitisz szeronegatív, akkor HBsAg, anti-HBe, anti-HBc IgM, anti-HBc, HBV DNS lesz jelen a vér tömegében. Továbbá jelenlétük semmiképpen sem függ a fertőző folyamat szakaszától.
Differenciáldiagnosztika
A diagnózis elkészítésekor az orvos köteles differenciálni a hepatitis B-t más betegségekkel szemben - A, C, E, D hepatitis.
A hepatitist más fontos betegségekkel kell megkülönböztetni: akut légúti vírusfertőzések, epekő, ételmérgezés, bélfertőzés, hasi szervek sebészeti kórképe és sok más betegség.
Autoimmun hepatitis
Az autoimmun hepatitis esetében a diagnózis a következő legfontosabb vizsgálatokat tartalmazza:
- Vörös vérsejtek (OAK) elemzése. Magyarázat: Az autoimmun hepatitisben, a leukociták, a vérlemezkék és a megnövekedett ROE-ben megfigyelt anaemia (normocytic) a vérben figyelhető meg. De magasabb fokú anémia várható.
- Vizelet. A vizeletvizsgálat megfejtése: fehérjét, vörösvértesteket, bilirubint tartalmaz.
- A biokémiai vérvizsgálat. Nagyon releváns elemzés. Értelmezés: megnövekedett mennyiségű bilirubin, megnövekedett argináz, albumin csökkenés, γ-globulinok növekedése és timol teszt. A szublimációs teszt csökken. Bizonyos mutatók 2 vagy több alkalommal növelhetők. Ez pozitív teszt az autoimmun hepatitisre.
- Immunológiai elemzés. Dekódolás: a T-limfocita szuppresszorok csökkenése, a vörösvérsejtek megjelenése a vörösvértestek tömegében, az immunglobulinok száma, az eritrociták elleni antitestek száma.
A hepatitis pozitív vizsgálata szerológiai módszerrel kimutatható. Az autoimmun hepatitis heterogén betegség.
ELISA vírusos hepatitisz esetén
2017. március 9., 16:25 Szakértői cikkek: Nova Vladislavovna Izvochkova 0 3,608
A vírusos hepatitis a szervezetben történő kimutatására az orvostudomány széles körben használ egy enzim immunoassay-t, amely az antitestek és enzimek felhasználásával történő antigének koncentrációjának és típusának kimutatásán alapul. Ezt fokozatosan, laboratóriumi kutatással, nagy pontossággal végzik. Az antitestek mennyiségétől és osztályától függően az ELISA-t alkalmazó enzim színe és koncentrációja, és ennek következtében az orvos diagnosztizálja a betegséget, változásokat okoz.
Mi az ELISA?
A vírus hepatitisz jelenlétét a beteg testében szerológiai vérvizsgálati módszerrel határozzuk meg a HCV vírus és a markerek (testek és antitestek) jelzésére. Az enzimhez kötött immunoszorbens vizsgálat (ELISA) különböző vírusokat, kis molekulatömegű vegyületeket, makromolekulákat, azok kvalitatív és kvantitatív indikátorait vizsgálja, a reakció antigénjeikre való megnyilvánulásával. Ehhez használja az enzimet a jel regisztrálásához. Gyakran alkalmazzák az orvostudományban, mivel az ELISA egyértelműen jól meghatározott antigéneket talál, anélkül, hogy megzavarná őket másokkal, nagy érzékenységgel rendelkezik a vírus hepatitisbe való invázió jelenlétére.
Az ilyen diagnózis hátránya, hogy nem képes azonosítani a betegség okát, mivel a módszer csak a szervezet immunrendszerének reakcióját jelzi. Az elemzés eredményeit befolyásolja a korábban végzett vakcinázás. 8 órával az elemzés előtt ajánlott tartózkodni az étkezéstől, nikotintól, alkoholtól. Az ELISA-vizsgálat alapja a szervezet enzimatikus és immunválaszai a vírusra. A biológiai molekulák kötődnek a sejthez és annak elemeihez, mikroorganizmusokhoz, kimutatják a vírust, majd olyan enzimeket dolgoznak ki, amelyek lehetővé teszik, hogy az immunválaszt egy látható és mérhető paraméterben fejezzék ki.
Az elemzésre vonatkozó jelzések
A szervezetben lévő vírusos hepatitisz rákot és májcirrózist okozhat. Az időszerű diagnózis fontossága vitathatatlan. A diagnózis elsődleges módszere az ELISA teszt, amely nagy pontossággal meghatározza a HCV vírus (IgM és IgG) jelenlétét és nyomelemek aktivitását. Kötelező tesztek a vírusos hepatitis áthaladásához:
- Kockázati csoportokkal rendelkező személyek (drogfüggők, AIDS-es emberek, orvosi és bűnüldöző intézmények alkalmazottai).
- Akut vagy krónikus hepatitisben szenvedők.
- Terhes és terhes nők.
Az ELISA felismeri a betegséget bármely szakaszban. Az elemzés eredményei átlagosan 2 napon belül elkészülnek.
Az elemzés fontosságát meghatározó kritériumok
Az ELISA teszt meghatározza az IgG, IgM, IgA osztályú antitestek jelenlétét. A vírus hepatitis diagnosztizálásakor az orvos nem figyeli a típusukat, mivel a HCV-vírus ilyen megnyilvánulásának jelenléte már jelzi a betegség akut vagy krónikus stádiumát. A betegség korai szakaszában az IgM szintje emelkedik (a fertőzés után 5 nappal); a 15. - 20. napon IgG antitestek jelennek meg, és az emberi vérben a gyógyulás után is sokáig maradhatnak; IgA - 10-14 nap után jelenik meg, a kezelés után csökken.
Ha az IgG-t és az IgA-t a gyógyszerek alkalmazása után észlelik, és azok szintje ugyanazon a sebességen marad - a hordozó krónikus hepatitiszformája van. A vizsgálat fontos kritériuma a rendelkezésre álló antitestek osztályának és mennyiségének egyértelmű meghatározása. Mindezek alapján nemcsak a betegség jelenlétéről, hanem a fejlődés szakaszáról is tudhatunk. Az ilyen elemek felismerése a beteg vérében lehetővé teszi a megfelelő és időben történő kezelés előírását a súlyosabb következmények megelőzése érdekében.
Hogy történik?
Közvetlen és nem közvetlen ELISA-vizsgálatot kell rendelni. Közvetlen szakaszok:
- A biológiai anyagok gyűjtése és speciális lyukakba helyezése.
- 15-30 percen belül az antigének a kutak felületéhez vannak kötve.
- Antitestek hozzáadása a kutakhoz a talált antigénhez. Minden 1-5 órán át maradt.
- Távolítsa el a nem csatlakoztatott antigéneket (a lyukak tartalmát).
- Öblítse ki a lyukakat egy speciális megoldással.
- Adjunk hozzá enzimoldatot a lyukakhoz. Hagyjuk 30 percig - 1 óra.
- A kolorimetria alkalmazása (a szín kimutatása és a kút tartalmának színe koncentrációja, összehasonlítva a vírus koncentrációjával közvetlenül arányos mutatókkal).
A közvetett ELISA módszer a jelzett antitestek alkalmazásával történik a talált antigének és a későbbi jelzett vegyületek hozzáadásával. Először is, a vért a betegből veszik, és 15-30 percig terjednek át a kutakon. (az antitestek lyukakkal vannak rögzítve). Ezután a jelöletlen antitesteket 1–5 órán át bejuttatjuk (az antitestek antigénekkel való összekapcsolódása - az immunrendszer komplexe). Ezután a nem csatolt mikroelemeket öntjük a kutakból, és speciális oldattal mossuk. A következő szakaszban a laboratóriumi technikus 15-30 percig a kútba jelölt nyomelemeket ad. (ez a jelzést nem jelöli a "antitest-antitest-antigén" komplex képződésével. Az ürítés és a mosás során az extra (laza) újra eltávolításra kerül. Ezután az enzim 5-30 perc alatt megváltoztatja a színt. a lyukakban és a színadatokban tárolt adatok összehasonlítása a táblázatmutatók adataival történik. A közvetett ELISA pontosabb.
Mit mutat az ELISA vírusos hepatitisz?
Az ELISA lehetővé teszi a fertőzés jelenlétének kimutatását (mindenféle hepatitis vírus, HIV, herpesz, szifilisz, citomegalovírus, kanyaró, rubeola, mumpszvírus, Epstein-Barr vírus), az autoimmun betegségek, a rákos sejtek markere. A reproduktív funkciók megsértését jelzi (a tesztoszteron, a prolaktin, az ösztradiol és a progeszteron változásai), a pajzsmirigy meghibásodása, a bélféreg fertőzése, a chlamydia. Hatékony az ureaplasmosis, a kopasz köhögés, a Dange vírus, a Nyugat-Nílus vírus, Borrelia kimutatására. A definíciók listája magas, számos elemet tartalmaz.
Az eredmények megerősítése
A HCV vírus antigén meghatározása ELISA-val 98% -os pontosságú. Azt is használják, hogy a biológiai anyagot fuzzy korábbi mutatókkal újra teszteljék. Az IgM antigének jelenléte nem jelzi az akut hepatitist, és további kutatást igényel. Az ELISA-teszt ismétlése esetén az eredmények 90–100% -kal esnek egybe. Minimális eltérés esetén az átlagértéket indikátornak tekintjük. Az orvosok maximális pontossága érdekében a vér biokémiai elemzését egyidejűleg javasoljuk. Az enzim immunoassay után végzett eredmények teszteléséhez más diagnosztikai módszereket is használhat.
A hepatitis B vírus vizsgálata (ELISA és PCR) t
Hepatitis B vírus "s" antigén (HBsAg)
Hepatitis B felületi antigén a szérumban általában nincs jelen.
A hepatitis B felszíni antigén (HBsAg) kimutatása a szérumban megerősíti a hepatitis B vírus akut vagy krónikus fertőzését.
Akut betegség esetén a HBsAg-t a szérumban az inkubációs időszak utolsó 1-2 hetében és a klinikai időszak első 2-3 hetében észlelik. A HBsAg vérben történő keringtetése néhány napra korlátozható, ezért a betegek korai kezdeti vizsgálatára kell törekednie. Az ELISA módszer lehetővé teszi a HBsAg kimutatását a betegek több mint 90% -ában. A legérzékenyebb kutatási módszerek a betegek 5% -ában nem észlelik a HBsAg-t, ilyen esetekben a vírusos hepatitis B etiológiáját az anti-HBcAg JgM vagy PCR jelenléte igazolja.
A hepatitis B súlyosságának minden formája a hepatitis B súlyosságában a szérum HBsAg koncentrációjának jelentős mértékű ingadozása van, azonban van egy bizonyos minta: az akut időszakban fordított összefüggés van a szérum HBsAg koncentrációja és a betegség súlyossága között.
A HBsAg magas koncentrációja gyakrabban fordul elő a betegség enyhe és mérsékelt formáiban. Súlyos és rosszindulatú formákban a HBsAg koncentrációja a vérben gyakran alacsony, és a súlyos formában szenvedő betegek 20% -ánál és a vérben 30% -nál rosszindulatú antigénben nem észlelhető egyáltalán. A HBsAg elleni antitestekkel rendelkező betegeknél ez a háttér kedvezőtlen diagnosztikai jelnek tekinthető; a hepatitis B rosszindulatú formáiban határozzák meg.
A hepatitis B akut lefolyása során a HBsAg koncentrációja a vérben fokozatosan csökken az antigén teljes eltűnéséig. A HBsAg 3 hónapon belül eltűnik az akut fertőzés kezdetétől számított 3 hónapon belül.
A HBsAg koncentrációjának csökkenése több mint 50% -kal az akut periódus harmadik hetének végére általában a fertőzési folyamat szoros befejezését jelzi. Általában a betegség magas magasságában magas HBsAg-koncentrációjú betegeknél a vérben több hónapig észlelhető.
Az alacsony koncentrációjú HBsAg-ban szenvedő betegeknél sokkal korábban megszűnik (néha néhány nappal a betegség kialakulása után). Általában a HBsAg kimutatás ideje több naptól 4-5 hónapig terjed. A HBsAg kimutatásának maximális időtartama az akut hepatitis B sima lefolyásával nem haladja meg a betegség kezdetétől számított 6 hónapot.
A HBsAg-t általában egészséges emberekben találják meg profilaktikus vagy véletlen vizsgálatokban. Ilyen esetekben a vírus hepatitis B, anti-HBcAg JgM, anti-HBcAg JgG, anti HBeAg más markereit vizsgáljuk, és vizsgáljuk a májfunkciót.
Negatív eredmények esetén a HBsAg ismételt vizsgálata szükséges.
Ha a több mint 3 hónapos ismételt vérvizsgálatok HBsAg-t mutattak ki, ez a beteg vírusos hepatitis B krónikus betegnek minősül.
A HBsAg jelenléte meglehetősen gyakori. A világon több mint 300 millió fuvarozó van, és hazánkban mintegy 10 millió fuvarozó van.
A HBsAg cirkuláció megszüntetése a későbbi szerokonverzióval (anti-HBs kialakulása) mindig jelzi a szervezet gyógyulását.
A HBsAg jelenlétére vonatkozó vérvizsgálatot a következő célokra használják:
- inkubációs időszak;
- akut betegség;
- korai helyreállítás;
- tartós krónikus hepatitis;
- a máj cirrhosisa;
a kockázati csoportokban lévő betegek szűrésére és azonosítására:
A kutatási eredmények értékelése
A vizsgálat eredményei kvalitatívan - pozitívak vagy negatívak. A negatív eredmény azt jelzi, hogy nincs szérum HBsAg. Pozitív eredmény - a HBsAg azonosítása az akut vírusos hepatitis B inkubációját vagy akut periódusát, valamint krónikus vírus hepatitisz B-jét jelzi.
A hepatitis B vírus JgG (anti-HBcAg JgG) nukleáris antigén elleni antitestek
Általában a szérumban nincs szérum anti-HBcAg.
Anti-HBcAg-ban szenvedő betegeknél a JgG a vírus hepatitis B akut periódusában jelenik meg, és az egész életen át fennmarad. Az anti-HBcAg JgG az átadott HBV vezető markerje.
Az anti-HBcAg JgG vérvizsgálatát használják a következők diagnosztizálására:
A kutatási eredmények értékelése
A vizsgálat eredménye kvalitatívan - pozitív vagy negatív. Negatív eredmény azt jelzi, hogy nincs szérum anti-HBcAg JgG. Pozitív eredmény - az anti-HBcAg JgG azonosítása akut fertőzést, gyógyulást vagy korábban átadott B hepatitist jelez.
Hepatitis B vírus "e" antigén (HBeAg)
Általában a HBeAg a szérumban nincs jelen.
A HBeAg megtalálható a legtöbb akut vírus hepatitis B-ben szenvedő beteg szérumában. Általában a vérben eltűnik a HBs antigén előtt. A HBeAg magas szintje a betegség első heteiben vagy annak kimutatása több mint 8 hétig okot ad a krónikus fertőzés gyanújának.
Ezt az antigént gyakran vírusos etiológia krónikus aktív hepatitiszében észlelik. Különösen érdekes a HBeAg meghatározása, hogy a detektálása jellemzi a fertőző folyamat aktív replikációs fázisát. Megállapították, hogy a magas HBeAg koncentrációk megfelelnek a magas DNS-polimeráz aktivitásnak és jellemzik a vírus aktív replikációját.
A HBeAg jelenléte a vérben azt jelzi, hogy nagy a fertőzőképessége, azaz az aktív hepatitis B fertőzés jelenléte a vizsgált testben, és csak HBs antigén jelenlétében mutatható ki a vérben. Krónikus aktív hepatitisben szenvedő betegeknél a vírusellenes szereket csak akkor alkalmazzák, ha a HBeAg-t a vérben észlelik. HBeAg - antigén - a hepatitis B vírus akut fázisának és replikációjának markerje.
A HBe antigén jelenlétére szolgáló vérvizsgálatot használnak a következők diagnosztizálására:
A kutatási eredmények értékelése
A vizsgálat eredménye kvalitatívan - pozitív vagy negatív. A negatív eredmény a szérum HBeAg hiányát jelzi. Pozitív eredmény - a HBeAg kimutatása az akut vírus hepatitis B inkubációját vagy akut periódusát, vagy a vírus folyamatos replikációját és a beteg fertőzőképességét jelzi.
A hepatitis B vírus "e" antigénjével szembeni antitestek (anti-HBeAg)
Az anti-HBeAg szérumban általában nincs jelen. Az anti-HBeAg antitestek megjelenése általában a hepatitis B vírus és a beteg kisebb fertőzésének intenzív eltávolítását jelzi.
Ezek az ellenanyagok az akut periódusban jelennek meg, és a fertőzés után 5 évig fennmaradnak. Krónikus, tartós hepatitisben a HBsAg-val együtt anti-HBeAg található a beteg vérében. Serokonverzió, azaz a HBeAg anti-HBeAg-ra való átállítása krónikus aktív hepatitissal, gyakrabban prognosztikailag kedvező, de ugyanaz a szerokonverzió nem javítja a súlyos cirrhotikus máj transzformáció előrejelzését.
Az anti-HBeAg jelenlétére vonatkozó vérvizsgálatokat a következő esetekben alkalmazzák a vírus hepatitis B diagnózisában:
A kutatási eredmények értékelése
A vizsgálat eredménye kvalitatívan - pozitív vagy negatív. A negatív eredmény azt jelzi, hogy a HBeAg antitestek nincsenek szérumban. Pozitív eredmény a HBeAg elleni antitestek kimutatása, amelyek jelezhetik az akut vírus hepatitis B kezdeti stádiumát, a fertőzés akut periódusát, a gyógyulás korai stádiumát, a gyógyulást, a közelmúltban átvitt vírus hepatitisz B-t vagy tartós B hepatitist.
A krónikus hepatitis B jelenlétének kritériumai:
A hepatitis B vírus PCR-rel történő kimutatása (minőségileg)
A Hepatitis B vírus általában nincs jelen.
A hepatitis B vírus minőségi meghatározása a vérben a PCR módszerrel lehetővé teszi a vírus jelenlétének megerősítését a beteg testében, és ezáltal a betegség etiológiájának megállapítását.
Ez a tanulmány hasznos információkkal szolgál az akut vírus hepatitis B diagnózisára a betegség inkubációs és korai fejlődési stádiumában, amikor a beteg fő szerológiai markerei a vérben hiányoznak. HBeAg hiányában a betegek 50% -ában kimutatható a szérum vírus DNS. A PCR módszer analitikai érzékenysége nem kevesebb, mint 80 vírusrészecske 5 μl-ben, az utolsó DNS-detektálási minta, specifitás - 98%.
Ez a módszer fontos a krónikus HBV lefolyásának diagnosztizálásához és megfigyeléséhez. A cirrózis és más krónikus májbetegségek körülbelül 5-10% -át a hepatitis B vírus krónikus hordozója okozza, ezeknek a betegségeknek a markerei a HBeAg és a hepatitis B vírus DNS jelenléte a vérben.
A PCR módszer lehetővé teszi a hepatitis B vírus DNS-jének meghatározását a vérben mind minőségi, mind mennyiségi szempontból. A meghatározott fragmens mindkét esetben a hepatitis B vírus szerkezeti fehérje génjének egyedi DNS-szekvenciája.
A hepatitis B vírus DNS kimutatása biológiai anyagban a PCR alkalmazásával szükséges:
A hepatitis B DNS vérből való eltűnése a terápia hatékonyságának jele
A hepatitis B vírus PCR-rel történő kimutatása (kvantitatív)
Ez a módszer fontos információt nyújt a betegség kialakulásának intenzitásáról, a kezelés hatékonyságáról és az aktív hatóanyagokkal szembeni rezisztencia kialakulásáról.
A vírus hepatitis PCR-sel történő diagnosztizálásához szérumban vizsgálati rendszereket alkalmaznak, amelyek érzékenysége egy mintában 50-100 példány, ami lehetővé teszi a vírus 5 X 10 ^ 3 -10 ^ 4-es / ml koncentrációban történő kimutatását. A vírusos hepatitis B PCR-je feltétlenül szükséges a vírusreplikáció megítéléséhez.
HBeAg hiányában a betegek 50% -ában kimutatható a szérum vírus DNS. A vérszérum, a limfociták és a hepatobiopszia anyagként szolgálhat a hepatitis B vírus DNS-jének kimutatásához.
- A virémia szintjének értékelése a következő:
- kevesebb mint 2,10 ^ 5 másolat / ml (kevesebb, mint 2,10 ^ 5 NE / ml) - alacsony virémia;
- 2,10 ^ 5 példány / ml (2,10 ^ 5 NE / ml) és 2,10 ^ 6 / ml (8,10 ^ 5 NE / ml) közepes virémia;
- több mint 2,10 ^ 6 másolat / ml - magas virémia.
Az akut vírus hepatitis B kimenete és a HBV DNS koncentrációja között van összefüggés a beteg vérében. Alacsony szintű virémia esetén a fertőzés kronizálódási folyamata közel nulla, átlagban a folyamat 25-30% -a krónizálódik, és magas szintű virémia esetén az akut vírus hepatitis B leggyakrabban krónikussá válik.
A krónikus HBV interferon-alfa kezelésére vonatkozó indikációkat figyelembe kell venni az aktív vírusreplikáció markereinek jelenlétében (a HBV HBV, HBeAg és HBV DNS kimutatása a vérszérumban az elmúlt 6 hónapban).
A kezelés hatékonyságának értékelésének kritériuma a HBEAg és a HBV DNS eltűnése a vérben, amelyet általában a transzamináz szintek normalizálása és a betegség hosszú távú remissziója kísér, a HBV DNS a vérből a kezelés ötödik hónapjában eltűnik a betegek 80% -ánál. A kezelés kezdetétől számított harmadik napon a virémia szintjének 85% -kal vagy annál nagyobb csökkentése gyors és meglehetősen pontos kritérium a terápia hatékonyságának előrejelzésére.
Vírus hepatitis kutatása az ife módszerével
ELISA a vírus hepatitis diagnózisában. Enzim immunoassay képességek
A vírus hepatitis specifikus laboratóriumi diagnózisa az immunokémiai és molekuláris biológiai kutatási módszereken alapul. A legfontosabb immunokémiai módszerek a radioizotóp vagy a radioimmun (RIA) és az immunvizsgálat (ELISA). Az immunokémiai diagnosztikai módszerek egy antigén - egy antitest specifikus kölcsönhatásán alapulnak, és a komplex későbbi azonosításával speciális címkék segítségével. A leggyakoribb enzim immunvizsgálat.
Az első jelentés az enzim immunoassay használatáról. az anyag meghatározásának módszerét 1971-ben egyidejűleg két kutatócsoport - V. Van Weemen, A. Schuurs és E. Engvall, P. Perlmann - tette közzé. Az enzim immunoassay a következő elven alapul: szilárd fázisban, amely főleg a polisztirol tabletta üregeinek felületét használja, a fertőző ágens vagy antitest antigénje (gyakran antitestek keveréke) a kimutatható antigénekhez rögzítve van. Ezt az antigént vagy antitesteket, amelyek a szilárd fázisra vannak rögzítve, immunoszorbensnek nevezzük.
Az immunoszorbens és a teszt szérum egy kimutatható hatóanyag jelenlétében történő inkubálásának eredményeként az antigén-antitest komplexhez kötődnek. A mosási eljárás után, amely során a kötetlen antigéneket és antitesteket eltávolítjuk, inkubálást végzünk a konjugátummal. A HBsAg kimutatására szolgáló konjugátumként anti-HBs-t használnak, a hepatitis C vírus elleni antitestek kimutatására - a humán immunglobulinok elleni antitestek (víruskonjugátum), amelyeket torma peroxidázzal jelöltek. Az inkubálás eredményeként a már meglévő antigén komplexekhez való kötődés következik be - a hozzáadott konjugátum antitestje. A nem kötött konjugátum (mosás) eltávolítása után a szubsztrátot behelyezzük a lyukakba. Peroxidáz konjugátum alkalmazásakor hidrogén-peroxidot használunk szubsztrátként egy indikátorral kombinálva, amelyet leggyakrabban ortofenilén-diamin (OPD) vagy tetrametil-benzidin (TMB) használnak. Az eredményt fotometriásan becsüljük.
Az enzim immunoassay módszer analitikai képességeinek minőségét és megbízhatóságát számos kritérium jellemzi, amelyek magukban foglalják az érzékenységet, a specifitást, a pontosságot és a reprodukálhatóságot.
Az érzékenység az anyag minimális mennyisége, amelyet enzim immunoassay segítségével lehet kimutatni. Ebben az esetben a módszer érzékenységének alsó határa a vizsgált anyag koncentrációja a mintában, amely megfelel a meghatározás legkisebb pozitív eredményének, ami statisztikailag szignifikánsan különbözik a szándékosan negatív minták mutatóitól. Az IFTS érzékenysége számos olyan körülménytől függ, amelyek mind a tesztrendszer tervezéséhez kapcsolódnak (az immunoszorbens affinitása, az extrakciós és pufferrendszerek minősége), mind a regisztrációs módszer felbontása és pontossága.
Specifitás - azon képesség, hogy pontosan meghatározzuk azokat az összetevőket, amelyek meghatározásához az enzim immunvizsgálatot tervezték. Az ELISA specifitását nagymértékben meghatározza az antitestek vagy antigének (azaz immunoszorbensként használt készítmények) keresztreakciója szorosan kapcsolódó vegyületekkel, valamint az inkubációs közeg összetétele (mátrixhatás).
Helyesség - ugyanazon kontrollminta ismételt meghatározása eredményeinek átlagértékének a mért paraméter valós értékével való összevetése. Az ELISA-ban a meghatározás pontossága a vizsgálati rendszer és a kontrollminta minőségétől függ. Jó immunológiai vizsgálati rendszerek esetén a korrekciós mutatók 90-110% tartományban vannak. Az ELISA-ban végzett biomedicinális kutatás sajátossága az, hogy a pontos értéket nem lehet megállapítani, ezért több szakértő laboratórium átlagát tekintik az igazi értéknek. A helyesség statisztikai kritériuma az aritmetikai átlag és a valóságtól való eltérés mértéke, százalékban kifejezve.
Reprodukálhatóság - a vizsgálati rendszer azon képessége, hogy ugyanazt az értéket mutassák ugyanazon minta ismételt vizsgálataival. A reprodukálhatóság függ a véletlenszerű hibáktól (hibáktól) a reakció beállítása során, valamint a vizsgálati rendszerek minőségétől és az eredmények rögzítésének pontosságától. Úgy gondoljuk, hogy ugyanazon vállalat azonos ellenőrzési mintáinak reprodukálhatósága különböző laboratóriumokban nem haladhatja meg a 15% -os variációs együttható értékét.
A vírusos hepatitis markerek meghatározására számos specifikus ELISA-eljárás létezik: a) közvetlen enzim immunoassay; b) közvetett enzim immunoassay; c) versenyképes gátlás; c) „csapda” vagy „elfogási” módszer.
A vírus hepatitis diagnosztizálására szolgáló molekuláris biológiai módszerek közül a polimeráz láncreakció és a hibridizáció gyakoribb. Ezek a módszerek, különösen a PCR, lehetővé teszik a nagyon kis mennyiségű specifikus vírus DNS vagy RNS kimutatását, és így a bíráló replikációját, és bizonyos esetekben a replikációs aktivitást.
Hepatitis C vérvizsgálat
A hepatitis C az egyik leggyakoribb májbetegség, amely a hepatitis C vírussal (HCV) fertőzött, amely a szervezetbe kerül, elsősorban a fertőzött személy vérével érintkezve. Krónikus és akut hepatitisz C-ben találkozunk, az akut hepatitis C-ben szenvedő betegek 70-80% -ában nincsenek a betegség tünetei, csak bizonyos esetekben, a fertőzés után egy bizonyos idő elteltével a betegség megnyilvánulása, amely fáradtság, hasi fájdalom, étvágytalanság, sötétség vizelet, hányás, hányinger, széklet, sárgaság, ízületi fájdalom. A tünetek általában a fertőzés után 6-7 héttel fordulnak elő, de a betegség jeleinek kezdete 2 hét és hat hónap között változik. Ha a fenti tünetek előfordulnak, konzultáljanak egy fertőző betegséggel foglalkozó orvosral, és vérvizsgálatot kell végezniük a hepatitis C-re. A hepatitis időben történő diagnosztizálása a betegség korai stádiumában kimutatható, és jelentősen növeli a gyógyulás esélyeit.
Ha hepatitis C tesztet terveznek
Olyan helyzetek, amikor C-hepatitisz teszt szükséges:
- terhesség és családtervezés során;
- krónikus vagy akut hepatitis tüneteit mutató betegek;
- a személy veszélyben van. Ezek az egészségügyi dolgozók, a börtönben lévő személyek, a bűnüldöző szervek tisztviselői, a kábítószer-használók, sok szexuális partnerük, AIDS-jük, hemodialízisük és mások.
A hepatitis C analízis előkészítése
A hepatitis C elemzéséhez nem szükséges speciális előkészítés. Az elemzéshez vért veszünk egy vénából üres gyomorban, ugyanakkor legalább az utolsó étkezés után legalább nyolc óra kell eltelnie.
Hepatitis C ELISA tesztek
Az első elemzés, amelyet általában a hepatitis C - ELISA vizsgálat diagnosztizálására írnak elő (enzimhez kötött immunoszorbens vizsgálat). A Hepatitis C ELISA vizsgálata lehetővé teszi a hepatitis C vírus (anti-HCVAb) elleni antitestek kimutatását a vérben. Ha az ELISA-teszt eredménye pozitív, akkor a szervezet a hepatitis C vírussal való érintkezését jelzi, de a pozitív ELISA-val rendelkező emberek 40% -a nem észleli a vírust a vérben. Ezt a jelenséget hamis pozitív eredménynek nevezik. Az ELISA segítségével a donorvér is ellenőrizhető.
A hepatitis C RIBA
A hepatitis C RIBA analízisét a pozitív ELISA eredmény megerősítésére használjuk. A rekombináns immunoblot módszer (RIBA) pontosabb vizsgálata a hepatitis C vírus elleni antitestek jelenlétéről A hepatitis C vírus jelenléte a szervezetben szintén nem határozza meg a pozitív eredményt, hanem csak az antitestek jelenlétét igazolja.
Hepatitis C PCR vizsgálatok
A hepatitis C vírusok jelenlétének kimutatására a vérben (HCV RNS) és a diagnózis elkészítésére leggyakrabban a polimeráz láncreakció (PCR) módszerét használják. Ez a tanulmány lehetővé teszi, hogy nagy pontossággal észleljük a vírus jelenlétét a vérben. A hepatitis C PCR-analízise a vírus jelenlétét már 5 nappal a fertőzés után, az antitestek megjelenését megelőzően felfedheti. Amikor a PCR-analízis eredménye pozitív, az aktív fertőzés jelenlétét jelenti.
Ilyen változatok vannak a PCR-elemzésben:
- kvantitatív PCR, amely lehetővé teszi nem csak a vírus jelenlétének tényét, hanem a vírusterhelést (a vírus mennyiségét). Ez a mutató nagy jelentőséggel bír a kezelés hatékonyságának meghatározásában;
- a hepatitis C vírus genotípusát meghatározó genotipizálás, amely fontos a kezelés időtartamának és taktikájának meghatározásához. A hepatitis C vírus több mint 10 genotípusa létezik, de a klinikai gyakorlatban elegendő öt leggyakoribb típus meghatározása: 1a, 1b, 2,3a / 3b.
Kvantitatív PCR-analízist végzünk:
- minőségi hepatitis C vírus RNS jelenlétére szérumban;
- a kezelés hatékonyságának pontos értékeléséhez;
- meghatározza a beteg kezelésének taktikáját.
Nincs közvetlen kapcsolat a hepatitis C súlyossága és a vérben lévő vírus mennyisége között. A vírus koncentrációja befolyásolja a betegség fertőzőképességét, azaz minél nagyobb a vírus mennyisége a páciens vérében, annál nagyobb a vírus átvitelének kockázata, például szexuális érintkezés vagy anya és gyermeke között. A kezelés hatékonysága a vírus koncentrációjától is függ. A terápia során a kedvező tényező az alacsony vírusterhelés, és nagyon magas a kedvezőtlen.
A genotípus-elemzés elvégzése:
- minőségi hepatitis C vírus RNS jelenlétére szérumban;
- a kezelés hatékonyságának pontos értékeléséhez;
- meghatározza a beteg kezelésének taktikáját;
- megjósolni a fertőző folyamat krónizálódását;
- meghatározza a betegség progresszióját.
A vírus genotípusának kimutatása nagy jelentőséggel bír a kezelés időtartamának meghatározásához, ami fontos, mivel az interferon széles körű mellékhatásokkal és alacsony betegtűréssel rendelkezik.
A hepatitis C dekódoló elemzése
Normális esetben a vírus RNS, ezek ellenanyagok és antigének teljesen hiányoznak. Az antitestek jelenléte a vérben a krónikus vagy akut hepatitis C jelenlétére vagy a gyógyulási időszakra utal. Ha a vérben HCV RNS van jelen, amelyet PCR-analízissel határoztak meg, ez a vírus jelenlétét jelzi a vérben.
Helytelen vizsgálati technikával, a szállítással és a vér rendellenességekkel párhuzamosan a PCR-elemzés hamis pozitív eredményeket mutathat. Az ELISA és RIBA elemzése a betegség korai szakaszában, amikor a szervezet még nem termelt elegendő mennyiségű antitestet, hamis negatív eredményt mutathat.
Ha a C-hepatitisz vizsgálatának megfejtésekor pozitív eredményeket érünk el, további diagnózis és kezelés érdekében szükség van egy fertőző betegség orvosával és a gasztroenterológussal.
A szegmentált neutrofilek csökkentek
A gyermek vérlemezkék normálisak, emeltek, csökkentek
A pajzsmirigy-stimuláló hormon TGT
Hepatitis diagnózisa
A hepatitis jelenlétét a testben nem lehet azonnal meghatározni, mivel a betegség inkubációs ideje legfeljebb négy hétig tarthat. Amikor a betegség első jelei megjelennek, a vér összetételében radikális változások következnek be az érintett szervezetben: egy biokémiai elemzés súlyos egészségügyi problémát és egy patogén vírus jelenlétét jelzi. A végső diagnózis elvégzéséhez azonban nem elegendő a hepatitisz véradására, valamint a hepatitis részletes diagnózisára.
A hepatitis laboratóriumi diagnózisa
Kívánatos, hogy az inkubációs periódus vége után végezzük el, hogy az orvos a lehető legnagyobb pontossággal meghatározhassa a szervezetben lévő májbetegséget. Ellenkező esetben az előírt kezelés nem adja meg a kívánt terápiás hatást, és még súlyosbítja az uralkodó klinikai képet.
A hepatitis A diagnózisa
A hepatitis A diagnózisa tipikusan a beteg részletes megkérdőjelezésével kezdődik és számos olyan vizsgálat kijelölése, amelyet a lehető leghamarabb végre kell hajtani. Ez a következő:
- biokémiai vérvizsgálat;
- teljes vérszám;
- PCR módszer;
- ELISA;
- véralvadási.
Ha Botkin-betegség előrehalad, akkor a biokémiai vérvizsgálat eredményei alapján megfigyelhető a bilirubin, az AlAT és az AsAT rendellenes ugrása. Továbbá specifikus anti-HAV IgM keletkezik, amelyek a hepatitis A jelenlétének vitathatatlan ténye.
Általában véve a vér elemzését a leukociták csökkenése, az ESR és a limfocitózis ugrása határozza meg. Mindazonáltal a legmegbízhatóbb a PCR módszer, amely meghatározza a patogén vírus RNS indikátorait.
Az orvos továbbá tanulmányozza a betegség tüneteit, majd végleges diagnózist készíthet, és áttörhet a leghatékonyabb terápiára. A műszeres vizsgálat szükségessége rendkívül ritka. A beteg kórházi kezelésének és karanténjának sikeres konzervatív kezelése után a végső gyógyulás várható, és az A hepatitis nem ismétlődik újra.
A hepatitis B diagnózisa
A hepatitis B vírus jelenlétének meghatározása a laboratóriumi vizsgálatok eredményei szerint is lehetséges, és ehhez az első dolog a vér hepatitiszhez való adásához szükséges. A kórokozó vírusnak három fő antigénje van: a HBsAg, a HBcAg és a HBeAg, amelyekhez antitesteket termelnek a szervezetben. Ennek a klinikai képnek a fő jellemzője az ELISA - ELISA, amely csak a hepatitis B specifikus markereit tárja fel.
Közvetlenül tisztázni kell, hogy a HBsAg antigén a hepatitis első tünetei előtt is megjelenik a vérben, és megbízhatóan meghatározható a jeges időszakban. A negatív teszt azonban nem zárja ki a hepatitis B jelenlétét, és ezért egyformán hatékony polimeráz láncreakciós (PCR) módszer alkalmazását igényli.
Ha gyanítja, hogy a hepatitis B kötelező, egy biokémiai vérvizsgálat, amelyet ajánlott az első helyen végezni. A máj biopsziájának és a peritoneális szervek ultrahangának elvégzését egyenként tárgyaljuk, de ha a betegség története nagyon egyértelmű, klinikai vizsgálati módszerekre nincs szükség.
Máj echogram az autoimmun hepatitisben a krónikus hepatitis stádiumában
A hepatitis C diagnózisa
A diagnózis felállításához nem elegendő a vér adása hepatitiszre, mivel a vírus rejtett formában uralkodhat a testben. Mindazonáltal a fő laboratóriumi vizsgálatok mind a fenti elemzések, mind a májbiopszia további teljesítménye. A biológiai anyag mikroszkópos vizsgálata (a mi esetünkben egy májszövet) meghatározza a kóros folyamat és a szöveti fibrózis mértékét. Az anyagmintavétel helyi érzéstelenítés alatt történik, az ilyen eljárások szövődményei rendkívül ritkák az orvosi gyakorlatban.
Ha a hepatitis C gyanúja áll fenn, a klinikai vizsgálat fő módszere a hasüregi szervek ultrahangja. Az ok egyszerű: a betegséget gyakran az érintett máj vizuális változása, szerkezetének és méretének megváltozása jelenti. Így határozhatja meg:
- a máj, a lép, a hasnyálmirigy és az epehólyag mérete;
- patológiás változások ezekben a szervekben;
- általános véráramlás a peritoneális szervekben;
- optimális terület a májbiopszia elvégzéséhez.
Ez a klinikai vizsgálat módszere meghatározza a szerv összes fókuszos patológiáját mikroszkopikus szinten. Ha a máj szürke színben jelenik meg a képernyőn, azonnali biopszia szükséges, mivel a szürke szín megjeleníti az „emberi szűrő” érintett szöveteit.
Hepatitis megelőzés
Mivel a betegség nem nyilvánul meg azonnal, messze van az összes olyan klinikai képtől, amely azonnali kezelésre kerül. A beteg egyszerűen nem tudja tisztában a patogén vírus létezésével a szervezetben, amely viszont gyorsan terjed a véráramba, és megfertőzi az egészséges májsejteket.
Az ilyen tragikus sors elkerülése érdekében ajánlott az összes megelőző intézkedés betartása. Az ilyen éberség jelentősen csökkenti a morbiditás kockázatát és megmenti Önt a jövőbeni súlyos egészségügyi problémáktól. A megelőzés alapvető szabályait az alábbiakban mutatjuk be:
- mossa meg a kezét az utca után;
- magas minőségű feldolgozásra friss zöldségek és gyümölcsök;
- az éves naptártervben meghatározott minden megelőző vakcinázást elvégezni;
- szelektív hozzáállás a szexuális partnerekkel szemben;
- a betegekkel való érintkezés elkerülése;
- csak egyszer használatos fecskendőket használjon, és különösen vigyázzon a vérátömlesztő állomásokra.
Azt is javasoljuk, hogy rendszeresen (hat havonta egyszer) adjon vért a hepatitiszre, hogy megbizonyosodjon arról, hogy a vírus nem jut be a szervezetbe, és nem fertőződik meg az egyszeri egészséges májsejtekkel. Ha a diagnózist meghatározták, akkor azonnal el kell jönnie a szakszolgálati számlára, és követnie kell a szakember minden ajánlását.
Kiadói szerző:
Syropyatov Sergey Nikolaevich
Oktatás: Rostov Állami Orvostudományi Egyetem (Rostov Állami Orvostudományi Egyetem), Gastroenterológiai és Endoszkópiai Tanszék.
gasztroenterológus
Orvostudományok doktora