ELISA vírusos hepatitisz esetén

2017. március 9., 16:25 Szakértői cikkek: Nova Vladislavovna Izvochkova 0 3,608

A vírusos hepatitis a szervezetben történő kimutatására az orvostudomány széles körben használ egy enzim immunoassay-t, amely az antitestek és enzimek felhasználásával történő antigének koncentrációjának és típusának kimutatásán alapul. Ezt fokozatosan, laboratóriumi kutatással, nagy pontossággal végzik. Az antitestek mennyiségétől és osztályától függően az ELISA-t alkalmazó enzim színe és koncentrációja, és ennek következtében az orvos diagnosztizálja a betegséget, változásokat okoz.

Mi az ELISA?

A vírus hepatitisz jelenlétét a beteg testében szerológiai vérvizsgálati módszerrel határozzuk meg a HCV vírus és a markerek (testek és antitestek) jelzésére. Az enzimhez kötött immunoszorbens vizsgálat (ELISA) különböző vírusokat, kis molekulatömegű vegyületeket, makromolekulákat, azok kvalitatív és kvantitatív indikátorait vizsgálja, a reakció antigénjeikre való megnyilvánulásával. Ehhez használja az enzimet a jel regisztrálásához. Gyakran alkalmazzák az orvostudományban, mivel az ELISA egyértelműen jól meghatározott antigéneket talál, anélkül, hogy megzavarná őket másokkal, nagy érzékenységgel rendelkezik a vírus hepatitisbe való invázió jelenlétére.

Az ilyen diagnózis hátránya, hogy nem képes azonosítani a betegség okát, mivel a módszer csak a szervezet immunrendszerének reakcióját jelzi. Az elemzés eredményeit befolyásolja a korábban végzett vakcinázás. 8 órával az elemzés előtt ajánlott tartózkodni az étkezéstől, nikotintól, alkoholtól. Az ELISA-vizsgálat alapja a szervezet enzimatikus és immunválaszai a vírusra. A biológiai molekulák kötődnek a sejthez és annak elemeihez, mikroorganizmusokhoz, kimutatják a vírust, majd olyan enzimeket dolgoznak ki, amelyek lehetővé teszik, hogy az immunválaszt egy látható és mérhető paraméterben fejezzék ki.

Az elemzésre vonatkozó jelzések

A szervezetben lévő vírusos hepatitisz rákot és májcirrózist okozhat. Az időszerű diagnózis fontossága vitathatatlan. A diagnózis elsődleges módszere az ELISA teszt, amely nagy pontossággal meghatározza a HCV vírus (IgM és IgG) jelenlétét és nyomelemek aktivitását. Kötelező tesztek a vírusos hepatitis áthaladásához:

1. Kockázati csoportokkal rendelkező személyek (drogfüggők, AIDS-es emberek, orvosi és bűnüldöző intézmények alkalmazottai).
2. Akut vagy krónikus hepatitisben szenvedők.
3. Terhes és terhes nők.

Az ELISA felismeri a betegséget bármely szakaszban. Az elemzés eredményei átlagosan 2 napon belül elkészülnek.

Az elemzés fontosságát meghatározó kritériumok

Az ELISA teszt meghatározza az IgG, IgM, IgA osztályú antitestek jelenlétét. A vírus hepatitis diagnosztizálásakor az orvos nem figyeli a típusukat, mivel a HCV-vírus ilyen megnyilvánulásának jelenléte már jelzi a betegség akut vagy krónikus stádiumát. A betegség korai szakaszában az IgM szintje emelkedik (a fertőzés után 5 nappal); a 15. - 20. napon IgG antitestek jelennek meg, és az emberi vérben a gyógyulás után is sokáig maradhatnak; IgA - 10-14 nap után jelenik meg, a kezelés után csökken.

Ha az IgG-t és az IgA-t a gyógyszerek alkalmazása után észlelik, és azok szintje ugyanazon a sebességen marad - a hordozó krónikus hepatitiszformája van. A vizsgálat fontos kritériuma a rendelkezésre álló antitestek osztályának és mennyiségének egyértelmű meghatározása. Mindezek alapján nemcsak a betegség jelenlétéről, hanem a fejlődés szakaszáról is tudhatunk. Az ilyen elemek felismerése a beteg vérében lehetővé teszi a megfelelő és időben történő kezelés előírását a súlyosabb következmények megelőzése érdekében.

Hogy történik?

Közvetlen és nem közvetlen ELISA-vizsgálatot kell rendelni. Közvetlen szakaszok:

1. A biológiai anyagok gyűjtése és speciális lyukakba helyezése.
2. 15-30 percen belül az antigének a kutak felületéhez vannak kötve.
3. Antitestek hozzáadása a kutakhoz a talált antigénhez. Minden 1-5 órán át maradt.
4. Távolítsa el a nem csatlakoztatott antigéneket (a lyukak tartalmát).
5. Öblítse ki a lyukakat egy speciális megoldással.
6. Adjunk hozzá enzimoldatot a lyukakhoz. Hagyjuk 30 percig - 1 óra.
7. A kolorimetria alkalmazása (a szín kimutatása és a kút tartalmának színe koncentrációja, összehasonlítva a vírus koncentrációjával közvetlenül arányos mutatókkal).

A közvetett ELISA diagnosztizálásához való alkalmazás pontosabb eredményt ad.

A közvetett ELISA módszer a jelzett antitestek alkalmazásával történik a talált antigének és a későbbi jelzett vegyületek hozzáadásával. Először is, a vért a betegből veszik, és 15-30 percig terjednek át a kutakon. (az antitestek lyukakkal vannak rögzítve). Ezután a jelöletlen antitesteket 1–5 órán át bejuttatjuk (az antitestek antigénekkel való összekapcsolódása - az immunrendszer komplexe). Ezután a nem csatolt mikroelemeket öntjük a kutakból, és speciális oldattal mossuk. A következő szakaszban a laboratóriumi technikus 15-30 percig a kútba jelölt nyomelemeket ad. (ez a jelzést nem jelöli a "antitest-antitest-antigén" komplex képződésével. Az ürítés és a mosás során az extra (laza) újra eltávolításra kerül. Ezután az enzim 5-30 perc alatt megváltoztatja a színt. a lyukakban és a színadatokban tárolt adatok összehasonlítása a táblázatmutatók adataival történik. A közvetett ELISA pontosabb.

Mit mutat az ELISA vírusos hepatitisz?

Az ELISA lehetővé teszi a fertőzés jelenlétének kimutatását (mindenféle hepatitis vírus, HIV, herpesz, szifilisz, citomegalovírus, kanyaró, rubeola, mumpszvírus, Epstein-Barr vírus), az autoimmun betegségek, a rákos sejtek markere. A reproduktív funkciók megsértését jelzi (a tesztoszteron, a prolaktin, az ösztradiol és a progeszteron változásai), a pajzsmirigy meghibásodása, a bélféreg fertőzése, a chlamydia. Hatékony az ureaplasmosis, a kopasz köhögés, a Dange vírus, a Nyugat-Nílus vírus, Borrelia kimutatására. A definíciók listája magas, számos elemet tartalmaz.

Az eredmények megerősítése

A HCV vírus antigén meghatározása ELISA-val 98% -os pontosságú. Azt is használják, hogy a biológiai anyagot fuzzy korábbi mutatókkal újra teszteljék. Az IgM antigének jelenléte nem jelzi az akut hepatitist, és további kutatást igényel. Az ELISA-teszt ismétlése esetén az eredmények 90–100% -kal esnek egybe. Minimális eltérés esetén az átlagértéket indikátornak tekintjük. Az orvosok maximális pontossága érdekében a vér biokémiai elemzését egyidejűleg javasoljuk. Az enzim immunoassay után végzett eredmények teszteléséhez más diagnosztikai módszereket is használhat.

Vírus hepatitis kutatása az ife módszerével

ELISA a vírus hepatitis diagnózisában. Enzim immunoassay képességek

A vírus hepatitis specifikus laboratóriumi diagnózisa az immunokémiai és molekuláris biológiai kutatási módszereken alapul. A legfontosabb immunokémiai módszerek a radioizotóp vagy a radioimmun (RIA) és az immunvizsgálat (ELISA). Az immunokémiai diagnosztikai módszerek egy antigén - egy antitest specifikus kölcsönhatásán alapulnak, és a komplex későbbi azonosításával speciális címkék segítségével. A leggyakoribb enzim immunvizsgálat.

Az első jelentés az enzim immunoassay használatáról. az anyag meghatározásának módszerét 1971-ben egyidejűleg két kutatócsoport - V. Van Weemen, A. Schuurs és E. Engvall, P. Perlmann - tette közzé. Az enzim immunoassay a következő elven alapul: szilárd fázisban, amely főleg a polisztirol tabletta üregeinek felületét használja, a fertőző ágens vagy antitest antigénje (gyakran antitestek keveréke) a kimutatható antigénekhez rögzítve van. Ezt az antigént vagy antitesteket, amelyek a szilárd fázisra vannak rögzítve, immunoszorbensnek nevezzük.

Az immunoszorbens és a teszt szérum egy kimutatható hatóanyag jelenlétében történő inkubálásának eredményeként az antigén-antitest komplexhez kötődnek. A mosási eljárás után, amely során a kötetlen antigéneket és antitesteket eltávolítjuk, inkubálást végzünk a konjugátummal. A HBsAg kimutatására szolgáló konjugátumként anti-HBs-t használnak, a hepatitis C vírus elleni antitestek kimutatására - a humán immunglobulinok elleni antitestek (víruskonjugátum), amelyeket torma peroxidázzal jelöltek. Az inkubálás eredményeként a már meglévő antigén komplexekhez való kötődés következik be - a hozzáadott konjugátum antitestje. A nem kötött konjugátum (mosás) eltávolítása után a szubsztrátot behelyezzük a lyukakba. Peroxidáz konjugátum alkalmazásakor hidrogén-peroxidot használunk szubsztrátként egy indikátorral kombinálva, amelyet leggyakrabban ortofenilén-diamin (OPD) vagy tetrametil-benzidin (TMB) használnak. Az eredményt fotometriásan becsüljük.

Az enzim immunoassay módszer analitikai képességeinek minőségét és megbízhatóságát számos kritérium jellemzi, amelyek magukban foglalják az érzékenységet, a specifitást, a pontosságot és a reprodukálhatóságot.

Az érzékenység az anyag minimális mennyisége, amelyet enzim immunoassay segítségével lehet kimutatni. Ebben az esetben a módszer érzékenységének alsó határa a vizsgált anyag koncentrációja a mintában, amely megfelel a meghatározás legkisebb pozitív eredményének, ami statisztikailag szignifikánsan különbözik a szándékosan negatív minták mutatóitól. Az IFTS érzékenysége számos olyan körülménytől függ, amelyek mind a tesztrendszer tervezéséhez kapcsolódnak (az immunoszorbens affinitása, az extrakciós és pufferrendszerek minősége), mind a regisztrációs módszer felbontása és pontossága.

Specifitás - azon képesség, hogy pontosan meghatározzuk azokat az összetevőket, amelyek meghatározásához az enzim immunvizsgálatot tervezték. Az ELISA specifitását nagymértékben meghatározza az antitestek vagy antigének (azaz immunoszorbensként használt készítmények) keresztreakciója szorosan kapcsolódó vegyületekkel, valamint az inkubációs közeg összetétele (mátrixhatás).

Helyesség - ugyanazon kontrollminta ismételt meghatározása eredményeinek átlagértékének a mért paraméter valós értékével való összevetése. Az ELISA-ban a meghatározás pontossága a vizsgálati rendszer és a kontrollminta minőségétől függ. Jó immunológiai vizsgálati rendszerek esetén a korrekciós mutatók 90-110% tartományban vannak. Az ELISA-ban végzett biomedicinális kutatás sajátossága az, hogy a pontos értéket nem lehet megállapítani, ezért több szakértő laboratórium átlagát tekintik az igazi értéknek. A helyesség statisztikai kritériuma az aritmetikai átlag és a valóságtól való eltérés mértéke, százalékban kifejezve.

Reprodukálhatóság - a vizsgálati rendszer azon képessége, hogy ugyanazt az értéket mutassák ugyanazon minta ismételt vizsgálataival. A reprodukálhatóság függ a véletlenszerű hibáktól (hibáktól) a reakció beállítása során, valamint a vizsgálati rendszerek minőségétől és az eredmények rögzítésének pontosságától. Úgy gondoljuk, hogy ugyanazon vállalat azonos ellenőrzési mintáinak reprodukálhatósága különböző laboratóriumokban nem haladhatja meg a 15% -os variációs együttható értékét.

A vírusos hepatitis markerek meghatározására számos specifikus ELISA-eljárás létezik: a) közvetlen enzim immunoassay; b) közvetett enzim immunoassay; c) versenyképes gátlás; c) „csapda” vagy „elfogási” módszer.

A vírus hepatitis diagnosztizálására szolgáló molekuláris biológiai módszerek közül a polimeráz láncreakció és a hibridizáció gyakoribb. Ezek a módszerek, különösen a PCR, lehetővé teszik a nagyon kis mennyiségű specifikus vírus DNS vagy RNS kimutatását, és így a bíráló replikációját, és bizonyos esetekben a replikációs aktivitást.

Hepatitis C vérvizsgálat

A hepatitis C az egyik leggyakoribb májbetegség, amely a hepatitis C vírussal (HCV) fertőzött, amely a szervezetbe kerül, elsősorban a fertőzött személy vérével érintkezve. Krónikus és akut hepatitisz C-ben találkozunk, az akut hepatitis C-ben szenvedő betegek 70-80% -ában nincsenek a betegség tünetei, csak bizonyos esetekben, a fertőzés után egy bizonyos idő elteltével a betegség megnyilvánulása, amely fáradtság, hasi fájdalom, étvágytalanság, sötétség vizelet, hányás, hányinger, széklet, sárgaság, ízületi fájdalom. A tünetek általában a fertőzés után 6-7 héttel fordulnak elő, de a betegség jeleinek kezdete 2 hét és hat hónap között változik. Ha a fenti tünetek előfordulnak, konzultáljanak egy fertőző betegséggel foglalkozó orvosral, és vérvizsgálatot kell végezniük a hepatitis C-re. A hepatitis időben történő diagnosztizálása a betegség korai stádiumában kimutatható, és jelentősen növeli a gyógyulás esélyeit.

Ha hepatitis C tesztet terveznek

Olyan helyzetek, amikor C-hepatitisz teszt szükséges:

• terhesség és családtervezés során;
• krónikus vagy akut hepatitis tüneteit mutató betegek;
• a személy veszélyben van. Ezek az egészségügyi dolgozók, a börtönben lévő személyek, a bűnüldöző szervek tisztviselői, a kábítószer-használók, sok szexuális partnerük, AIDS-jük, hemodialízisük és mások.

A hepatitis C analízis előkészítése

A hepatitis C elemzéséhez nem szükséges speciális előkészítés. Az elemzéshez vért veszünk egy vénából üres gyomorban, ugyanakkor legalább az utolsó étkezés után legalább nyolc óra kell eltelnie.

Hepatitis C ELISA tesztek

Az első elemzés, amelyet általában a hepatitis C - ELISA vizsgálat diagnosztizálására írnak elő (enzimhez kötött immunoszorbens vizsgálat). A Hepatitis C ELISA vizsgálata lehetővé teszi a hepatitis C vírus (anti-HCVAb) elleni antitestek kimutatását a vérben. Ha az ELISA-teszt eredménye pozitív, akkor a szervezet a hepatitis C vírussal való érintkezését jelzi, de a pozitív ELISA-val rendelkező emberek 40% -a nem észleli a vírust a vérben. Ezt a jelenséget hamis pozitív eredménynek nevezik. Az ELISA segítségével a donorvér is ellenőrizhető.

A hepatitis C RIBA

A hepatitis C RIBA analízisét a pozitív ELISA eredmény megerősítésére használjuk. A rekombináns immunoblot módszer (RIBA) pontosabb vizsgálata a hepatitis C vírus elleni antitestek jelenlétéről A hepatitis C vírus jelenléte a szervezetben szintén nem határozza meg a pozitív eredményt, hanem csak az antitestek jelenlétét igazolja.

Hepatitis C PCR vizsgálatok

A hepatitis C vírusok jelenlétének kimutatására a vérben (HCV RNS) és a diagnózis elkészítésére leggyakrabban a polimeráz láncreakció (PCR) módszerét használják. Ez a tanulmány lehetővé teszi, hogy nagy pontossággal észleljük a vírus jelenlétét a vérben. A hepatitis C PCR-analízise a vírus jelenlétét már 5 nappal a fertőzés után, az antitestek megjelenését megelőzően felfedheti. Amikor a PCR-analízis eredménye pozitív, az aktív fertőzés jelenlétét jelenti.

Ilyen változatok vannak a PCR-elemzésben:

• kvantitatív PCR, amely lehetővé teszi nem csak a vírus jelenlétének tényét, hanem a vírusterhelést (a vírus mennyiségét). Ez a mutató nagy jelentőséggel bír a kezelés hatékonyságának meghatározásában;
• a hepatitis C vírus genotípusát meghatározó genotipizálás, amely fontos a kezelés időtartamának és taktikájának meghatározásához. A hepatitis C vírus több mint 10 genotípusa létezik, de a klinikai gyakorlatban elegendő öt leggyakoribb típus meghatározása: 1a, 1b, 2,3a / 3b.

Kvantitatív PCR-analízist végzünk:

• minőségi hepatitis C vírus RNS jelenlétére szérumban;
• a kezelés hatékonyságának pontos értékeléséhez;
• meghatározza a beteg kezelésének taktikáját.

Nincs közvetlen kapcsolat a hepatitis C súlyossága és a vérben lévő vírus mennyisége között. A vírus koncentrációja befolyásolja a betegség fertőzőképességét, azaz minél nagyobb a vírus mennyisége a páciens vérében, annál nagyobb a vírus átvitelének kockázata, például szexuális érintkezés vagy anya és gyermeke között. A kezelés hatékonysága a vírus koncentrációjától is függ. A terápia során a kedvező tényező az alacsony vírusterhelés, és nagyon magas a kedvezőtlen.

A genotípus-elemzés elvégzése:

• minőségi hepatitis C vírus RNS jelenlétére szérumban;
• a kezelés hatékonyságának pontos értékeléséhez;
• meghatározza a beteg kezelésének taktikáját;
• megjósolni a fertőző folyamat krónizálódását;
• meghatározza a betegség progresszióját.

A vírus genotípusának kimutatása nagy jelentőséggel bír a kezelés időtartamának meghatározásához, ami fontos, mivel az interferon széles körű mellékhatásokkal és alacsony betegtűréssel rendelkezik.

A hepatitis C dekódoló elemzése

Normális esetben a vírus RNS, ezek ellenanyagok és antigének teljesen hiányoznak. Az antitestek jelenléte a vérben a krónikus vagy akut hepatitis C jelenlétére vagy a gyógyulási időszakra utal. Ha a vérben HCV RNS van jelen, amelyet PCR-analízissel határoztak meg, ez a vírus jelenlétét jelzi a vérben.

Helytelen vizsgálati technikával, a szállítással és a vér rendellenességekkel párhuzamosan a PCR-elemzés hamis pozitív eredményeket mutathat. Az ELISA és RIBA elemzése a betegség korai szakaszában, amikor a szervezet még nem termelt elegendő mennyiségű antitestet, hamis negatív eredményt mutathat.

Ha a C-hepatitisz vizsgálatának megfejtésekor pozitív eredményeket érünk el, további diagnózis és kezelés érdekében szükség van egy fertőző betegség orvosával és a gasztroenterológussal.

A szegmentált neutrofilek csökkentek

A gyermek vérlemezkék normálisak, emeltek, csökkentek

A pajzsmirigy-stimuláló hormon TGT

Hepatitis diagnózisa

A hepatitis jelenlétét a testben nem lehet azonnal meghatározni, mivel a betegség inkubációs ideje legfeljebb négy hétig tarthat. Amikor a betegség első jelei megjelennek, a vér összetételében radikális változások következnek be az érintett szervezetben: egy biokémiai elemzés súlyos egészségügyi problémát és egy patogén vírus jelenlétét jelzi. A végső diagnózis elvégzéséhez azonban nem elegendő a hepatitisz véradására, valamint a hepatitis részletes diagnózisára.

A hepatitis laboratóriumi diagnózisa

Kívánatos, hogy az inkubációs periódus vége után végezzük el, hogy az orvos a lehető legnagyobb pontossággal meghatározhassa a szervezetben lévő májbetegséget. Ellenkező esetben az előírt kezelés nem adja meg a kívánt terápiás hatást, és még súlyosbítja az uralkodó klinikai képet.

A hepatitis A diagnózisa

A hepatitis A diagnózisa tipikusan a beteg részletes megkérdőjelezésével kezdődik és számos olyan vizsgálat kijelölése, amelyet a lehető leghamarabb végre kell hajtani. Ez a következő:

• biokémiai vérvizsgálat;
• teljes vérszám;
• PCR módszer;
• ELISA;
• véralvadási.

Ha Botkin-betegség előrehalad, akkor a biokémiai vérvizsgálat eredményei alapján megfigyelhető a bilirubin, az AlAT és az AsAT rendellenes ugrása. Továbbá specifikus anti-HAV IgM keletkezik, amelyek a hepatitis A jelenlétének vitathatatlan ténye.
Általában véve a vér elemzését a leukociták csökkenése, az ESR és a limfocitózis ugrása határozza meg. Mindazonáltal a legmegbízhatóbb a PCR módszer, amely meghatározza a patogén vírus RNS indikátorait.
Az orvos továbbá tanulmányozza a betegség tüneteit, majd végleges diagnózist készíthet, és áttörhet a leghatékonyabb terápiára. A műszeres vizsgálat szükségessége rendkívül ritka. A beteg kórházi kezelésének és karanténjának sikeres konzervatív kezelése után a végső gyógyulás várható, és az A hepatitis nem ismétlődik újra.

A hepatitis B diagnózisa

A hepatitis B vírus jelenlétének meghatározása a laboratóriumi vizsgálatok eredményei szerint is lehetséges, és ehhez az első dolog a vér hepatitiszhez való adásához szükséges. A kórokozó vírusnak három fő antigénje van: a HBsAg, a HBcAg és a HBeAg, amelyekhez antitesteket termelnek a szervezetben. Ennek a klinikai képnek a fő jellemzője az ELISA - ELISA, amely csak a hepatitis B specifikus markereit tárja fel.
Közvetlenül tisztázni kell, hogy a HBsAg antigén a hepatitis első tünetei előtt is megjelenik a vérben, és megbízhatóan meghatározható a jeges időszakban. A negatív teszt azonban nem zárja ki a hepatitis B jelenlétét, és ezért egyformán hatékony polimeráz láncreakciós (PCR) módszer alkalmazását igényli.
Ha gyanítja, hogy a hepatitis B kötelező, egy biokémiai vérvizsgálat, amelyet ajánlott az első helyen végezni. A máj biopsziájának és a peritoneális szervek ultrahangának elvégzését egyenként tárgyaljuk, de ha a betegség története nagyon egyértelmű, klinikai vizsgálati módszerekre nincs szükség.

Máj echogram az autoimmun hepatitisben a krónikus hepatitis stádiumában

A hepatitis C diagnózisa

A diagnózis felállításához nem elegendő a vér adása hepatitiszre, mivel a vírus rejtett formában uralkodhat a testben. Mindazonáltal a fő laboratóriumi vizsgálatok mind a fenti elemzések, mind a májbiopszia további teljesítménye. A biológiai anyag mikroszkópos vizsgálata (a mi esetünkben egy májszövet) meghatározza a kóros folyamat és a szöveti fibrózis mértékét. Az anyagmintavétel helyi érzéstelenítés alatt történik, az ilyen eljárások szövődményei rendkívül ritkák az orvosi gyakorlatban.
Ha a hepatitis C gyanúja áll fenn, a klinikai vizsgálat fő módszere a hasüregi szervek ultrahangja. Az ok egyszerű: a betegséget gyakran az érintett máj vizuális változása, szerkezetének és méretének megváltozása jelenti. Így határozhatja meg:

• a máj, a lép, a hasnyálmirigy és az epehólyag mérete;
• patológiás változások ezekben a szervekben;
• általános véráramlás a peritoneális szervekben;
• optimális terület a májbiopszia elvégzéséhez.

Ez a klinikai vizsgálat módszere meghatározza a szerv összes fókuszos patológiáját mikroszkopikus szinten. Ha a máj szürke színben jelenik meg a képernyőn, azonnali biopszia szükséges, mivel a szürke szín megjeleníti az „emberi szűrő” érintett szöveteit.

Hepatitis megelőzés

Mivel a betegség nem nyilvánul meg azonnal, messze van az összes olyan klinikai képtől, amely azonnali kezelésre kerül. A beteg egyszerűen nem tudja tisztában a patogén vírus létezésével a szervezetben, amely viszont gyorsan terjed a véráramba, és megfertőzi az egészséges májsejteket.
Az ilyen tragikus sors elkerülése érdekében ajánlott az összes megelőző intézkedés betartása. Az ilyen éberség jelentősen csökkenti a morbiditás kockázatát és megmenti Önt a jövőbeni súlyos egészségügyi problémáktól. A megelőzés alapvető szabályait az alábbiakban mutatjuk be:

• mossa meg a kezét az utca után;
• magas minőségű feldolgozásra friss zöldségek és gyümölcsök;
• az éves naptártervben meghatározott minden megelőző vakcinázást elvégezni;
• szelektív hozzáállás a szexuális partnerekkel szemben;
• a betegekkel való érintkezés elkerülése;
• csak egyszer használatos fecskendőket használjon, és különösen vigyázzon a vérátömlesztő állomásokra.

Azt is javasoljuk, hogy rendszeresen (hat havonta egyszer) adjon vért a hepatitiszre, hogy megbizonyosodjon arról, hogy a vírus nem jut be a szervezetbe, és nem fertőződik meg az egyszeri egészséges májsejtekkel. Ha a diagnózist meghatározták, akkor azonnal el kell jönnie a szakszolgálati számlára, és követnie kell a szakember minden ajánlását.

Kiadói szerző:
Syropyatov Sergey Nikolaevich
Oktatás: Rostov Állami Orvostudományi Egyetem (Rostov Állami Orvostudományi Egyetem), Gastroenterológiai és Endoszkópiai Tanszék.
gasztroenterológus
Orvostudományok doktora

ELISA módszer hepatitis kimutatására

A modern orvoslás sok májbetegségről ismert. A HCV (vírusos hepatitis C) a leggyakoribb és legveszélyesebb, mivel ez a fertőzés gyakran aszimptomatikusan alakul ki, és kritikus szövődményekhez, még a halálhoz is vezet. Ezért rendkívül fontos a betegség időben történő diagnosztizálása, amelyet különböző módszerekkel végeznek, beleértve az enzimhez kötött immunoszorbens vizsgálatot (ELISA) a vírus ellenanyagainak kimutatására a vérben.

A HCV-fertőzés kimutatása a hepatitis diagnózisában

A hepatitis C (HCV fertőzés) kimutatására szolgáló laboratóriumi diagnosztikában kétféle módszert alkalmaznak:

1. Serológiai, amely a hepatitis C vírus elleni antitestek (anti-HCV) kimutatásán alapul, más néven ELISA (enzimhez kötött immunoszorbens vizsgálat). Célja a szkríneléshez és a hepatitis C diagnosztizálására használt anti-HCV (IgM és IgG markerek) kimutatása. Mindkét markert különböző kombinációkban lehet kimutatni a vérben (plazmában), ami megfelelő klinikai értelmezést igényel. Az anti-HCV jelenlétének megerősítéséhez RIBA (rekombináns immunoblot) tesztet végzünk.
2. Az RNS-vírus kimutatására irányuló molekuláris biológiai. A HCV RNS-tesztet a következő betegcsoportok esetében írják elő:
   • azonosított anti-HCV-vel;
   • nem észlelt anti-HCV-vel, de megállapított epidemiológiai és klinikai adatokkal, amelyek megkövetelik a HCV akut formájának kizárását.

A vírus RNS-je már a fertőzés után 14 nappal kimutatható a vérben, azaz az anti-HCV megjelenése előtt, amely az első 2-3 hónapban jelentkezik.

A diagnózis végleges megerősítéséhez (különösen, ha a HCV-fertőzés két markere közül csak az egyiket észlelik) a szakértők azt javasolják, hogy egy bizonyos idő elteltével ismételt vizsgálatokat végezzenek a HCV-vel és a HCV RNS-sel.

A hepatitis kimutatása ELISA-val

A vírus hepatitisz korai diagnózisának, különösen a tünetmentes, anicterikus formáknak a szérumban történő megvalósításához, vírusfehérjék (antigének) vagy ellenanyagainak jelenlétét (az immunrendszer által termelt vírusok bejuttatása a szervezetbe) enzimhez kötött immunoszorbens vizsgálattal (ELISA) detektáljuk. Ez az immunológiai diagnózis univerzális módszere, amelynek lényege az "antigén-antitest" kölcsönhatásának vizsgálata. A világ számos országában széles körben használják.

A hepatitis ELISA-val történő meghatározása lehetővé teszi nem csak a pontos diagnózis megállapítását, hanem a betegség természetének felmérését, valamint a hagyományos gyógyszerek (interferon, ribavirin), közvetlen hatású gyógyszerek (Sofosbuvir, Daclatasvir) és indiai és kínai termeléssel történő gyógyszeres kezelésének kiválasztását.

Ha lehetséges, az ELISA-val végzett vírusos hepatitis diagnózisát PCR (polimeráz láncreakció) egészíti ki, amely lehetővé teszi a hepatitis vírusok jelenlétének meghatározását az RNS-ben.

Milyen pontos az enzim immunoassay módszer

A szakértői becslések szerint az ELISA-módszer pontossága 95%, azaz 100-ból 95-nél az enzim-immunvizsgálatot használó HCV-antitestek - IgM és IgG - jelenléte és mennyisége kimutatható a vérben. Ha az eredmény pozitív, akkor lehetséges a HCV-vel való érintkezés diagnosztizálása a testtel (nem maga a vírus, nevezetesen a vérben lévő antitestek jelenléte, ami a már átvitt betegség eredménye).

Azonban az enzimhez kötött immunoszorbens vizsgálat (ELISA) nagy érzékenysége ellenére a pozitív eredmény 40% -ánál a vírus nem észlelhető, ami kétséges vagy hamis pozitív eredményt mutat.

Az ELISA-eredmények helyességének igazolására az RIBA-módszert (rekombináns immunobloting) használjuk a HCV antitestek kimutatásának pontosabb vizsgálatára.

Anti NCV alapvizsgálat

A hepatitis vírusokkal szembeni antitestek jelenlétének meghatározására irányuló hatékony vizsgálatok közé tartozik egy HCV-ellenes mag, amelyet megerősítő tesztként használnak, ha „bizonytalan” eredményeket kapunk.

Ha az anti-HCV magot 1: 1000-es hígítással szérumban észlelik, valószínű, hogy pozitív eredményt diagnosztizálnak, azaz a betegség jelen van.

Ha a minták 1: 1000-es hígításánál negatívak, 1: 200-as hígításnál pozitívak, a vírusos RNS jelenlétére vonatkozó kutatásra van szükség. Ebben az esetben valószínűleg nincs HCV-fertőzés.

Fontos megérteni, hogy a HCV krónikus formáiban az antitesteket folyamatosan észlelik, és a vírus eltávolításakor (eltávolítása a szervezet sejtjeiből) 4–8 évig tartanak. Ezért az anti-HCV jelenléte nem mindig jelzi a szervezet fertőzését, és nem teszi lehetővé az eljárás tevékenységére vonatkozó objektív következtetések meghozatalát: A vírusterhelésről, a májkárosodás mértékéről, a fertőzés időtartamáról és a betegség akut és krónikus formáinak különbségéről a különböző HCV antitestek spektrumának meghatározását ajánljuk. peptidek. Fontos a mennyiségi és minőségi dinamikájuk megfigyelése is.

ELISA-analízis - a HbsAg átvizsgálásától a komplex diagnosztikáig

A modern technológiák bevezetésével az orvostudományban növekszik az immunokémiai diagnosztikai módszerek lehetőségei, amelyek képesek gyorsan és pontosan felismerni a betegséget, amikor más módszerek is erőtlenek. Az a megértés, hogy a hepatitis B vírus nagyon alacsony koncentrációban képes a szervezetben lenni, amelyen még a PCR-rel ilyen megbízható módszerrel sem lehet kimutatni, szükségessé teszi a betegség diagnosztizálásának problémájának újbóli megvizsgálását és az immunvizsgálati lehetőségek megértését.

Ebben az anyagban részletesen elemezzük, hogy mi kapcsolódik az ilyen típusú laboratóriumi kutatásokhoz. Meg fogod tanulni, hogy mi az enzim immunoassay és hogyan történik, milyen az ausztrál antigén és hogyan határozzák meg, milyen érthetetlen rövidítések Hbs ag, Hbcor, átlagban és szerepük az elemzés megfejtésében, valamint hasznosabb és érdekesebb információ megszerzése.

A cikk tartalma:

Általános információk az ELISA-ról

Az ELISA (rövidített ELISA) egy olyan laboratóriumi diagnosztikai módszer, amely képes kimutatni az antigéneket és az antitesteket számos fertőzésből, beleértve a B hepatitist is. A vírus tulajdonságainak ismerete és a szervezet immunválaszának jellemzői lehetővé teszik, hogy ne csak a fertőzést kimutassák, hanem azonosítsák azt is a vakcinázás hatékonysága és a kezelés hatékonyságának értékelése.

Az enzim immunoassay lényege

Az ELISA alapja az „antigén-antitest” reakció, vagy inkább a tulajdonságai.

Egy idegen anyag (antigén), amely különösen a vírus fehérje, inváziója miatt a szervezet védőfehérjéket - antitesteket termel. Az antitestek komplex reakcióba lépnek az antigénnel, blokkolva annak aktivitását.

Az antigénekről és antitestekről az alábbiakban többet fogunk beszélni, de most megjegyezzük, hogy minden antigén esetében szigorúan egyéni, vagy orvosok szerint homológ antitestek. Tehát, ha egy specifikus antigént szeretnénk kimutatni a vérben, diagnosztikai tablettát fogunk használni ellenanyagokkal. Ha antigén van a vérben, akkor az antitestekkel reagál, amely különböző módon kimutatható. És fordítva. Ha bármilyen ellenanyagot akarunk találni, akkor egy megfelelő antigénnel rendelkező tablettára van szükségünk.

Leggyakrabban a medve diagnosztikai értéke csak az antitestek, amellyel szinte bármilyen fertőzést diagnosztizálhat. A hepatitis B vírus sajátossága azonban az, hogy a diagnózis fő szerepét az egyik antigén - az ausztrál antigén - játszik.

Hogyan működik az IFA

Figyeljen egy tipikus ELISA-eljárást egy konkrét példa esetében, ha a kórokozó elleni antitesteket kívánja azonosítani.

Diagnosztikához 96 lyukú tablettát alkalmazunk, amely a megfelelő antigénnel telített. Továbbá az eljárás a következő:

szérumot alkalmazunk minden sejtre;

a homológ antitestek reagálnak az antigénnel és kapcsolódnak a lemezhez;

a mosott tabletták eltávolítása, a nem szedett antitestek eltávolítása;

majd egy enzimatikus címkét vezetünk be a sejtekbe - olyan anyagot, amely az antitestekkel reagál és a sejt tartalmának festését okozza.

Ez a szokásos ELISA eljárás festéssel, amelyet például immunokromatográfiás tesztcsíkokban használnak.

Az ELISA nem korlátozódik a patogén antitestek vagy antigének kvalitatív meghatározására. Minél több antitest található a tabletta sejtjeiben, annál intenzívebb a festett oldat. Összehasonlítva az optikai sűrűségét a vezérléssel, a modern berendezések elég pontosan kiszámíthatják az antitest koncentrációját térfogategységenként. Így kvantitatív ELISA-t végzünk, amelynek mértéke a leggyakrabban az optikai sűrűség egysége (EOP).

Immunemolekulumineszcens analízis

Napjainkban több tucat típusú ELISA létezik, amelyek mindegyike előnyös hatókörrel rendelkezik. A hepatitis B diagnózisában a legnépszerűbb az immunokemilumineszcens analízis.

Ennek az elemzésnek az enzimatikus jelölése nem kromatin, mint a standard ELISA-ban, hanem speciális anyagok - foszforok, amelyek a komplexet ultraibolya fényben ragyogják.

Egy speciális eszköz - luminométer segítségével - pontosan meghatározhatja a kibocsátási szintet és ennek következtében a kívánt anyag koncentrációját.

Az ELISA módszerekkel szinte minden hepatitis B vírus antigénjét és az ellenanyagokat meghatározzuk.

Hepatitis B vírus antigének: Hbs, Hbe és Hbc

Az antigén (antigén) kifejezés két angol szóból származik: antitest - antitest és generátor - gyártó. Tehát az antigén alatt meg kell érteni minden olyan anyagot, amely az antitestek képződését okozza a szervezetben. A leggyakoribb antigének a fehérjék.

Ma a hepatitis B vírus három antigénje ismert: hbsag, hbc és hbe.

Ausztrál antigén

A patogén hepatitis B külső burkolatának részét képező fehérjét régóta a vírus felfedezése előtt detektáltuk. Ez az antigén nevét kapta, mert először Ausztrália őslakosaiból azonosították. Először azonban a fehérjét nem antigénnek tekintették, hanem a bennszülöttek között a vér általánosan elterjedt elemét, és a májbetegségekkel való kapcsolatának tudatossága egy kicsit később következett be.

A vérben lévő antigén hosszú távú megőrzése és az antitestek hiánya a HBeAg-pozitív krónikus hepatitis B kialakulásának lehetőségét jelzi.

Ma a szakirodalomban az „ausztrál antigén” nevet gyakorlatilag nem találták meg, és a nemzetközi rövidítés - a HbsAg (hepatitis b felületi antigén - hepatitis B felületi antigén) - helyettesítette. Ezenkívül megtalálható a hbs antigén rövidítése vagy csak a hbs. Ezen rövidítések bármelyike ​​elfogadható, és kiegészíthető HBV vagy HBV - hepatitis B vírus (hepatitis b vírus) felvételével.

A hepatitis B vírus felszíni antigénje egy figyelemre méltó tulajdonsággal rendelkezik, amely elengedhetetlen diagnosztikai markerként szolgál - a vérben lévő koncentrációja elérheti a nagyon magas szintet, akár fél milligramm / ml vér. Ez azért van, mert az új HBsAg csak egy kis része, amely a hepatitis B vírus szaporodása során keletkezik, az új vírusrészecskék membránjainak építéséhez, a többi pedig szabadon kering a vérben. Ennek eredményeként a vérben lévő hbs részecskék száma meghaladhatja a több százezer alkalommal a virionok számát.

Ez a tulajdonság teszi az ausztrál antigént a hepatitis B szkrínelési diagnózisának fő markerévé, amely a fertőzés után 4-6 héttel a vérben található. Antitestek formájában a felületi antigént fokozatosan helyettesítik. Ha 6 hónap elteltével a HBsAg továbbra is fennáll, akkor ez jelzi a fertőzés átmenetét a krónikus formára.

A közelmúltban, amikor a hbv hbs koncentrációját meg lehetett határozni, a diagnózisban betöltött szerepe még tovább nőtt, mivel az antigén szintjére támaszkodva megkülönböztethető a krónikus hepatitis B (HBV) az egészséges hordozóállapottól, valamint figyelemmel kíséri a kezelés hatékonyságát.

Core antigének

A vírus magjában - a nukleokapszid - olyan fehérjék, amelyek szabályozzák a HBcoreAg és a HBeAg vírus szaporodását.

A HBcoreAg, amely szintén HBCore-antigénnek, hbc-nek vagy magantigéneknek nevezhető, csak a máj szövetében található, közvetlenül a hepatociták magjában. Ezt az antigént nem észlelik a vérben, és nincs diagnosztikai értéke.

A hepatitis vírus szerkezete

HBeAg (HBe, HBprecoreAg) - éppen ellenkezőleg, fontos szerepet játszik a diagnózisban. A HBeAg és a HBcoreAg közeli hozzátartozók. Ezek nagyban hasonlítanak a szerkezethez, és elsősorban a molekulák térbeli helyzetében különböznek. A HBcore-tól eltérően a HBe nem része a nukleokapszid falnak, és szabadon kering a vérben.

A HBE szerepe a fertőző folyamatban nem eléggé világos, azonban a viselkedésének sajátosságai és a fertőző folyamat lefolyásával való kapcsolatuk már eléggé tanulmányozott. A HBeAg a vírus aktív szaporodását jelzi, és lehetővé teszi a krónikus CHB-HBeAg-pozitív vagy HBeAg-negatív fázis megbízható meghatározását.

A HBE kimutatható a vérben már az akut hepatitis B vírus (HBV) inkubációs periódusában, míg a HBeAg magas koncentrációja 3 hétig valószínűleg krónikus folyamat veszélyét jelzi. A HBe koncentrációja közvetlenül kapcsolódik a Dane részecskék (úgynevezett hepatitis B vírus részecskék) tartalmához - minél nagyobb a HBe mennyisége, annál nagyobb a HBV DNS koncentrációja a vérben.

A HBeAg a betegség fertőzőképességének fő markere. A HBeAg-pozitív betegek vérsejtje sokkal fertőzőbb, mint a HBeAg-negatív. Például a HBe-hez és a Hbs-hez pozitív terhes nők esetében a fertőzés gyermekre történő átvitelének valószínűsége eléri az 50% -ot, míg az ilyen esemény valószínűsége HBe-negatív, de a pozitív anyák HBS-je 10-30%.

A Hbe meghatározza a krónikus hepatitis lefolyását. A HBeAg-pozitív krónikus hepatitis B-nek sokkal kedvezőtlenebb prognózisa van a cirrhosis kialakulásának szempontjából.

Valószínűleg mindent tudnod kell a HBV antigénekről, és továbbmegyünk a hepatitis B markerek második csoportjába - antitestek.

Mit jelent a hepatitis C pozitív vagy negatív EIA eredménye?

Az előzetes diagnózis után a hepatitis típusának pontos meghatározása, a betegség lefolyásának előrejelzése, a fejlődés szakaszának megállapítása érdekében különböző szerológiai vizsgálatokat alkalmaznak. A legpontosabb adatokat az enzim immunoassay után kapjuk meg. 95% -ban diagnosztizált ELISA hepatitisz C alkalmazásával. Ez az elemzés lehetővé teszi a Hepatitis C antivírus (HCV antivírus) antitesteinek kimutatását, és nem csak a patológiai folyamat aktivitásának mértékét, hanem a kezelőorvos által előírt és az ő ellenőrzése alatt elvégzett antivirális terápia hatékonyságának mértékét is.

Amikor kutatásra van szükség és annak jellemzői

A hepatitis C a betegség legveszélyesebb típusa, mivel hosszú latens (látens) periódusa és veszélyes következményei vannak. A helyes és időszerű diagnózis megjelenésének és kialakulásának elkerülése érdekében az egyik leginformatívabb módszer az elismert immunvizsgálat.

A szerológiai markerek segítségével meg lehet erősíteni a HCV-fertőzés jelenlétét a beteg vérében, és a strukturális és nem strukturális virális peptidek komplexén alapuló elemzés lehetővé teszi az antitestek létezéséről a legteljesebb és legmegbízhatóbb adatok megszerzését. Egészséges embereknél a hepatitis C vírus elleni antitestek hiányoznak a beteg vérében, és kimutatásuk azt jelzi, hogy egy kórokozó jelen van, és egy patológiai folyamat alakul ki.

A vizsgálat során a szakemberek azonosítják a HCV szerkezeti és nem strukturális fehérjéire közvetlenül vonatkozó IgM és IgG teljes antitesteket. A vizsgálat elvégzése lehetővé teszi a C-hepatitis vírussal fertőzött betegek azonosítását a betegség korai szakaszában, a teljes vér jelenléte a beteg vérében jelzi a betegség vagy a korábbi fertőzés kialakulását.

A betegség kezdetét az IgM-osztályú antitestek jelenléte jelzi, és a C-típusú hepatitist az észlelt IgG-osztályú antitestek határozzák meg. A megbetegedés megerősítése (a betegség végső fázisa), amely időszakra jellemző az érintett szervek anatómiai és funkcionális helyreállítása.

Az időben elvégzett ELISA (ELISA) lehetővé teszi, hogy azonosítsa a patológiai folyamatot a fejlődés korai szakaszában, diagnosztizálja a betegséget nagy pontossággal és növelje a gyors helyreállítási esélyeket. Az ELISA-teszt lehetővé teszi nem csak a vírus jelenlétének meghatározását, hanem a specifikus víruskereső antitestek számát is.

1. Nők a terhességi állapotban, amikor regisztrálnak a születés előtti klinikán.
2. Akut vagy krónikus hepatitis tüneteit mutató betegek.
3. Orvosi szakemberek, akik folyamatosan érintkeznek a biológiai anyagokkal.
4. Az AIDS diagnózisával rendelkező betegek.
5. Kábítószer-függő polgárok.
6. Az alkoholizmusban szenvedők és az asszociális életmódot vezetők.

Az ELISA-teszthez (enzim immunoassay) történő utalás és a bűnüldözési tisztviselők vagy a közszolgáltatások alkalmazottainak fogadása. Az ELISA szükségessége akkor következik be, ha gyanítja, hogy megsérti a máj működését, vagy ha ultrahang után megkérdőjelezhető adatokat kap a szerv állapotáról. Az orvos az ELISA vérvizsgálat elé terjesztheti a beteget, ha az utóbbi komplex sebészeti beavatkozáson megy keresztül. Ha egy nő (különösen 30 évesnél idősebb) terhességet tervez, és a bilirubin vagy transzferáz (ALT, AST) emelkedett értékei találhatók a vérvizsgálatban.

A specifikus vírusellenes IgG antitesteket több éve kimutatták. A koncentráció fokozatosan csökken, ami megerősíti a pozitív dinamikát. A krónikus C-hepatitis esetében ebben az esetben a teljes HCV-ellenes antitestek száma nem változik. A pontos diagnózis az IgM antitestek szintjének meghatározásán alapul.

A hepatitis C lefolyása a betegség kialakulását okozó vírus genotípusától függ. 11 modern gyógyszertípus ismert. A legnehezebb helyzetekben számos vírus genotípusú fertőzés lehetséges, és egyikük mindig domináns. Csak a pontos diagnózis segít a hatékony kezelés kiválasztásában a leghatékonyabb gyógyszerek kiválasztásában, kiválasztásában és a terápiás beavatkozások időtartamának meghatározásában.

A kutatási eredmények értékelése

A C-hepatitis gyanújának diagnosztizálásához és a kórokozó mennyiségére és minőségére vonatkozó indikatív információk megszerzéséhez enzimhez kötött immunoszorbens vizsgálatot (ELISA) kell végezni, amelynek során a szakemberek megerősítik a vírus jelenlétét a szervezetben, és megítélhetik tevékenységét.

A tanulmány segítségével következtetéseket vonhatunk le:

• vírusterhelés;
• a krónikus folyamat kialakulásának kockázata;
• a HCV RNS molekula reprodukciójának (replikációjának) aktivitása;
• a patológiai folyamat időtartama;
• a májkárosodás mértéke.

A betegség krónikus kockázatának mértékét szintén értékelik. Az ELISA antivírusokkal azonosított HCV antitestek vírusreplikációt jeleznek. A végeredmény pontosabb kutatást igényel.

Az enzim immunoassay eredményének kvalitatív értékelését pozitív vagy negatív eredményként fejezzük ki. Az ELISA lehetővé teszi a hepatitisz C kimutatását a betegség korai fejlődési szakaszában, valamint a betegség anikteres formája során.

Az elemzésnek bizonyos előnyei vannak, többek között:

1. A minőségi és mennyiségi mutatók pontossága.
2. A minimális tanulmányi idő.
3. Fázisvizsgálat.

Az enzim immunoassay az egyik felmérés, amelyet nagy pontossággal különböztetünk meg, de az előnyök ellenére egyes esetekben nem teszi lehetővé az emberi szervezetben jelen lévő kórokozó azonosítását.

A kutatáshoz a laboratóriumi asszisztens veszi a beteg vénás vérét, és speciális tartályba helyezi. Egy bizonyos idő elteltével az antigének (idegen mikroorganizmusok) az edény falaihoz kapcsolódnak. A szakember beilleszti az immunoglobulinokat (antitesteket) az edénybe, és immunválaszt keres.

A kapott eredményeket egy speciálisan összeállított táblázat adataival hasonlítjuk össze. Az eredményt az alábbiak szerint értékelik:

Pozitív, jelezve a betegség akut formájának jelenlétét, ha az IgA, IgG, IgM osztályú antitestek jelenlétét a vérvizsgálat során határozzuk meg.

Negatív - mindhárom típusú antitestet nem észleltek, hiányoznak.

A hamis pozitív - ELISA eredmény pozitív, de a PCR után nem igazolt (polimeráz láncreakció).

Kétséges - a vérben lévő markerek nem észlelhetők C-hepatitis jelenlétében. Ez túl korai diagnózis esetén lehetséges. Ismételt elemzés szükséges 2-3 hét múlva. A pontos diagnózis érdekében végezzen PCR-elemzést.

Az elemzés hamis negatív eredménye lehetséges azon betegeknél, akik olyan gyógyszereket szednek, amelyek gátló hatást fejtenek ki a szervezet védelmi rendszerére.

Az elemzés hamis pozitív és hamis negatív eredményei több okból is lehetségesek. Először is, ez a minimális vírusterhelés a betegség fejlődésének korai szakaszában. Ugyanilyen fontos a beteg immunrendszerének állapota és testének egyedi jellemzői. A vizsgálat eredményei jelentősen befolyásolják az immunszuppresszánsok gyógyszereinek beadását.

Nem lehet teljesen biztos benne egy immunvizsgálat eredményének pontosságában, ha a beteg egy terhességi állapotban lévő nő. Hamis eredmények lehetségesek azokban az esetekben, amikor az elemzést autoimmun betegségekben szenvedő betegeknél, jóindulatú daganatokkal járó onkológiai betegségeknél végezzük.

További kutatást végeznek, ha a beteg nemrégiben súlyos fertőző betegséget szenvedett, metabolikus rendellenességet vagy az endokrin rendszer hibás működését diagnosztizálták. Ha a vér összetétele megemelte a heparin szintjét vagy jelentősen csökkentette a nyomelemek szintjét.

Az elemzés pontossága növelhető a szállításra való felkészülésre vonatkozó meglévő szabályok betartásával:

1. A vért csak üres gyomorban adják át. Az utolsó étkezés legalább 8-10 órával megengedett az anyag összegyűjtése előtt.
2. Esténként az elemzés előtt meg kell tagadnia a zsíros, sült, fűszeres, füstölt termékeket és ételeket.
3. Nem lehet beszélni az alkoholfogyasztásról.
4. Jobb a dohányzásról a véradás előtti napon.

Az enzimhez kötött immunoszorbens vizsgálatot csak azoknál a betegeknél lehet elvégezni, akik jelenleg nem szenvednek katarrális, gyulladásos vagy fertőző betegségekben, és nem panaszkodnak a nemkívánatosságra.

A felsorolt ​​szabályok és követelmények megsértése azt eredményezi, hogy az elemzés eredménye hamis pozitívnak minősül. Ez a helyzet az esetek 15-20% -ában alakul ki. Azonban a teljes bizalom érdekében az orvosok további vizsgálatot nyújtanak a betegeknek, amelyek során vérüket a PCR-re kell adni.

Polimeráz láncreakció

A diagnózis csak az ELISA elemzés eredményei alapján lehetséges. Az antitestek jelenléte nem bizonyítja a patogén vírus jelenlétét a szervezetben a vizsgálat időpontjában. A téves tesztelés idegrendszert vagy még akutabb reakciót okozhat a betegnek. Az ELISA eredményén alapuló diagnózis nem pontos. Kiegészítő kutatásra van szükség, amelynek eredménye az orvosok végső ítéletét eredményezi.

Fontos megjegyezni, hogy az olyan betegeknél, akik jelenleg más fertőző betegségekben szenvednek, hamis pozitív eredményt lehet elérni, de immunrendszerük nem reagált megfelelően a kórokozók vagy vírusok behatolására a szervezetbe.

A C-hepatitisz diagnosztizálása számos laboratóriumi vizsgálatot tesz lehetővé, amelyek közé tartozik az enzimhez kötött immunoszorbens vizsgálat (ELISA). A mutatók minőségi értékelését pozitív vagy negatív eredményként definiáljuk. A hepatitis B vírus hiánya a beteg vérében a norma, de egyes esetekben a vizsgálat után a szakértők megállapítják, hogy néhány RNS-fragmens (ribonukleinsav) jelentéktelen koncentrációit találtak biológiai anyagban. PCR (polimeráz láncreakció) segítségével azonosítsa azokat.

Ez a vérvizsgálat lehetővé teszi a hepatitis C okozta kórokozó azonosítását a betegség fejlődésének korai szakaszában, és nagy pontossággal történő diagnózist. A vizsgálat azon a tényen alapul, hogy a vírusok szerkezetükben DNS-molekulák (hepatitis B) vagy RNS (hepatitis C).

A PCR elemzése során a beteg vérmintáinak különleges kezelésével:

• növeli a nukleinsavmolekulák koncentrációját;
• meghatározza típusukat;
• meghatározza a kórokozó típusát.

Ha a humán vérben kis mennyiségű patogén RNS-fragmens van, akkor mindegyiküket PCR-rel detektáljuk. Ez lehetővé teszi a pontos diagnózis elkészítését. Ennek az elemzésnek a fő különbsége minden más kutatási módszerrel 100% -os pontos diagnózis.

Ezt az elemzést a terhes nők vérének tanulmányozásában végeztük el, akik a szülés előtti klinikai nyilvántartásba vételre jelentkeztek, és a gyanús hepatitis C-vel hosszú látens (látens) periódussal rendelkeznek. A PCR akkor szükséges, ha az enzim immunoassay után kétes eredményt kaptunk.

A Hepatitis C vírus ebben a helyzetben a beteg testében van, de még nem provokálta a betegség gyors fejlődését. Ez a betegség látens folyamata. Az elemzést meglehetősen gyorsan végezzük, mivel nincs szükség a kórokozó tápközeggel történő termesztésére az eredmény eléréséhez. A PCR és az enzimhez kötött immunoszorbens vizsgálat (ELISA) közötti fő különbség az, hogy ebben a vizsgálatban nem létezik hamis pozitív vagy kétes eredmény.