A hepatitis egy súlyos betegség, amelynek számos oka van. Fejlődésének alapja a máj közvetlen vagy közvetett károsodása. Figyelembe véve annak jelentőségét az egész szervezet számára, csak azt lehet kitalálni, hogy milyen nehéz a patológia. Ebben a cikkben részletesebben megvizsgáljuk a hepatitis C kurzusának és laboratóriumi diagnózisának jellemzőit.
A betegség oka egy vírus, amely RNS-t tartalmazó kórokozókra utal. Megkülönböztető tulajdonsága van - a képesség, hogy mutáljon, vagyis megváltoztassa a szerkezetét. Ennek következtében a fertőzés az immunrendszer támadásától megszűnik, és a legtöbb esetben a máj krónikus gyulladásához vezet.
Tekintettel a vírus különböző altípusainak létezésére, a gyógyszerek kiválasztásának a genotipizálás eredményén kell alapulnia. A betegség hosszú vizsgálata és a HCV szerkezetének jellemzői ellenére még nem sikerült kifejleszteni egy speciális vakcinát a betegség számára.
A korai diagnózis nehézségei a hepatitis aszimptomatikus lefolyásában rejlenek, aminek következtében egy személy a cirrózis stádiumában orvoshoz látogat. A betegség időben történő kimutatása érdekében rendszeres orvosi vizsgálatok szükségesek. Csak a vér laboratóriumi vizsgálatával lehet kimutatni a HCV-t és megakadályozni a környező személyek fertőzését. Az a tény, hogy a fertőzés hordozója hosszú ideig nem tudja kitalálni a patológiát, és továbbra is továbbítja a vírust az egészséges embereknek.
Az átvitel módjai
A legtöbb esetben a vírus a vérben terjed, mivel a legmagasabb koncentrációjú kórokozók. Így a fertőzést továbbítják:
- hemodialízissel;
- fertőzött tűvel;
- a harcok folyamatában, amikor a bőr sérült, és vérrel érintkezik;
- vérátömlesztéssel (vérátömlesztés).
A fertőzés valószínűsége az intimitás alatt elhanyagolható, mivel a spermában és a hüvelykisülésben kevés kórokozó van. A fertőzés kockázata jelentősen megnő a nemi szervek nyálkahártyájának integritását sértve. Ezt agresszív és anális szex esetében figyelték meg.
Ami a függőleges átviteli módot illeti, a munkafolyamatban történik. A magzat terhességének időszakában a kórokozó nem tud áthatolni a placentán az embrióba. Természetes szülés esetén a kórokozót a bőrbe történő traumatizálással továbbítják a gyermeknek, amikor az anyai vérrel érintkezik.
A kórokozó egészséges szervezetbe való behatolása után kezdődik az antitestek szintézise, amely a fertőzés elleni védelem és az immunrendszerhez tartozik. Ezek az ELISA-val rendelkező személy első vizsgálatában találhatók.
A diagnózis megerősítéséhez a pácienst polimeráz láncreakciónak vetjük alá. Ez egy patogén ágens genetikai anyagának és a vírusterhelés meghatározásának elemzése.
A hepatitis C laboratóriumi diagnózisa
A laboratóriumi diagnózis egy enzim immunvizsgálattal kezdődik. Fő feladata a patogén ellen termelt antitestek kimutatása. Hatékonysága közel 95%. Ennek a kutatásnak köszönhetően a preklinikai stádiumban azonosítható a vírushordozó, és továbbküldhető a további vizsgálatra.
Az ELISA kvalitatív elemzése azt jelzi, hogy a beteg vérében immunglobulinok vannak jelen. Eredménye „pozitív” vagy „negatív” lehet. Miután megkapta az első választ, a személy a következő vizsgálatra kerül - PCR. Az ár függ a reagensek minőségétől és a laboratóriumtól. A polimeráz láncreakció költsége elérheti a 4000 rubelt.
PCR jellemzők
Polimeráz-láncreakció alkalmazásával még egy kis mennyiségű biológiai anyag is lehetővé teszi számunkra, hogy megbecsüljük a vér vírusterhelését, azaz a kórokozók koncentrációját egy milliliter folyadékban.
A PCR megjelenésével a hepatitis diagnózisa sokkal könnyebbé vált. Az elemzés lehetővé teszi a HCV RNS azonosítását, a fertőző folyamat szakaszának és a vírus hordozó fertőzőképességének megállapítását.
Számos genetikai diagnózis létezik:
- A hepatitis C-re vonatkozó PCR kvalitatív elemzése - megerősíti a HCV jelenlétét vagy hiányát a beteg vérében:
- mennyiségi, amelyen keresztül kiszámíthatja a vírusok koncentrációját és meghatározhatja a betegség stádiumát. Az eredményt IU / ml vagy másolatok / ml-ben adjuk meg (a laboratóriumtól függően);
- genotipizálás - szükséges a HCV genotípusának meghatározásához. Ez a gyógyszerek pontos kiválasztásához szükséges, amely ebben az esetben a leghatékonyabb lesz. Az elemzés közvetve jelzi a máj patológiás folyamatának súlyosságát. Így a kórokozó harmadik genotípusában a leggyakrabban megfigyelhető a steatosis, amelynek alapja a zsír felhalmozódása a hepatocitákban (sejtjeiben). Emellett a vírus típusa befolyásolja a terápiás kurzus kimenetelét és időtartamát.
A hepatitis C PCR-jének kvalitatív elemzése
Először is, a biológiai anyagot a laboratóriumban vizsgálják a HCV RNS jelenlétére. Fontos megjegyezni, hogy a hepatitis C minőségi elemzése bizonyos fokú érzékenységet mutat, és ezért nem mindig ad megfelelő választ. Ebben az esetben a laboratóriumi diagnosztikát más reagensek használatával ajánlott újra elvégezni.
A megbízható eredmények elérése érdekében legalább 50 IU / ml érzékenységű vizsgálati rendszereket kell használni.
A diagnosztikai eredmény lehet „pozitív” vagy „negatív”. Ha a kórokozó nem található a vérben, a vizsgálat befejeződött. Ha egy kórokozót detektálunk a mintában, akkor egy vírusterhelést számszerűsítünk.
Hamis negatív válasz keletkezik, ha a folyamatot megsértjük, például az aktív komponensek, amelyek elnyomják a kórokozó másolatait, belépnek a közegbe. Így nem lehet valódi vérképet megjeleníteni, ezért nem diagnosztizálják a személy fertőzését.
Hamis pozitív eredmény érhető el, ha a biológiai anyag gyűjtésére szolgáló cső, valamint a vizsgálathoz szükséges környezet szennyeződött. Ezen túlmenően az ilyen analízisre adott válasz akkor is lehetséges, ha vegyes fertőzések jelentkeznek, amikor a máj több vírus, például hepatitis C és D hatással van.
A kvalitatív kutatások jelzése
Az orvos minőségi vizsgálatot írhat elő a hepatitis C vírus RNS-jének azonosítására:
- pozitív vagy kétes enzim immunvizsgáló válasz fogadása után;
- a diagnózis ellenőrzésére;
- meghatározza a vírusterhelést;
- a betegség stádiumának meghatározása;
- vegyes fertőzés diagnózisa. A hepatitis C gyakran fertőzi a májat a „D” vírussal egyidejűleg;
- a terápiás taktika meghatározása, figyelembe véve az okozó ágens genotípust;
- a vírusellenes gyógyszerekkel végzett kezelés során bekövetkező változások dinamikájának értékelése.
A polimeráz láncreakció előnyei a következők:
- a technika nagy érzékenysége, amely lehetővé teszi a fertőzés tényének megállapítását a preklinikai stádiumban;
- a kórokozó genetikai anyagának azonosítása, és nem az antitestek azonosítása;
- egy patogén ágens altípusának létrehozásának lehetősége;
- magas diagnosztikai sebesség, mivel nincs szükség az anyag tápközegre történő beültetésére, és elegendő a specifikus vizsgálati rendszerek alkalmazása. Egy személy 5 óra múlva kapja meg az eredményt;
- sokoldalúságát. Az elemzés lehetővé teszi bármely genetikai anyag (RNS, DNS) azonosítását. Ennek köszönhetően az orvos megerősítheti a hepatitis C-t és a betegség egyéb típusait (B);
- a látens fertőzés észlelésének képessége.
Kvantitatív kutatás
A vérvizsgálat során a polimeráz láncreakció segítségével kiszámítható a kórokozók száma egy meghatározott mennyiségű biológiai anyagban. A mutató IU / ml-ben van megadva. Az elemzés segítségével meg lehet határozni a beteg fertőzésének mértékét, meghatározni a fertőző folyamat szakaszát, és értékelni kell a gyógyszeres kezelés hatékonyságát is.
A PCR alapján a szakember eldönti, hogy a gyógyszerek melyik dózisai gátolhatják a kórokozók szaporodását. Ezenkívül meghatározzák az antivirális kezelés időtartamát és az életre vonatkozó prognózist. Fontos megjegyezni, hogy a vizsgálati rendszerek nagy érzékenységűek, ezért a módszer lehetővé teszi egy személy fertőzésének megerősítését a preklinikai szakaszban.
genotipizáláshoz
Mivel a kórokozó képes mutálni, genotípusa szükséges a kezelés taktikájának és a vírusellenes szerek megválasztásának meghatározásához. Például a HCV 1 kezelése 48 hétig tart, pozitív tendenciát csak az esetek 60% -ában figyeltek meg. A 2. és 3. genotípus kedvezőbb prognózist mutat. A vírusellenes szereket 8 hónapra írják elő, és hatékonyságuk elérte a 85% -ot.
A statisztikák szerint a legtöbb esetben az HCV 1, 2 és 3 az Orosz Föderációban van bejegyezve.
A laboratóriumi vizsgálat megfejtésekor ez a válasz - „nem gépelt”. Ez azt jelenti, hogy a vírus kering a beteg keringési rendszerében, és a tesztrendszer nem ismeri fel. Az elemzés eredménye ebben az esetben azt jelzi, hogy a kórokozó nem jellemző egy adott földrajzi területre.
Hogyan lehet megbízható eredményeket kapni?
Annak érdekében, hogy a C-hepatitis okozta ágens RNS-jének kimutatására szolgáló kvalitatív PCR-vizsgálat eredményei megfelelőek legyenek, a laboratóriumi diagnosztika előkészítéséhez szükséges követelményeket figyelembe kell venni:
- a vérmintát üres gyomorban végzik, és az „éhes” résnek nem lehet rövidebbnek 8 óránál;
- két nappal a vizsgálat előtt ajánlott abbahagyni az alkoholtartalmú italok fogyasztását, és hagyja abba a fűszeres, zsíros és füstölt ételeket;
- törölje a véralvadást csökkentő gyógyszerek bevezetését, például a heparint. Ha ezeket a gyógyszereket egészségügyi okokból írják elő, erről értesíteni kell az orvost. Ezen túlmenően a szakembernek tisztában kell lennie a laboratóriumi kutatás eredményeit befolyásoló egyéb gyógyszerek befogadásával;
- A biológiai anyag összegyűjtésének előestéjén a fizioterápiás eljárásokat nem szabad elvégezni és súlyos fizikai terhelésnek kell alávetni.
Az elemzés eredményeit nemcsak a vér adományozója, hanem más tényezők is befolyásolhatják:
- rossz minőségű vérminta;
- a biológiai anyagok szállítására vonatkozó ajánlások be nem tartása;
- a laboratóriumi dolgozók elégtelen képzése;
- a kutatási technika be nem tartása;
- antikoagulánsok (heparin) bevezetése a vérmintavétel előestéjén. Ez a gyógyszercsoport csökkenti a véralvadást, ezáltal lassítja a reagensek munkáját.
A különböző laboratóriumokban a diagnosztikai válasz kissé eltérhet, de ezek a hibák nem befolyásolják a vizsgálat végeredményét.
Különös figyelmet fordítanak a laboratóriumban használt vizsgálati rendszerek típusaira. Gyakran előnyösek a nagy érzékenységű reagensek. Ez fontos az alacsony vírusterhelésű betegeknél, mert nehéz észlelni.
Milyen gyakran végeznek laboratóriumi vizsgálatokat?
Az elsődleges polimeráz-láncreakciót olyan emberekben hajtják végre, akiket a hepatitis kórokozójával szembeni ellenanyagok immunológiai vizsgálata során detektáltak. Ebben az esetben úgy van kijelölve, hogy megerősítse a személy fertőzésének tényét, és megállapítja a betegség stádiumát. Ezenkívül az elemzés lehetővé teszi a vírus altípusának meghatározását, amely különösen fontos a gyógyszerek megválasztása szempontjából.
A kötelező laboratóriumi vizsgálatok következő időszaka a vírusellenes kezelés kezdetétől számított 3 hónap. A diagnosztika lehetővé teszi a gyógyszerek hatékonyságának értékelését, az adag módosítását vagy helyettesítését.
Az alapvető vizsgálatok mellett a PCR-t a kezelés megkezdésétől számított 4 és 24 héten belül is elvégezhetjük. A betegség pozitív prognózisát megerősíti a vírusterhelés csökkenése a három hónapos kezelés után. Például 1 millió IU / ml-ről több százezerre kell csökkentenie.
Ha a kórokozó szerek koncentrációja a vérben ugyanazon a szinten marad vagy enyhén emelkedik, ez azt jelzi, hogy a vírusellenes szerek hatástalanná válnak, és ezek cseréjét igénylik. A kezelés végén a PCR használatával meg lehet erősíteni a páciens gyógyulását.
A laboratóriumi diagnosztika eredményeinek helyes értelmezéséhez a hepatológus vagy a fertőző betegség szakértője szükséges. Tekintettel a hamis válaszok magas gyakoriságára az ELISA-ban, az elemzést kizárólag az elsődleges szűrésre használják. A páciens polimeráz láncreakciójának alaposabb vizsgálatához.
A hepatitis C vírus PCR-jének pro-analízise
A hepatitis C súlyos májbetegség bármely személy számára. A patológiát a flavivírus HCV okozza, amelynek szerkezetében az RNS molekula jelen van, amely a vírus általános genetikai kódját hordozza.
A patológia különböző formájú lehet, minden közvetlenül függ az egyén általános állapotától és az egyes organizmusok jellemzőitől.
Ez a szerkezet lehetővé teszi a hepatitis C kategóriájú vírus jelenlétét a PCR vizsgálatára.
Lehetővé teszi, hogy időben azonosítson egy emberre veszélyes vírust, gyógyszert kezeljen és helyreállítsa az egészséget, védve a szervezetet a máj megsemmisülésétől.
A HCV vírus mind akut - veszélyes formában, mind krónikusan nyilvánulhat meg. Ha egy vagy több személy ezt a vírust észleli, akkor azt PCR-elemzéshez kell hozzárendelni.
Miért végzett a PCR-elemzés?
Az elemzés eredményei alapján az orvos képes kezelési rendet készíteni
A hepatitis C PCR laboratóriumi orvosi vizsgálata a flavavírus meghatározására használt biológiai anyag vizsgálata. A vizsgálat a polimeráz-láncreakcióra utal.
A vírus sérülésének teljes mennyiségi értékét, minőségi tulajdonságait mutatja, és az RNS-t tartalmazó vírus genotípusát is meg lehet határozni.
Fontos! Ezen elemzés alapján az orvos meghatározza a módszert, a terápia típusát és időtartamát. Az elemzés révén meg lehet határozni az általános járványtani tényezőt, azaz a betegség más hordozókra történő továbbításának kockázatát.
A modern orvoslás elemzését RNS-elemzésnek is nevezik. Ennek oka az, hogy a C-hepatitis flavavírus a RNS részecskéiből áll, amelynek mérete körülbelül 30-60 nm. Ennek a vírusnak az egyik jellemzője a mutáció bizonyos hajlama.
Minden jelenlévő alfaj vagy genotípus különböző ellenállással rendelkezik. Ez a körülmény a betegség különböző kutatási módszereinek és kezelésének alapjává válik, valamint egy további előrejelzés a jól kezelt terápiával.
Hogyan
Az elemzést szigorúan üres gyomorban végzik, vagyis a reggeli előtt vénás vért adnak. A vizsgálati módszert a Real-Time PCR segítségével vagy a modern szabványok diagnosztikájával valósítja meg, amely valós időben történik.
Ebben az esetben a kimutatás alsó határa 15 NE / ml. Az elemzést szigorúan zárt automatizált rendszerekkel végzik. A C-hepatitist olyan vizsgálatokkal határozhatjuk meg, mint a COBAS AMPLICOR, az összérzékenység 50-100 NE / ml.
Fontos! Minden hasonló típusú modern laboratóriumi kutatást egy bizonyos érzékenységi küszöb figyelembevételével végeznek.
A reagens azon képességéről van szó, amely a reagens azon képességének kimutatására szolgál, hogy meghatározza a vírust a vizsgált biológiai anyagban. Ha a szervezetben nincs betegség, a vizsgálat eredménye „nem található”.
A képen egy PCR elemző áramkör látható:
A PCR-analízis típusai és eredményei
Ha a cookie-k területén a legkisebb betegség és fájdalom van, azonnal forduljon orvoshoz, aki alapos vizsgálatot végez. A hepatitis C PCR-elemzése három fő ponton alapul:
- Kvantitatív elemzés.
- Minőségi elemzés.
- Genotipizálás.
Az elvégzett vizsgálatok lehetőséget adnak a virémia pontos természetének és a genetikai terv tüneteinek meghatározására és azonosítására. Az érzékenységgel arányos, az elvégzett diagnosztikai rendszerből az orvosi kutatást egyszer lehet elvégezni, valamint néhány megerősítést.
Ezt a korábban kapott eredmények tisztázása érdekében kell elvégezni, és ebben az esetben egy érzékenyebb reagenssel kell használni.
Kiváló minőségű PCR
A PCR-re vonatkozó kvalitatív elemzés egy másik olyan név, mint a polimeráz-láncreakció. A teszt standard érzékenységével, amely lehetővé teszi a vírusos mikroba jelenlétének meghatározását, a mutatók a 10-500 IU / ml tartományba esnek.
A betegség negatív elemzésével az elemzés azt mutatja, hogy a beteg vérében a teljes koncentráció szintje kisebb lesz, mint a diagnosztikai rendszer általános érzékenységi küszöbértéke.
Ha a "nem észlelt" választ kaptunk a minőségi PCR során, a későbbi kezeléshez meg kell ismernünk a reagens teljes érzékenységi küszöbértékét. Ami a pozitív reakciót illeti, a PCR-analízis során a fertőzést követő 4. napon szerezhető be. A standard fehérjefrakciók a megállapított flavavírusokhoz sokkal később jelentkezhetnek.
A PCR-analízis általános rendszere a következőképpen ábrázolható:
Kvantitatív PCR
A mennyiségi PCR a termelt vírusterhelés speciális mutatója, amely az emberi szervezetben a vírus RNS-koncentrációjának teljes szintjét tükrözi. Ez a mutató mutatja a vírus RNS-enzimek mennyiségét, amelyek a vénából vett köbcentiméterenként vannak jelen.
A vizsgálat eredményei az orvosi kutatási rendszerben egy milliliter egységben jelennek meg. A kezekben kiadott tanúsítványoknál ez a mutató 1,7 millió vagy 1,700.000 IU / ml lehet.
Ezeket a betegeket kvantitatív PCR-analízisnek vetjük alá a vírusellenes kezelés megkezdése előtt. A második alkalommal a 12. kezelési héten kerül sor, amely lehetővé teszi a C-hepatitis-kezelés eredményeinek helyes értékelését. Más szavakkal, az elemzés lehetővé teszi az alábbi fontos paraméterek meghatározását:
- Meghatároztuk a fertőzőképesség szintjét, azaz a fertőzött személytől az egészséges személyhez való mikrobiális átvitel kockázatát. Minél nagyobb a flavavírus RNS koncentrációja, annál nagyobb a valószínűsége egy másik személy fertőzésének, ami fontos a szexuális kapcsolatokban.
- A hatékonyság általános szintje és a választott kezelési módszer.
- Ez ideális lehetőség a vírusellenes kezelés időtartamának és prognózisának meghatározására. Általában minél magasabb a terhelés, annál hosszabb ideig tart a kezelés.
Érdemes tudni, hogy a kvantitatív PCR függ a laboratóriumi vizsgálat konkrét típusától és az érzékenységi küszöbtől. A megállapított szabvány legalacsonyabb határértéke, hogy a mutató nem éri el a 600 000 NE / ml értéket.
Az átlag 600 000 és 700 000 IU / ml között van. Ha az eredményeket 800 000 IU / ml fölötti értékre állították be, az orvos azonnal meghatározza a készítményben jelen lévő vírus magas koncentrációját, például az RNS-t.
Fontos! A HCV RNS szintje és a betegség súlyossága közötti közvetlen kapcsolat azt sugallja, hogy ez a vírus jelen van az általános vérkészítményben, és megjegyzi a patológia komplexitását. A betegnek elég magas a vírusterhelése. Ezen túlmenően ez a kapcsolat azt jelzi, hogy a sejtek meglehetősen súlyos károkat okoznak.
genotipizáláshoz
A HCV természetbeni viszonylag magas mutációs aktivitása miatt az elvégzett vizsgálat során megállapítható, hogy a vírus típusa milyen betegségben van a beteg vérében. A modern orvostudományban 11 vírus, például a C-hepatitisz genotípusa ismert, amely igen sok különböző alfajt vagy altípust tartalmaz.
Az 1,2-es és 3-as típusok ismertek és gyakoriak Oroszországban, általában a genotipizálás az elvégzett elemzés nagyon fontos eleme. Ezzel az orvos megérti a választott gyógyszerekkel szembeni patológiás rezisztencia szintjét.
Az elemzés alapján szinte mindig a jövőbeli kezelés épül. Ez azért fontos, mert vannak olyan kezelési szabályok, mint például:
A hepatitis C minőségi vizsgálata
2017. március 8., 12:29 Szakértői cikkek: Nova Vladislavovna Izvchikova 0 10.547
A C-hepatitisz polimeráz láncreakciójának minőségi vizsgálata meghatározza a HCV jelenlétét vagy hiányát a szervezetben. Laboratóriumi körülmények között az RNS szerkezetét vizsgáljuk, amely magában foglalja a vírust. A C vírus kimutatása esetén szükséges a kezelés folyamata, mivel a máj elhanyagolt állapota súlyos következményekkel jár. Kiváló minőségű PCR-t hajtunk végre a visszanyerés után, hogy megerősítsük az antitestek hiányát. Kijelölt és rutinszerű ellenőrzés. A kórokozó alacsony koncentrációjában a vérben a PCR (kvalitatív) nem érzékel semmit, mert a diagnosztikai rendszer saját érzékenységi küszöbértékekkel rendelkezik. A betegség kezdeti stádiumában vagy enyhe formában a PCR-t ultradiagnosztika végzi ultraérzékeny berendezéseken.
Mi az RNS vírus?
A hepatitis C vírus (vagy a hepatitis C vírus RNS) RNS jelentése maga a májbetegség. A C vírus a test egészséges sejtjéhez kötődik belsejében. Idővel az egész testben elterjedt, csak a vérbe kell jutni. Ennek eredményeként a kórokozó behatol a májba, megolvad a sejtjeivel és keményen működik. A májsejtek (hepatociták) befolyása alatt vannak, változásokon mennek keresztül, és ebből meghalnak. Minél hosszabb a C vírus a májban, annál nagyobb a sejtek száma. Idővel veszélyes betegségek alakulnak ki, ami rosszindulatú degenerációhoz és halálhoz vezet.
A máj vírusfertőzése nem nyilvánulhat meg kívülről. A fertőzött személy sok éven át vagy évtizeden át teljesen egészségesnek érzi magát, és csak véletlenszerű vizsgálata leggyakrabban patológiát tár fel. A hepatitisz vére adásakor az RNS (ribonukleinsav) lánc egy részét, amely a humán gén (DNS) része, vizsgáljuk. A laboratóriumi vizsgálatok eredményeit nem szabad önkezelésre használni, mert ez csak egy mutató. A pontos képet és a további diagnózist az orvos határozza meg.
Amikor elkészült: a kutatásra vonatkozó jelzések
A HCV megerősítésekor PCR-analízist végzünk (polimeráz-láncreakció). A PCR-vizsgálatok segítenek megtalálni az RNS-struktúrában a kórokozót, és hatékony terápiát írnak elő. A következő esetekben kinevezték:
- a máj gyulladásának jeleinek kimutatása;
- szűrővizsgálatok megelőzésre;
- a kapcsolattartók vizsgálata;
- vegyes eredetű hepatitis diagnózisa (a fő kórokozó meghatározása);
- a vírus reprodukciós aktivitásának szintjének meghatározása krónikus formában;
- a máj cirrhosisa;
- meghatározza az előírt kezelés hatékonyságát.
A PCR kvalitatív és kvantitatív elemzése van. A mennyiségi PCR mutatja a vírus hordozóval rendelkező RNS százalékos arányát a vérben, és a kvalitatív a vírus jelenlétét vagy hiányát jelzi. A minőségi mutatónak (a C-hepatitis RNS jelenléte) szintén kvantitatív kutatásra van szükség. A hepatitis C okozta ágens magas koncentrációjának szintje a transzmisszió kockázata, vagyis mások fertőzése. Az alacsony számok jobban kezelhetők. A vérben lévő RNS-vírusok mennyisége nem kapcsolódik a betegség intenzitásához. Az interferon-terápia esetében a PCR-analízist is elvégezzük a kezelési ciklus időtartamának és összetettségének meghatározására.
A hepatitis C magas minőségű PCR-elemzésének jellemzői
Minőségi analízist kapunk egy olyan polimeráz láncreakció indikátorral, amely a vérben hepatitis C-vel szembeni antitestekkel rendelkezik. Javasolt a hepatitisz B tesztje, majd pozitív következtetés esetén és a hepatitis D esetében. A kvalitatívan elemzett reakciót más vérvizsgálatokkal együtt kell elvégezni. Az elemzések teljes képet fognak mutatni a vírus terjedéséről.
A vizsgálati eredményekből csak a hepatitis C pozitív vizsgálata lesz látható vagy negatív, azaz vírus jelenléte vagy hiánya. Ha a kimenet "észlelhető", akkor a vírus aktív és továbbra is aktív. A "nem észlelt" megjelölés a vírus hiányát vagy annak kis mennyiségét jelzi. Ezzel a mutatóval szem előtt kell tartani, hogy a diagnosztikai rendszerek analitikai érzékenysége eltérő, és hogy az RNS hepatitis C továbbra is a vérben lehet, de az elemzésben nem jelenik meg.
Egy különösen érzékeny PCR módszer kimutatja az ultra hepatitis C-t még gyenge mennyiségben is. Fluoreszcencia hibridizációs vizsgálatot alkalmaztunk, amely többszöröse a standard PCR rendszereknél. A módszert több esetben használják:
- a hepatitis C gyanús rejtett formái;
- A PCR-diagnosztika nem erősítette meg a kórokozót, de vannak antitestek;
- hasznosítás esetén;
- a korai fertőzés kimutatására.
Dekódolási elemzés
A HCV PCR dekódolása befolyásolja a végső döntést, különösen diagnosztizáláskor, különösen az ultrametod módszerrel. A vizsgálat fő hátránya, hogy a minta és az anyagok szigorú betartása a steril körülmények között történik. A kis eltérések néha pontatlan analitikus következtetéseket mutatnak, bonyolítják a diagnózist és az azt követő kezelést. A hepatitis RNS meghatározására vonatkozó PCR elemzése nem mindig biztosan mutatja a betegség képét, néha pontatlanságok megengedettek, és mindkét irányban.
A hepatitis vírus diagnosztizálása ajánlott átfogó vizsgálatot végezni.
A mutatók normája
A polimeráz láncreakció analízisében a vizsgálat eredményei között a JgM antitestek vírusos hepatitisz C elleni hiánya tekinthető. Ugyanakkor a szerológiai analízis eredményei azt mutatják, hogy a C vírus elleni antitestek jelen vannak, és ez szintén a normál tartományon belül van. A kvalitatív meghatározás nem mutatja a betegség intenzitását, csak a C-hepatitisz okozta RNS-ben társul. Ezt az elemzést a kezelés után megismételjük, hogy megerősítsük a tényleges helyreállítást.
eltérések
Ha a HCV RNS elleni JgM antitestek jelen vannak, ez jelzi a fejlődő fertőzést. A betegség ugyanakkor akutan vagy krónikusan folytatódik, különböző szakaszokban nyilvánul meg. Ha az antitestek számának csökkenését rögzítik, az elemzés azt jelzi, hogy a kezelés eredményeit a gyógyulás során sikerült elérni. Rendkívül ritkán fordulnak elő hamis pozitív eredmények a diagnosztikában. Ezek a terhesség alatt és más fertőző betegségekben szenvedő nőknél fordulnak elő.
A hepatitis C PCR-analízise
A "krónikus vírusos hepatitis C (CVHS)" diagnózisához a személy átfogó vizsgálata szükséges, amely magában foglalja a klinikai, laboratóriumi és műszeres tanulmányokat. A diagnózis szempontjából fontos a helyes diagnózis szempontjából a PCR módszer - polimeráz láncreakció.
Mit mutat ez az elemzés és miért van szükség rá?
Ez a laboratóriumi módszer kimutatja a hepatitis C vírus RNS-jét az emberi vérben. A vírus ellenanyagok elleni enzimhez kötött immunoszorbens vizsgálattal (ELISA) együtt a PCR-t használják a CVHC és a kórokozó genotípusának diagnosztizálására. Ez a kutatás a laboratóriumi diagnosztika egyik legújabb módszere. Megbízhatósága a CVHS-nél meghaladja a 97% -ot, ami a kutatás szempontjából nagyon jó mutatónak tekinthető.
Három PCR vérvizsgálatot végeznek a CVHS-hez: kvalitatív, kvantitatív és vírus genotipizálás. A vírus első vizsgálata (kvalitatív elemzése) azt észleli a vérben, ezért csak diagnózis céljára használják fel.
A második (kvantitatív) vizsgálat megállapítja, hogy a vírusterhelés milyen mértékű a testre, ezért a terápia hatékonyságának ellenőrzésére használják.
A harmadik PCR (genotípus) tisztázza a vírus genotípusának megállapítását, ami nagyon fontos a helyes antivirális kezelés kijelöléséhez.
A polimeráz láncreakció technikájának lényege az enzimek alkalmazása, amelyek a biológiai anyagban szaporítják a kórokozó genetikai anyagát. Az ilyen replikáció során a csövet a vérrel többször melegítjük és az enzimatikus reakció felgyorsításához szükséges hőmérsékletre hűtjük. Ezeknek a manipulációknak köszönhetően a vírus genom mennyisége sokszor megnő, lehetővé téve, hogy még minimális mennyiségben is kimutatható legyen.
A PCR diagnosztikának számos előnye van a többi laboratóriumi vizsgálathoz képest:
- nagy érzékenység - 97-98%;
- garantált analitikai specifitás (pontosan megmutatja a keresni kívánt kórokozót, és nem a kapcsolódó törzset);
- a vezetés sebessége (a következtetés meghozatala nem több, mint 2 nap).
Háromféle PCR-vizsgálat
Kiváló minőségű PCR-analízist rendelünk minden olyan beteghez, akiknél az ELISA-analízis kimutatott antitesteket a HVGS-vírus ellen. Kiváló minőségű PCR végrehajtása után két válasz opció érhető el: "Az RNS detektálva" vagy az "RNS nem észlelhető". A vírus minimális mennyiségének a vérben történő kimutatásához legalább 50 IU / ml érzékenységű vizsgálati rendszerekre van szükség. Ha a vírus koncentrációja a beteg vérében kisebb, mint a diagnosztika meghatározása, a vizsgálat eredménye hamis negatív lehet. Az ilyen diagnosztikai hiba elkerülése érdekében a PCR diagnosztikát végző laboratóriumoknak nagyon érzékeny vizsgálati rendszerekkel kell rendelkezniük. Az "Invitro" laboratóriumban például 15 IU / ml érzékenységű vizsgálatokat alkalmaznak. A laboratóriumi dolgozók kötelesek tájékoztatást adni a tesztek érzékenységéről a betegeknek és az orvosoknak az első kérésük alapján.
A PCR kvantitatív elemzése határozza meg a virémia mértékét, azaz a kórokozó koncentrációját a vérben, vírusterhelést. Ennek a vizsgálatnak a eredménye, a magas minőségű PCR-sel ellentétben, számokban, például 2 × 10 * 6 IU / ml, ami 2 millió nemzetközi egységet jelent 1 ml vérben. Néhány laboratórium egy másik indikátort használ - a példányszám / ml. Ez a két mutató könnyen konvertálható: 1 nemzetközi egység egyenlő 4 RNS-példányban. Tehát 2 × 10 * 6 IU / ml azt jelenti, hogy a vírus RNS 8 × 10 * 6 példánya 1 ml-ben, azaz a vékonyréteg-kromatográfiás eljárással. 8 millió példányban 1 ml vérben.
A genotípus meghatározása a vírus hat genotípusának egyikét jelenti. A klinikai kép, a máj szövődményeinek alakulása és a beteg jövőbeli prognózisa függ a kórokozó genotípusától. A vírus genotípusa nagyon fontos a diagnózis szakaszában, mivel a gyógyszerek kombinációja és a terápiás kurzus időtartama a betegnek a helyes meghatározásától függ.
Azonban ez a látszólag „tökéletes” laboratóriumi kutatásnak is van hátránya:
- a vizsgálat megismétli az összes kórokozó genetikai anyagát, még a nem élő is, ami torzíthatja az eredményt. Ezért a hatékonyság ellenőrzéséhez a PCR segítségével az újra-analízist legkorábban az előzőtől számított 2 hónappal végezzük el, hogy a halott vírusok „elhagyhassák” a beteg szervezetét;
- a vírusgenom egy része, amelyet tesztrendszerek segítségével határoznak meg, elméletileg más vírusokban vagy mikroorganizmusokban is jelen lehet, így hamis pozitív válasz lehetséges;
- vírusok gyorsan mutálnak. Néha a vírusmutáció sebessége és mértéke olyan magas, hogy a vizsgálati rendszer leállítja a genomjuk fogását. Ennek eredményeképpen hamis negatív eredmény érhető el.
Ezeknek a hiányosságoknak a kiegyenlítése érdekében a PCR diagnosztikai laboratóriumi vizsgálati rendszerek gyártói folyamatosan végeznek vizsgálatokat, beleértve a keresztreakciókat és a vírus adott genotípusával szembeni érzékenységet.
Hogyan kell a C-hepatitisz PCR-vizsgálatát elvégezni?
Annak érdekében, hogy a PCR vizsgálat megkötése megbízható legyen, szigorúan be kell tartani a magatartásra való felkészülés szabályait:
- a vizsgálatot üres gyomorban végzik (glükóz, zsírok, ásványi anyagok, amelyek az élelmiszerből a vérbe jutnak, befolyásolhatják az enzimreakció sebességét és minőségét);
- az utolsó étkezés és a vérmintavétel közötti különbség elemzéshez legalább 8 óra legyen;
- a tanulmány előestéjén tilos alkoholt fogyasztani és zsíros ételeket fogyasztani, amelynek megszüntetési ideje hosszú;
- a laboratóriumba való belépés előtt egy nap el kell kerülnie az erős fizikai és érzelmi stresszt;
- addig, amíg a vérmintavétel idejét nem ajánljuk dohányozni.
A hamis következtetések elkerülése érdekében az állítólagos páciensnek egy kicsit korábban a laboratóriumba kell jönnie, mint a vér. 15-20 percet vesz igénybe, amikor egy személy elkapja a lélegzetét. Az adrenalin, amely egy gyors séta után jelen van a vérben, befolyásolhatja a vizsgálat eredményét.
Ha az elemzésre kerülő beteg gyógyszert szed, erről értesítenie kell az orvost. Lehetséges, hogy néhányat el kell utasítani egy ideig (ha lehetséges).
A hepatitis C PCR vizsgálatának eredménye
Az elemzést végző laboratórium laboratóriumi orvosának eredményeinek dekódolása. A dekódolás a normából származó eredmény eltérésének meghatározása. A mutatók arányát közvetlenül a vizsgálati rendszer gyártója határozza meg, amelyet a laboratórium diagnosztikai célra használ. Ezért nem meglepő, hogy egyes laboratóriumokban a vírusterhelést IU / ml-ben és másokban másolatokban / ml-ben határozzuk meg.
Miután megkapta a következtetést, szükség van arra, hogy helyesen értelmezze. A vizsgálat eredményeinek kezelését a C-hepatitisben szenvedő beteg kezelőorvosának kell elvégeznie. A beteg objektív, műszeres és laboratóriumi vizsgálata után az orvos megfelelő mennyiségű adatot szerezhet a kapott PCR-eredmények helyes értelmezéséhez.
A kvalitatív elemzés értékelése általában nem okoz nehézséget még a betegeknél sem. Az eredmény csak egy lehet: "észlelt" vagy "nem észlelt". Ebben az esetben a második a norma.
A mennyiségi elemzés mutatóit nehezebb értelmezni. Megmutatja a beteg vírusterhelésének mértékét. Még a hepatológusok körében sem állapítható meg konszenzus a kimutatott virémia kezelésére vonatkozóan. A legtöbb orvos hajlamos arra gondolni, hogy a 8 × 10 * 5 NE / ml-nél nagyobb terhelést kell figyelembe venni. Az 1 × 10 * 7 IU / ml-nél nagyobb terhelés nagyon magasnak tekinthető, míg az alacsony terhelés kisebb, mint 4 × 10 * 5 IU / ml.
A vírusterhelés mértéke a vírus virulenciáját (agresszivitását) jelzi: minél nagyobb a vér mennyisége, annál gyorsabban alakulhat ki a máj szövődménye. A magas vérkoncentráció egy terhes nő vérében növeli annak valószínűségét, hogy a magzatba behatol a hemato-placenta-gáton. A virémia hatással van a kezelés hatékonyságára is: alacsony számban a terápia hatékonysága magasabb, mint a magasaknál.
Annak érdekében, hogy biztosak legyünk a C-hepatitisz PCR-analízisének pontosságában, csak azoknak a laboratóriumoknak kell előnyben részesíteni, amelyek jól bizonyítottak. Az árpolitika ebben az esetben nem játszhat elsődleges szerepet.
PCR diagnosztika használata
A molekuláris biológia polimeráz láncreakciója (PCR) a vírusok kimutatására szolgáló kísérleti módszer. Lehetővé teszi, hogy jelentősen növelje bizonyos nukleinsavfragmensek (DNS) koncentrációját biológiai anyagmintákban, ami lehetővé teszi, hogy meghatározzuk és felismerjük őket.
Az elemzést az alábbiak szerint végezzük. Genetikai anyagot (vérmintát), amely potenciálisan tartalmazhat a kívánt gént, bejuttatjuk a csőbe. A kívánt gén kis hosszúságú kémiailag szintetizált szegmensei is vannak.
DNS-t vagy RNS-polimerázt is adunk az edényhez, és képes egy olyan nukleinsav-láncot felállítani, amely teljesen azonos az eredetivel. A kapott kompozícióban injekciózunk, és négy szabad nukleotid-készletet - egy speciális építőanyagot RNS-nek vagy DNS-nek, amelyek közül az egyik radioaktív foszforrészecskéket tartalmaz.
A kapott elegyet 95–96 ° C-ra melegítjük, ezért két DNS-hélixet, amelyek általában összefonódnak, szőttek. Ezután a gyógyszert lehűtjük, ekkor a primerek maguk kötődnek a vírusgenom kívánt régiójához, megakadályozva az RNS-t (vagy DNS-t) a kettős spirál újraképzésétől.
A hűtés során a polimeráz szabad nukleotidláncot keres. Ennek az enzimnek a működéséhez egyetlen nukleotidláncra van szükség. Mivel a polimeráz a DNS-lánc mentén csúszik (mint egy kötélen lévő gyűrű), nem képes kettős spirálon dolgozni.
Ezután ismétlődő fűtési ciklust hajtanak végre, amely a nukleotidláncokat elkülöníti. Ezen PCR-ciklusok mindegyikében a kívánt hepatitisz gén mennyisége exponenciálisan növekszik, és a genetikai anyag többi része lineárisan termel (növekszik).
Az oldat nukleotidmaradékoktól való tisztítása és a DNS-láncok elektroforézissel történő elválasztása a molekulatömeg-paraméter segítségével könnyen meghatározható, hogy a vizsgált mintában van-e kívánt gén.
A PCR előnyei
A PCR segítségével végzett laboratóriumi vizsgálatok lehetővé teszik, hogy még több információt kapjunk, mint a RNS vírus jelenléte. A radioaktív sugárzás szintjének meghatározásával megállapítható, hogy a vizsgált minta eredetileg mennyi genetikai anyagot tartalmazott. A hepatitis esetében határozza meg a vírusterhelés mértékét.
A módszer másik előnye a CR-reakció nagyon magas érzékenysége. Ez sokkal magasabb, mint a vírusok felderítésének klasszikus módszerei. Ideális esetben a kívánt gén azonosításához a PCR esetében a mintában csak egy vírus elegendő.
Ezenkívül a PCR teljesen specifikus. Alapozói úgy vannak kialakítva, hogy teljesen megfeleljenek a kívánt gének egyedi régióinak, amelyeknek nincs más szekvenciája. Az ujjlenyomatokhoz hasonlóan minden gén egyedi nukleotidszekvenciákat tartalmaz.
A PCR kvalitatív elemzése
A kvalitatív elemzés csak a vírus jelenlétét mutatja a vérben. Ezt a vizsgálatot minden olyan beteg esetében el kell végezni, akinek a C-hepatitisz elleni antitesteket találtak a vérben, és csak két értéket eredményezhet: „észlelt” vagy „nem észlelt”. Egy egészséges embernél a normát (referenciaérték) „nem kell észlelni”.
A kvalitatív kutatás ilyen eredményeit külön értelmezzük:
- Az eredmény "észlelhető". Ez azt jelenti, hogy a vizsgált biológiai anyagból vett mintában megtalálható a hepatitis C vírusra specifikus RNS fragmense, ezért tény, hogy a beteg hepatitis C vírussal fertőzött. és ebben az időben új májsejteket fertőz a szervezetben.
- Az eredmény "nem észlelhető". Az ilyen ítélet azt jelzi, hogy a laboratóriumban kapott biológiai anyag elemzett mintájában nem találtunk olyan RNS fragmentumot, amely specifikus a C-hepatitis vírusra.
A hepatitis C vírus RNS akut fázisában a PCR módszerrel végzett ilyen kvalitatív vizsgálatok már a test fertőzése után 1-2 héten belül kimutathatók, azaz hosszú ideig a hepatitis elleni antitestek megjelenése előtt.
E vizsgálat megbízhatatlan vizsgálati eredményei a következők:
- szennyezett biológiai anyag;
- a heparin jelenléte a beteg vérében;
- a PCR különböző komponenseit befolyásoló kémiai vagy fehérjék (gátlók) jelenléte a mintában.
A PCR kvalitatív elemzéséhez nincs szükség a beteg speciális előkészítésére a vizsgálathoz. Az alkalmazott anyag vénás vér.
Az eredmények értékelése
A kiváló minőségű PCR-vizsgálatok bizonyos fokú érzékenységgel rendelkeznek, és a kutatás pontosságától és a laboratóriumi felszerelések szintjétől 10-500 IU / ml lehet.
Ez azt jelenti, hogy ha a vérmintában lévő vírus nagyon alacsony koncentrációban van (kevesebb, mint a laboratórium küszöbérzékenységi értéke), akkor a beteg beteg eredményét „nem lehet észlelni”. Emiatt, ha a virémia alacsony szintjével (alacsony víruskoncentráció) végzett PCR kvalitatív elemzését végezzük, például antivirális terápiában részesülő betegeknél, nagyon fontos, hogy ismerjük a diagnosztikai rendszer érzékenységi küszöbét.
A diagnosztikai rendszerek változatai
A virológiai válasz szabályozásához ajánlott legalább 50 NE / ml érzékenységi küszöbértékű diagnosztikai rendszereket használni a vírusellenes kezelés során. Ezek a kritériumok teljesülnek például a Cobas Ampicolor HCV-teszt elemzőkkel (50 IU / ml pontossággal), valamint a RealBest HCV RNS-sel (15 IU / ml érzékenységgel).
A WHO ajánlása szerint a hepatitis C végleges diagnózisának megállapításához csak a C-vírus RNS háromszoros kimutatására van szükség a beteg szérummintáiban, más hepatitisz markerek hiányában.
A PCR-módszereken kívül TMA-vizsgálatot (transzkripciós amplifikációs módszer) is alkalmazunk a HCV RNS kimutatására a betegekben. A legjobb érzékenységi küszöb (5–10 NE / ml), de hazánkban ez a vizsgálati módszer még nem nagyon gyakori.
Az észlelt vírusmódosítások tartománya
A Hepatitis C vírus RNS jelenlétének szérumában ez a kvalitatív meghatározás lehetővé teszi számos vírus genotípusának meghatározását. Jelenleg a tudomány több, mint hat e vírus genotípusát, valamint a betegség mintegy 10 altípusát ismeri.
Hazánkban a közös vírusok 1, 2, 3 genotípusok. A laboratóriumok a következő genotípusokat képesek felismerni: 1a és 1b, 2a, 2b és 2c, valamint 3, 4, 5a és 6 altípusoktól függetlenül. Minden vírusmódosítás esetében a kimutatási specifitás 100%.
PCR kvantitatív elemzés
Kvantitatív PCR-vizsgálattal meghatározzuk a hepatitis vírus koncentrációját a vérmintákban (vírusterhelés). Ez a virémiai teszt (vírus koncentráció) lehetővé teszi, hogy meghatározzuk egy bizonyos genetikai anyag egységeinek számát (a vírus RNS-t), amely egy bizonyos mennyiségben kimutatható. Ebben az esetben a koncentrációt 1 ml-ben határozzuk meg, amely 1 cu-nak felel meg. cm.
Az elemzés kvantitatív paramétereit ábrákban fejezzük ki, ebből a célból mérési egységként milliliterenként (NE) nevezett nemzetközi egységeket (IU) használunk. Most, néhány laboratóriumban, a vírus mennyiségét más egységekben is meg lehet határozni: a példányszámot ml-ben másolatokként / ml-ként jelezzük.
- Dátum A hepatitis C esetében a PCR ilyen kvantitatív elemzése közvetlenül a kezelés megkezdése előtt történik. Ezután az 1., 4., 12. és 24. héten. A 12. héten végzett értékelés indikatív, lehetővé teszi a terápia hatékonyságának meghatározását.
- Előkészítés az elemzéshez. A PCR kvantitatív elemzéséhez nem szükséges a beteg speciális előkészítése a vizsgálathoz. A mintavétel előtt fél órával ne dohányozzon. A vénás vért laboratóriumi anyagként használják.
Az eredmények értékelése
Különböző laboratóriumi vizsgálati rendszerek esetében ennek a mutatónak különböző konverziós tényezői vannak IU / ml-ben. Átlagosan a konverziós paramétert veszik fel, amelyben 4 másolat / ml = 1 NE / ml. Például, ha a laboratórium PCR-analízis eredményét 2,4 * 106 példány / ml, akkor ezt a paramétert 4-re kell osztani, és 6 x 105 NE / ml-t kapunk.
A 800 000 IU / ml-es terhelés magasnak tekinthető, ami nagyjából megfelel 3.000.000 példány / ml-nek. Néhány szerző szerint az alacsony virémia megfelel a 400 000 NE / ml alatti kvantitatív PCR paramétereinek.
A mennyiségi vizsgálat eredményeként a végeredmény nem digitális érték formájában, hanem a „mérési tartomány alatt” vagy „nem észlelhető”.
- Értékelés: "a mérési tartomány alatt". Ez azt jelzi, hogy a kvantitatív teszt nem sikerült kimutatni a hepatitis C vírus RNS-t, azonban a vírus nagyon alacsony koncentrációban van jelen a szervezetben. Ezt bizonyítja a további minőségi teszt, amely megerősíti a vírus jelenlétének tényét.
- Értékelés: nem észlelhető. Ez az eredmény azt jelzi, hogy a kvantitatív teszt nem található a minta RNS vírusában.
A vírusterhelés paramétere elsősorban a betegség fertőzőképességének mértékét, a beteg "fertőzőképességének" szintjét határozza meg. Minél nagyobb a páciens vírus koncentrációja, annál nagyobb a valószínűsége annak, hogy továbbadja azt más embereknek. Például egy beteg emberrel való szexuális kapcsolat során vagy függőlegesen. Ez a mennyiségi mutató segít a beteg kezelésének hatékonyságának meghatározásában is.
A CCP kvantitatív elemzése fontos a vírusellenes kezelés szempontjából, annak sikerességének értékelése és a kurzus időtartamának megtervezése. Tehát a kezelés gyors reagálásával és a virémia alacsony fokával a kezelés időtartama csökkenthető.
Ha a kvantitatív PCR paraméter lassan csökken, az antivirális terápiát ki kell terjeszteni vagy módosítani kell. Ha a vírusterhelés szintje alacsony, akkor ez a terápia kedvező tényezője, ha megemelkedik, akkor az alkalmazott módszer hatástalan, és a gyógyszereket vagy azok alkalmazási módjait módosítani kell.
A hepatitis C PCR kvalitatív és kvantitatív elemzése: negatív, pozitív, transzkriptum
A hepatitis C egy vírusos májbetegség, amelyet a flavivírus HCV (az angol hepatitis C vírusból) okoz, amelynek szerkezete ribonukleinsavmolekulát (RNS) tartalmaz. Az RNS a vírus genetikai kódját hordozza. Jelenléte lehetővé teszi a hepatitis C PCR vizsgálatát.
A HCV veszélye egy személyre abban a tényben rejlik, hogy az úgynevezett szerológiai ablak (a fertőzés és az immunrendszerből származó reakció megjelenése közötti idő) elég hosszú lehet - több hét és hat hónap között.
Nem érzékeli a fertőzést és nem kezdi meg időben a kezelést.
A szervezet egyedi jellemzőitől függően a HCV hordozója akut formában jelentkezhet, valamint krónikus betegségként jelentkezhet, amely hosszú és drága kezelést igényel. A HCV elleni antitestek kimutatására laboratóriumi vizsgálatok sorozata, köztük a hepatitis C PCR-je. Ez a vizsgálat minden olyan személyre vonatkozik, akiknél a HCV-vel szembeni antitestek találtak.
Mi a PCR-elemzés?
A hepatitis C PCR-jének laboratóriumi vizsgálata - biológiai anyag vizsgálata a flavavirus jelenlétének azonosítására.
A polimeráz láncreakció (ahogy a rövidítés jelöli) mutatja a test vírus károsodásának mennyiségi értékét, annak minőségi jellemzőit, valamint az RNS-t tartalmazó vírus genotípusát.
Alapján, valamint a további elemzések alapján meghatározzák a terápia módját és időtartamát, valamint a járványtani tényezőt (a másik hordozóra történő átvitel kockázata).
Mi az a hepatitis C RNS-elemzés?
A hepatitis C PCR-t RNS-elemzésnek is nevezik (HCV RNS), mivel A flavavírus RNS-részecskéket tartalmaz 30-60 nm virionmérettel. Ennek a mikroorganizmusnak az egyik jellemzője a mutációk nagy hajlama.
A vírus minden alfaja (genotípusa) eltérő rezisztenciával rendelkezik, ami különböző kezelési módszereket és a beteg további prognózisának jellegét okozza.
A biológiai anyagot (vénás vért) üres gyomorban adják meg, és általában a Real-Time PCR módszerrel tesztelik (rendkívül érzékeny valós idejű diagnosztika, alacsonyabb detektálási határérték 15 IU / ml, zárt automatizált rendszerekkel).
Vannak más tesztek is, például a COBAS AMPLICOR 50-100 NE / ml érzékenységgel. Bármely laboratóriumi vizsgálathoz fontos az érzékenységi küszöb, azaz a reagens azon képessége, hogy kimutassa a vírus minimális koncentrációját a biológiai anyagban.
A hepatitis C analízisének típusai PCR-rel
A hepatitis C PCR három fontos komponenst tartalmaz:
- minőségi elemzés;
- mennyiségi elemzés;
- genotipizáláshoz.
Ezek a vizsgálatok meghatározhatják a virémia természetét, valamint a kórokozó genetikai jellemzőit. A diagnosztikai rendszer érzékenységétől függően a vizsgálatot egyszer végezzük el, és néha egy második tesztet végezünk egy érzékenyebb reagenssel az eredmények megerősítésére vagy finomítására.
Kiváló minőségű PCR hepatitis C
A Hepatitis C PCR analízis a polimeráz láncreakció analízisének másik általános neve. A teszt standard érzékenysége, amely lehetővé teszi a vírusos elváltozások kimutatását, 10-500 IU / ml tartományban van.
A C-hepatitis negatív PCR-elemzése azt mutatja, hogy a vírus koncentrációja a beteg vérében a diagnosztikai rendszer érzékenységi küszöbértéke alatt van.
Ha a jó minőségű PCR a "nem észlelt" választ adott, akkor a későbbi kezeléshez fontos a reagens érzékenységének küszöbértéke.
A flavavírus fehérje frakciói sokkal később jelentkeznek.
C-hepatitis Kvantitatív PCR
A hepatitis C PCR mennyiségi mutatója a vírusterhelésnek, amely a testben a flavavírus RNS-koncentráció szintjét tükrözi. Ez egy olyan mutató, amely megmutatja, hogy a vírus RNS töredékei hány centiméterben vannak a vérben. A hepatitis C RNS PCR-jének eredményeit a hagyományos rendszerben kvantitatív vizsgálatban nemzetközi egységben, milliliterben (IU / ml) jelezzük, és különböző módon rögzíthetjük, például 1,7 millió vagy 1,700.000 IU / ml.
A hepatitis C mennyiségi PCR-diagnosztikáját a vírusellenes terápia megkezdése előtt, a kezelés 12. hetében pedig a HCV-vel való kezelés eredményeinek értékelésére írják elő. A vírusterhelés lehetővé teszi a betegség három fontos mutatójának meghatározását:
- fertőzőképesség, azaz a vírusátvitel kockázatának mértéke az egyik hordozóról a másikra (minél nagyobb a flavavírus RNS koncentrációja, annál nagyobb a valószínűsége annak, hogy egy másik személyt fertőzzenek, például szexuális kapcsolaton keresztül);
- a kezelés módszere és hatékonysága;
- az antivirális terápia időtartama és prognózisa (minél nagyobb a vírusterhelés, annál hosszabb a kezelés).
A hepatitis C mennyiségi PCR-diagnosztikája a laboratóriumi vizsgálat típusától és az érzékenység küszöbétől függ. A norma alsó határa 600 000 IU / ml-ig terjedő mutatónak tekinthető, az átlagérték 600 000-700 000 IU / ml tartományban van. A 800 000 NE / ml és annál nagyobb eredményeket az RNS-t tartalmazó vírus magas szintjeinek tekintjük.
genotipizáláshoz
A HCV természetbeni magas mutációs aktivitása miatt a vizsgálat során fontos meghatározni, hogy mely vírus genotípus a beteg vérében van. Összességében a hepatitis C vírus 11 genotípusát rögzítették a bolygón, amelyek sok alfajt (altípus) tartalmaznak. Az Orosz Föderáció területén 1,2 és 3 volt.
A hepatitis C PCR RNS és a genotípus meghatározása az elemzés nagyon fontos eleme lehetővé teszi az orvos számára, hogy meghatározza a vírus ellenállását (rezisztenciáját), kiválassza a megfelelő gyógyszereket és előírja a kezelés lefolyását.
A genotipizálás lehetővé teszi a máj állapotának közvetett meghatározását is. Például a HCV 3 genotípusát gyakran kísérik a steatosis, amelyben a zsír a szerv sejtjeiben halmozódik fel.
A hepatitis C-hez kapcsolódó PCR-vérvizsgálatnak olyan értéket kell adnia, amely meghatározza a genotípust. A laboratóriumi válaszok azt mondhatják, hogy „nem gépeltek” - és ez azt jelenti, hogy egy vírus emberi vérben van, amit a vizsgálati rendszer nem érzékel. Ez azt jelezheti, hogy a genotípus nem jellemző egy adott földrajzi területre. Ebben az esetben meg kell ismételni az elemzést a diagnosztikai rendszer nagyobb érzékenységével.
A hepatitis C PCR-analízisének dekódolása
A hepatitis C PCR kvantitatív dekódolásának vizsgálata a fenti adatokon alapulhat. A laboratóriumi vizsgálatok eredményeinek megszerzése során a következő adatokat általában írják:
- „Talált” / „nem található” (magas minőségű PCR a hepatitis C esetében);
- az RNS-t tartalmazó frakciók száma, például 831,680 ME / ml (kvantitatív PCR-analízis);
- az a szám, amely meghatározza a HCV genotípusát, például - 1, 2, 3, 4;
- A teszt neve leggyakrabban valós idejű.
A hepatitis C-re vonatkozó PCR-elemzés megfejtésében a legfontosabb dolog a második tétel, amely a vírusterhelést mutatja, amely meghatározza a kezelés prognózisát, módját és időtartamát.
Ha a C-hepatitis PCR-vizsgálata negatív, és az ELISA pozitív - mit jelent ez?
A laboratóriumi vizsgálatok megfejtéséhez fontos, hogy kapcsolatba lépjen egy hepatológussal vagy egy fertőző betegség szakértőjével, aki a diagnosztikai rendszer típusával és érzékenységi küszöbével összhangban meg fogja magyarázni a kapott információkat. Az orvosi gyakorlatban sok olyan vérvizsgálat adata van, amely félrevezetheti az orvosi oktatás nélküli személyt.
Például, ha a hepatitis C PCR vizsgálata negatív, és az ELISA pozitív, akkor ez azt jelenti, hogy a beteg vérében jelenleg nincs HCV, de korábban már hepatitis C akut formája volt. Úgy gondoljuk, hogy egy pozitív enzimhez kötött immunoszorbens vizsgálat (ELISA) azt mutatja, hogy vannak olyan antitestek a vérben, amelyek a vírus behatolása után keletkeztek. A modern orvosi gyakorlatban azonban az ELISA-elemzés nem elég megbízható és gyakran nem-tipikus eredményeket ad, így az orvosok elsődleges szűrésként használják. A betegség diagnosztizálása során a szakembereket pontosan a PCR tesztek vezérlik.
Hasznos videó
A következő videó nagyon részletes és érdekes módon mutatja be, hogy mi a PCR-módszer lényege, hogyan történik az elemzés:
következtetés
A hepatitis C PCR-jének elemzéséhez általában vénás vért veszünk. Leggyakrabban a biológiai anyag kettős bevitele történik - az ELISA-hoz és közvetlenül a PCR-vizsgálathoz. A helyes vizsgálati eredmények érdekében a biológiai anyagok laboratóriumi gyűjtésére vonatkozó alapvető szabályok betartása szükséges:
- az analízishez szükséges vér a nap első felében üres gyomorban történik;
- az étkezés és a vérgyűjtés között legalább 8 órát kell tartania;
- Az alkohol és a sült ételeket szintén ki kell zárni a vizsgálat megkezdése előtt.
- a véradást megelőző napon szükség van a nagy fizikai terhelés elkerülésére.
A vérvizsgálati eredmények általában másnap készülnek.